Page 45 - 《中国药科大学学报》2026年第1期

第 57 卷第 1 期 邴天德，等：乳酸脱氢酶 A 抑制剂的设计、合成与生物活性 39

柱色谱纯化（洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，15∶1）得到 Table 1 Yield, melting point and MS data of target compounds
8−25
白色固体 33（0.33 g, 91.5%），mp: 119.8~120.2 ℃。
Compd. Amount/mg Yield% Melting/°C ESI-MS m/z:[M–H] –
2.2.8 中间体 35 的合成 将溴苄 34（0.3 mmol）、
8 51.7 93.2 239.1−240.0 276.0452
三甲基硅基叠氮（0.36 mmol）溶于 HMPA（5 mL），
9 52.8 89.4 199.3−200.9 294.0363
60 ℃ 反应 36 h。反应结束后，将反应液倒入冰水 10 56.1 90.0 212.5−213.9 310.0068
（30 mL）中以淬灭反应，加入乙酸乙酯（30 mL×3）萃 11 65.0 91.3 235.3−236.0 353.9561
取，合并有机相，有机相用饱和食盐水（50 mL×3）洗 12 55.1 89.6 214.5−215.0 306.0562
涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到无色液体 13 63.1 91.3 234.2−235.1 344.0330
35 29.2~61.1 mg（73.2%~96.0%）。 14 65.3 90.3 234.4−235.7 360.0279
2.2.9 中间体 36 的合成 将中间体 33（50.0 mg, 15 57.6 89.9 241.0−242.2 319.0508
0.276 mmol）和叠氮化合物中间体 35（0.41 mmol） 16 63.9 89.7 265.1−266.5 355.0179
17 45.3 79.1 216.3−217.5 285.0452
溶 于 DMF（ 10 mL） ， 加 入 CuSO ·5H O（ 14.0 mg，
4 2
18 51.3 84.3 266.0−267.1 303.0353
0.055 mmol）和 Na-L-ascorbate（21.0 mg，0.11 mmol），
19 60.1 93.7 257.5−259.0 319.0062
室温反应过夜。反应结束后，将反应液倒入冰水
20 58.4 79.9 232.0−231.2 362.9558
（30 mL）中以淬灭反应，加入乙酸乙酯（30 mL×3）
21 38.3 63.8 223.5−224.7 299.0608
萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水（50 mL×3） 22 39.8 56.2 225.1−226.6 353.0326
洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗品， 23 44.0 59.4 233.5−234.8 369.0279
最后通过硅胶柱色谱纯化（洗脱剂为石油醚-乙 24 41.1 62.4 237.2−238.0 328.0512
酸 乙 酯 ， 3∶1） ， 得 到 白 色 固 体 36 33.6~56.6 mg 25 43.7 59.8 241.6−242.3 364.0183
（40.5%~54.1%）。
1
13
Table 2 H NMR and C NMR data of target compounds 8−25
2.2.10 目标化合物 17~25 的合成 将中间体 36
Compd. NMR
（0.2 mmol）溶于 THF（5 mL），加入 LiOH（32.0 mg,
8 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ: 10.82 (br.s, 1H, 1-OH),
0.8 mmol）水溶液（3 mL），室温反应过夜。反应结束 7.81 (s, 1H, Ar-H), 7.40–7.24 (m, 5H, Ar-H), 7.09 (br.s,
1H, 11-NH), 4.34 (d, J = 5.9 Hz, 2H, 13-CH 2 )
后，减压蒸除有机溶剂，随后滴加 1 mol/L 稀盐酸，
调 pH 至 3~4，析出白色固体，抽滤，滤饼用水（5 mL× 9 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ: 10.86 (br.s, 1H, 1-OH),
7.81 (d, J = 1.2 Hz, 1H, Ar-H), 7.37–7.30 (m, 2H, Ar-H),
3）洗涤，干燥，得到白色固体 17~25。（目标化合物 7.16 (t, J = 8.9 Hz, 2H, Ar-H), 7.09 (br.s, 1H, 11-NH),
8~25 的收率、熔点、质谱数据列于表 1，目标化合 4.31 (d, J = 5.9 Hz, 2H, 13-CH 2 )
物 8~25 的 H NMR 和 C NMR 列于表 2。） 10 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ: 12.72 (br.s, 1H, 1-OH),
1
13
10.91 (s, 1H, 9-NH), 7.82 (s, 1H, Ar-H), 7.40 (d, J = 8.0
2.3 分子对接实验 Hz, 2H, Ar-H), 7.32 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar-H), 7.13 (br.s,
1H, 11-NH), 4.32 (d, J = 6.0 Hz, 2H, 13-CH 2 )
本 研 究 所 涉 及 的 分 子 对 接 采 用 Discovery
Studio 2020 中 的 CDOCKER 模 块 完 成 。 所 用 的 11 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ: 12.70 (br.s, 1H, 1-OH),
10.89 (br.s, 1H, 9-NH), 7.82 (s, 1H, Ar-H), 7.58-7.49 (m,
LDHA PDB 蛋白结构从 RCSB 蛋白质数据库中下 2H, Ar-H), 7.31-7.22 (m, 2H, Ar-H), 7.11 (d, J = 6.4 Hz,
1H, 11-NH), 4.31 (d, J = 6.0 Hz, 2H, 13-CH 2 )
载，网址为 https://www. rcsb. org/，晶体结构 PDB
ID 为 4ZVV 和 6Q13，步骤如下。 12 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ: 10.76 (br.s, 1H, 1-OH),
7.81 (s, 1H, Ar-H), 7.23 (d, J = 8.7 Hz, 2H, Ar-H), 7.01
（1）小分子配体的预处理：使用 Small molecules (br.s, 1H, 11-NH), 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 2H, Ar-H), 4.26 (d,
J = 5.9 Hz, 2H, 13-CH 2 ), 3.73 (s, 3H, 21-CH 3 )
程序下的 Prepare Ligands 模块对将要进行对接的
小分子配体进行预处理。其余参数保持默认。 13 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ: 12.71 (br.s, 1H, 1-OH),
10.99 (br.s, 1H, 9-NH), 7.82 (s, 1H, Ar-H), 7.71 (d, J =
（2）蛋白的预处理：使用 Macromolecules 程序 8.1 Hz, 2H, Ar-H), 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 2H, Ar-H), 7.25 (t,
J = 6.1 Hz, 1H, 11-NH), 4.44 (d, J = 6.0 Hz, 2H, 13-CH 2 )
下的 Prepare Proteins 模块预处理目标蛋白。
（3）活性位点的定义：使用 Receptor-Ligand 14 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ: 12.70 (br.s, 1H, 1-OH),
10.90 (br.s, 1H, 9-NH), 7.82 (s, 1H, Ar-H), 7.43 (d, J =
Interactions 程序下的 Define and Edit Binding Site 8.7 Hz, 2H, Ar-H), 7.34 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar-H), 7.15 (t,
J = 6.0 Hz, 1H, 11-NH), 4.37 (d, J = 6.0 Hz, 2H, 13-CH 2 )
Tools 模块对活性位点进行定义，以配体-辅因子-蛋