Page 44 - 《中国药科大学学报》2026年第1期
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38                        学报   Journal of China Pharmaceutical University 2026, 57(1): 34 − 45  第 57 卷

                2    实验部分                                       倒入水（30 mL）中以淬灭反应，减压蒸除有机溶剂，
                                                                加入乙酸乙酯（30 mL×3）萃取，合并有机相，有机相
                2.1    试剂与仪器
                                                                用饱和食盐水（50 mL×3）洗涤，无水硫酸钠干燥，减
                    本研究所用化学试剂均为市售化学纯或分析
                                                                压蒸除溶剂得粗品，随后通过硅胶柱色谱分离纯化
               纯，无特殊说明时直接使用。其中氘代溶剂为
                                                                （洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，15∶1），得中间体                   30
               DMSO-d 或 6  CDCl （安徽泽升科技股份有限公司），
                                3
               内参为    TMS；实验所用的硅胶为            200~300 目硅胶       0.11~0.16 g （58.1%~65.3%）。
                                                                 2.2.4  目 标 化 合 物  8~16 的 合 成   将 中 间 体    30
               （青岛海洋化工有限公司）；洗脱剂为石油醚、乙酸
                                                                （0.2 mmol）溶于   THF（5 mL），加入     LiOH（32.0 mg,
               乙酯、二氯甲烷、甲醇（上海艾巨酷生物科技有限公
                                                                0.8 mmol）水溶液（3 mL），室温反应过夜。反应结束
               司），以上洗脱剂均在         40 ℃  减压蒸馏后使用；人类乳
               酸脱氢酶     A（美国   Lee Biosolution 公司）；DMEM   培     后，减压蒸除有机溶剂，随后滴加                1 mol/L  稀盐酸，
               养基，RPMI-1640 培养基（美国         Gibco Life Sciences  调  pH  至  3~4，析出白色固体，抽滤，滤饼用水（5 mL×
               公司）。                                             3）洗涤，干燥，得到白色固体           8~16。
                    化合物熔点由       Hanon MP420 自动熔点仪（济             2.2.5 中间体    31 的合成 将中间体           27（1.00 g,
                                                                                           4
                                                          1
               南海能仪器股份有限公司）测定；核磁共振氢谱（ H                         58  mmol） 溶 于  27%  的  H SO 水 溶 液 （ 10  mL） ，
                                                                                        2
               NMR）及核磁共振碳谱（ C NMR）由               ARX-300 和     0 ℃  下滴加    NaNO （2.40 g, 348 mmol）水溶液（5
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                                                                                 2
               ARX-400 核磁共振仪（北京布鲁克科技有限公司）                       mL），0 ℃   反应   1 h 后，滴加   KI（2.89 g, 174 mmol）
               测定；高分辨率（HRMS）质谱由 Q-Tof micro 型质谱                 水溶液（5 mL），室温反应         4 h。反应结束后，将反应
               仪（上海    Waters 科技有限公司）测定；LDHA          抑制剂       液倒入冰水（30 mL）中以淬灭反应，加入乙酸乙酯
               活性由    TECAN SPARK   酶标仪（上海帝肯贸易有限                （30 mL×3）萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水
               公司）测定；薄层色谱（TLC）使用的是               GF 25 4  型薄层   （50 mL×3）洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂
               色谱硅胶板（烟台德信生物科技有限公司）。                             得到粗品，最后通过硅胶柱色谱纯化（洗脱剂为
                2.2    化学合成                                     石油醚-乙酸乙酯，15∶1）得到白色固体                31（1.27 g,
                2.2.1 中间体    27 的合成 将化合物           26（1.00 g,   77.5%），mp：82.0~82.4 ℃。
               5.0 mmol）、硫脲（0.59 g, 7.5 mmol）溶于无水乙醇              2.2.6 中间体    32 的合成 将中间体           31（1.00 g,
               （20 mL），N 保护后升温至         80 ℃  反应  4 h。反应结       3.5 mmol）、三乙胺（1.16 g, 10.5 mmol）、Pd(PPh )
                         2
                                                                                                           3 2
               束后冷却至室温，减压蒸除溶剂，将所得油状物倒                           Cl （0.15 g, 0.21 mmol）、CuI（0.04 g, 0.28 mmol）溶
                                                                  2
               入冰水（20 mL）中，加入氨水（20 mL）后搅拌有淡黄                    于无水乙腈（15 mL），N 保护下滴加三甲基硅基乙
                                                                                     2
               色固体析出，抽滤，滤饼用水（5 mL）、甲苯（2 mL）                     炔（0.42 g, 4.2 mmol）的乙腈溶液（5 mL），80 ℃        反
               依次洗涤，干燥，得白色固体               27（0.50 g, 57.2%），   应  5 h。反应结束后冷却至室温，将反应液倒入冰
               mp∶171.6~172.0 ℃。                                水（30 mL）中淬灭反应，加入乙酸乙酯（30 mL×3）萃
                2.2.2 中间体   29 的合成 将化合物          28（2.0 mmol）   取，合并有机相，有机相用饱和食盐水（50 mL×3）洗
               和  NaHCO （0.25 g, 2.6 mmol）溶于甲基叔丁基醚-水            涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗品，最后
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               （1∶1）的混合液      10 mL，加入对硝基苯基氯甲酸酯                 通过硅胶柱色谱纯化（洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，
               （0.60 g, 3.0 mmol），室温反应    4 h。反应结束后，加           15∶1）得到白色固体        32（0.70 g, 78.9%），mp：132.7~
               入乙酸乙酯（30 mL），有机相依次用饱和食盐水（50                      133.4 ℃。
               mL×3）和   1 mol/L  稀盐酸（30 mL×3）洗涤，减压蒸除             2.2.7 中间体    33 的合成 将中间体           32（0.50 g,
               溶剂得到中间体          29 0.42~0.66 g （66.3%~94.3%）。   1.97 mmol）溶于甲醇（10 mL），加入四丁基氟化铵
               此中间体无需进一步处理，直接用于下一步反应。                           （0.51 g, 1.97 mmol），室温反应    15 min。反应结束
                2.2.3 中间体   30 的合成 将中间体         29（0.66 mmol）   后，将反应液倒入水（30 mL）中以淬灭反应，减压蒸
               和  27（0.10 g, 0.60 mmol）溶于无水  THF（5 mL），加入       除有机溶剂，加入乙酸乙酯（30 mL×3）萃取，合并有
               三乙胺（0.12 g, 1.20 mmol），N 保护后升温至          78 ℃    机相，有机相用饱和食盐水（50 mL×3）洗涤，无水硫
                                         2
               回流反应     36 h。反应结束后冷却至室温，将反应液                    酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗品，最后通过硅胶
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