Page 109 - 《中国药科大学学报》2026年第1期

第 57 卷第 1 期 钱程昱，等：黄芪桂枝五物汤通过 Nrf2/HO-1 通路改善脑缺血损伤的机制研究 103
A 1.5 B 1.5 C 1.5 D 2.5 **

Nrf2 mRNA expression (FC) 1.0 ** ## ## ## HO-1 mRNA expression (FC) 1.0 ** ## ## ## Bcl-2 mRNA expression (FC) 1.0 ** # # # Bax mRNA expression (FC) 2.0 ## ## #

1.5
1.0
0.5
0.5
0.5
0.5
0
Sham Model HGWD-L HGWD-H NBP 0 Sham Model HGWD-L HGWD-H NBP 0 Sham Model HGWD-L HGWD-H NBP 0 Sham Model HGWD-L HGWD-H NBP

E F
Sham Model NBP HGWD-H HGWD-L 2.0 Nrf2
Nrf2 100 kD HO-1 *
Bcl-2
β-actin 42 kD 1.5 Bax # #
HO-1 32 kD
β-actin 42 kD Relative protein expression (FC) 1.0 ## # #
Bcl-2 26 kD * ## # #
β-actin 42 kD 0.5 ** **
Bax 21 kD
β-actin 42 kD 0
Sham Model NBP HGWD-H HGWD-L

Figure 2 Effects of HGWD on mRNA and protein expression of Nrf2/HO-1 and Bcl-2/Bax pathway in the brain of C57BL/6 mice
( x ± s, n = 8)
A-D: mRNA expression levels of Nrf2, HO-1, Bcl-2 and Bax in the brain of C57BL/6 mice; E: Expression of Nrf2, HO-1, Bcl-2 and Bax in C57BL/6
mice brain assayed by Western blot; F: Quantification of Nrf2, HO-1, Bcl-2 and Bax protein levels Nrf2: nuclear factor erythroid 2-related factor 2;
HO-1: heme oxygenase-1; Bcl-2: B-cell lymphoma-2; Bax: Bcl-2-associated X protein
#
##
**P < 0.01 vs sham group; P < 0.05, P < 0.01 vs model group
间各项指标病变程度均高于野生型小鼠 MCAO 模 现红色荧光，细胞核为蓝色荧光，神经元 MAP2 标
-/-
型，HGWD-H 对 Nrf2 小鼠 MCAO 模型各项指标 记阳性率超过 95%，表明培养的皮质神经元纯度符
改善作用较弱。此结果表明，Nrf2 的缺失可能阻断 合要求。OGD/R 造模对原代神经元细胞存活率
了 HGWD 激活的抗氧化和抗炎途径，从而影响了 有显著抑制作用，且 LDH 的漏出增加 2~4 倍。
其对脑缺血损伤的治疗效果，提示 Nrf2/HO-1 通路 HGWD 治疗可明显增加造模细胞存活率，减少

可能是 HGWD 改善脑缺血损伤的重要分子机制之 LDH 漏出。且改善作用具有一定的浓度相关性
一（图 3）。 (图 5-B、图 5-C)。
3.4 Nrf2 基因敲除后 HGWD 对脑缺血小鼠抗氧 与对照组相比，OGD/R 造模使得原代神经元
化和凋亡相关基因表达的影响 细胞中 Nrf2 和 HO-1 的 mRNA 水平均显著下调，
Nrf2 模型组小鼠脑组织 HO-1、Bcl-2 和 Bax 同 时 凋 亡 抑 制 分 子 Bcl-2 下 调 ， 而 促 凋 亡 分 子
-/-
等分子的 mRNA 和蛋白表达水平变化趋势与野生 Bax 上调。与模型组相比，HGWD 治疗显著上调了
型 C57BL/6 模型小鼠一致，且变化幅度进一步增 Nrf2、HO-1 和 Bcl-2 表达，并下调 Bax 表达，且改善
大。与模型组相比，HGWD-H 治疗组对脑组织 作用具有一定的浓度相关性。这些结果与体内实
HO-1、Bcl-2 和 Bax mRNA 和蛋白表达未见明显改 验一致，进一步证明了 HGWD 通过激活 Nrf2/HO-1
善作用（图 4）。由此提示，HGWD 抑制细胞凋亡作 抗氧化信号通路并调节 Bcl-2/Bax 凋亡通路改善脑
用部分依赖于 Nrf2/ HO-1 通路的调节作用。 缺血损伤 (图 5-D~图 5-G)。
3.5 HGWD 对 OGD/R 诱导的大鼠原代神经元的
4 讨 论
保护作用
如图 5-A 所示，原代神经元细胞胞体和突起呈 中医学认为，卒中为“血痹”范畴。汉代张仲景