Page 53 - 《水产学报》2025年第10期
P. 53
于莺曼,等 水产学报, 2025, 49(10): 109604
表 2 引物序列 可以促进大口黑鲈肝糖原合成,对大口黑鲈糖
Tab. 2 Sequences of the primers used in this study 代谢其他指标无显著影响。
引物 引物序列5′-3′ 基因序列号
primers primers sequence 5′-3′ GenBank no. 2.3 饲料中添加 OAA 对大口黑鲈 TCA 循环相
pdk1-F CCCGGTTGTCAGCCAAAATG 关指标的影响
pdk1-F GCTGGGTTCACCTTCACCTT XM_038720505.1
与对照组相比,OAA 添加组肝脏柠檬酸含
pdhe1α-F CACCGGCCGGAATGTGTT
量均显著降低 (P<0.05)(图 3-a),MA 组和 HA 组
pdhe1α-R GGATGCCGCTTCTTACTGGT XM_038708733.1
肌肉柠檬酸含量显著降低 (P<0.05)(图 3-b)。随
glut2-F AGCCACTCAGAGACGAATCC
glut2-R ATACTGTCACCTCTGTGCCCT XM_038731498.1 OAA 添加浓度增加,肝脏琥珀酸脱氢酶 (SDH)
cs-F GAAGGGTTGTGCCAGGCTAT 活 性 逐 渐 升 高 , MA 组 和 HA 组 显 著 增 加
cs-R AAACATGGGGTCATTGGGCA XM_038721966.1 (P<0.05)(图 3-c)。OAA 添加组肝脏苹果酸脱氢
sdhb-F ACACACCACTAGATACTTTGGC 酶 (MDH) 活 性 与 对 照 组 相 比 无 显 著 性 差 异
sdhb-R GACCAGTCAGCAAGACACTT XM_038696807.1 +
(P>0.05)(图 3-d)。HA 组肝脏中 NADH 和 NAD
mdh2-F GAGACCTACAGTTCGCCTCG
含量、肌肉中 NAD 含量显著上升 (P<0.05)(图 3-
+
mdh2-R ACTCACCAGGGGGCTATTCT XM_038711981.1
e~f, h), 肌 肉 中 NADH/NAD 比 值 显 著 下 降
+
cicb-F GAAAAGCAAAACGACAGGTGG
(P<0.05)(图 3-j),肝脏中 NADH/NAD 比值和肌
+
cicb-R GCAGACAAGGAGGGTCAATG XM_038711039.1
肉中 含量有上升趋势 (P>0.05)(图 3-g,i)。
fas-F CAGTTGGAGGTGCGTCTCAT NADH
fas-R ACGGAATGAGTCAAGGGCTG XM_038735140.1 与对照组相比,OAA 添加组肝脏柠檬酸合酶
pparγ-F ATGTCACACAACGCCATTCG (cs) 基因表达显著下调 (P<0.05),琥珀酸脱氢酶
pparγ-R GTACAGATGCCGGGACAGAG XM_038695879.1 亚基 b(sdhb)、苹果酸脱氢酶 2(mdh2) 基因表达
srebp1-F ATATTGTGTGGCCCAGCCTC 有下调趋势 (P>0.05)。LA 组肝脏柠檬酸载体
srebp1-R AGAGGACCACCACTTGGAGT XM_038699585.1
(cicb) 与对照组相比基因表达显著上调 (P<0.05)
srebp2-F ATGCCGCTGTTAACCCCAC
(图 3-l), 肌 肉 cs 基 因 表 达 显 著 上 调 (P<0.05)
srebp2-R CCCAGTCTGTCCGTGTTTGAT XM_038694760.1
(图 3-k)。结果表明,饲料中添加 OAA 上调 cs、
lipin1-F TCTCTTCCCCTGTTAGCAGCC
cicb 等 TCA 循环相关基因表达,增强 SDH 酶
lipin1-R GTTCCTGCTTCTGGTGGGAA XM_038701580.1
活,促进 TCA 循环;肝脏 cs、sdhb、mdh2 基因
atgl-F CCATGATGCTCCCCTACACT
表达下调或因 OAA 过度激活 TCA 循环相关酶
atgl-R GGCAGATACACTTCGGGAAA XM_038705351.1
lpla-F GATGTTCGAAAGCTGGGTGC 活性,进而负反馈作用于相关基因 mRNA 表达。
lpla-R GCAACTGCAGCTCGTTTTGT XM_038715978.1
2.4 饲料中添加 OAA 对大口黑鲈脂肪代谢的
cpt1a-F AGCCCCACCCCAACCTACCAG
影响
cpt1a-R CGGCCCTCACGGAATAAACGC XM_038705335.1
pparα-F TGGAGAAAGAGGTGGCAAGTC 与对照组相比,HA 组肝脏粗脂肪显著下
pparα-R TGAATGATGAAAGGCGGCGTG XM_038738333.1 降 (P<0.05),LA、MA 组有下降趋势 (P>0.05)
mstn-F CCTCGACCAGTACGACGTG (图 4-a)。OAA 添加组血清、肝脏游离脂肪酸
mstn-R ACGATGGCCTCGGGTTCA XM_038719556.1
(NEFA) 与对照组相比无显著性差异 (P>0.05)
myog-F GAGATCTTGCGGAGTGCCAT
(图 4-b~c)。MA、HA 组肌肉粗脂肪显著下降
myog-R CTTGACGACGACACTCTGGG XM_038697403.1
(P<0.05), LA 组 有 下 降 趋 势 (P>0.05)(图 4-d),
myod-F ATTTTAACGGCCCGACCTGT
OAA 添加组肌肉 TG 显著下降 (P<0.05)(图 4-e)。
myod-R AGAGATCCGCTCCACAATGC XM_038706745.1
与对照组相比,血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)
mTOR-F AGGGATGAATCGTGACGACAG
和天冬氨酸氨基转移酶 (AST) 活性无显著性差
mTOR-R GTGATGTGACGGGGTTTGGT XM_038702468.1
ef1α-F TCATTGATGCCCCTGGACAC 异 (P>0.05) (图 4-f~g)。肝脏表型与组织学分析
ef1α-R CCGACGGGTACAGTTCCAAT XM_038724777.1 表明,随 OAA 添加浓度增加,大口黑鲈肝脏呈
β-actin CAGCATCATGAAGTGCGACG 现色泽加深的表观特征 (图 4-i)。通过肝脏组织
β-actin AGAGCTGAAGTTGTCGGGTG XM_038695351.1
石蜡切片与油红染色观察,结合脂滴染色面积
中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries https://www.china-fishery.cn
5