Page 53 - 《水产学报》2025年第10期
P. 53

于莺曼,等                                                                水产学报, 2025, 49(10): 109604

                              表 2    引物序列                      可以促进大口黑鲈肝糖原合成,对大口黑鲈糖
                 Tab. 2    Sequences of the primers used in this study  代谢其他指标无显著影响。

                 引物          引物序列5′-3′          基因序列号
                primers    primers sequence 5′-3′  GenBank no.  2.3    饲料中添加   OAA  对大口黑鲈      TCA  循环相
               pdk1-F  CCCGGTTGTCAGCCAAAATG                    关指标的影响
               pdk1-F  GCTGGGTTCACCTTCACCTT    XM_038720505.1
                                                                   与对照组相比,OAA          添加组肝脏柠檬酸含
               pdhe1α-F  CACCGGCCGGAATGTGTT
                                                               量均显著降低       (P<0.05)(图  3-a),MA  组和  HA  组
               pdhe1α-R  GGATGCCGCTTCTTACTGGT  XM_038708733.1
                                                               肌肉柠檬酸含量显著降低              (P<0.05)(图  3-b)。随
               glut2-F  AGCCACTCAGAGACGAATCC
               glut2-R  ATACTGTCACCTCTGTGCCCT  XM_038731498.1  OAA  添加浓度增加,肝脏琥珀酸脱氢酶                  (SDH)
               cs-F    GAAGGGTTGTGCCAGGCTAT                    活 性 逐 渐 升 高 , MA      组 和   HA  组 显 著 增 加
               cs-R    AAACATGGGGTCATTGGGCA    XM_038721966.1  (P<0.05)(图  3-c)。OAA  添加组肝脏苹果酸脱氢
               sdhb-F  ACACACCACTAGATACTTTGGC                  酶  (MDH) 活 性 与 对 照 组 相 比 无 显 著 性 差 异
               sdhb-R  GACCAGTCAGCAAGACACTT    XM_038696807.1                                             +
                                                               (P>0.05)(图  3-d)。HA  组肝脏中    NADH   和  NAD
               mdh2-F  GAGACCTACAGTTCGCCTCG
                                                               含量、肌肉中       NAD 含量显著上升        (P<0.05)(图  3-
                                                                                +
               mdh2-R  ACTCACCAGGGGGCTATTCT    XM_038711981.1
                                                               e~f, h), 肌 肉 中   NADH/NAD 比 值 显 著 下 降
                                                                                           +
               cicb-F  GAAAAGCAAAACGACAGGTGG
                                                               (P<0.05)(图  3-j),肝脏中   NADH/NAD 比值和肌
                                                                                                 +
               cicb-R  GCAGACAAGGAGGGTCAATG    XM_038711039.1
                                                               肉中         含量有上升趋势        (P>0.05)(图  3-g,i)。
               fas-F   CAGTTGGAGGTGCGTCTCAT                        NADH
               fas-R   ACGGAATGAGTCAAGGGCTG    XM_038735140.1  与对照组相比,OAA           添加组肝脏柠檬酸合酶
               pparγ-F  ATGTCACACAACGCCATTCG                   (cs) 基因表达显著下调        (P<0.05),琥珀酸脱氢酶
               pparγ-R  GTACAGATGCCGGGACAGAG   XM_038695879.1  亚基   b(sdhb)、苹果酸脱氢酶        2(mdh2) 基因表达
               srebp1-F  ATATTGTGTGGCCCAGCCTC                  有下调趋势       (P>0.05)。LA  组肝脏柠檬酸载体
               srebp1-R  AGAGGACCACCACTTGGAGT  XM_038699585.1
                                                               (cicb) 与对照组相比基因表达显著上调               (P<0.05)
               srebp2-F  ATGCCGCTGTTAACCCCAC
                                                               (图  3-l), 肌 肉  cs 基 因 表 达 显 著 上 调   (P<0.05)
               srebp2-R  CCCAGTCTGTCCGTGTTTGAT  XM_038694760.1
                                                               (图  3-k)。结果表明,饲料中添加            OAA  上调   cs、
               lipin1-F  TCTCTTCCCCTGTTAGCAGCC
                                                               cicb  等  TCA  循环相关基因表达,增强            SDH  酶
               lipin1-R  GTTCCTGCTTCTGGTGGGAA  XM_038701580.1
                                                               活,促进     TCA  循环;肝脏     cs、sdhb、mdh2   基因
               atgl-F  CCATGATGCTCCCCTACACT
                                                               表达下调或因       OAA   过度激活     TCA  循环相关酶
               atgl-R  GGCAGATACACTTCGGGAAA    XM_038705351.1
               lpla-F  GATGTTCGAAAGCTGGGTGC                    活性,进而负反馈作用于相关基因                 mRNA  表达。

               lpla-R  GCAACTGCAGCTCGTTTTGT    XM_038715978.1
                                                               2.4    饲料中添加    OAA  对大口黑鲈脂肪代谢的
               cpt1a-F  AGCCCCACCCCAACCTACCAG
                                                               影响
               cpt1a-R  CGGCCCTCACGGAATAAACGC  XM_038705335.1
               pparα-F  TGGAGAAAGAGGTGGCAAGTC                      与对照组相比,HA           组肝脏粗脂肪显著下
               pparα-R  TGAATGATGAAAGGCGGCGTG  XM_038738333.1  降  (P<0.05),LA、MA    组有下降趋势         (P>0.05)
               mstn-F  CCTCGACCAGTACGACGTG                     (图  4-a)。OAA  添加组血清、肝脏游离脂肪酸
               mstn-R  ACGATGGCCTCGGGTTCA      XM_038719556.1
                                                               (NEFA) 与对照组相比无显著性差异                 (P>0.05)
               myog-F  GAGATCTTGCGGAGTGCCAT
                                                               (图  4-b~c)。MA、HA    组肌肉粗脂肪显著下降
               myog-R  CTTGACGACGACACTCTGGG    XM_038697403.1
                                                               (P<0.05), LA  组 有 下 降 趋 势   (P>0.05)(图  4-d),
               myod-F  ATTTTAACGGCCCGACCTGT
                                                               OAA  添加组肌肉      TG  显著下降    (P<0.05)(图  4-e)。
               myod-R  AGAGATCCGCTCCACAATGC    XM_038706745.1
                                                               与对照组相比,血清丙氨酸氨基转移酶                     (ALT)
               mTOR-F  AGGGATGAATCGTGACGACAG
                                                               和天冬氨酸氨基转移酶            (AST) 活性无显著性差
               mTOR-R  GTGATGTGACGGGGTTTGGT    XM_038702468.1
               ef1α-F  TCATTGATGCCCCTGGACAC                    异  (P>0.05) (图  4-f~g)。肝脏表型与组织学分析
               ef1α-R  CCGACGGGTACAGTTCCAAT    XM_038724777.1  表明,随     OAA  添加浓度增加,大口黑鲈肝脏呈
               β-actin  CAGCATCATGAAGTGCGACG                   现色泽加深的表观特征            (图  4-i)。通过肝脏组织
               β-actin  AGAGCTGAAGTTGTCGGGTG   XM_038695351.1
                                                               石蜡切片与油红染色观察,结合脂滴染色面积
              中国水产学会主办  sponsored by China Society of Fisheries                          https://www.china-fishery.cn
                                                            5
   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58