Page 38 - 《中国药科大学学报》2025年第5期
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570 学报 Journal of China Pharmaceutical University 2025, 56(5): 566 − 571 第 56 卷
1 S7 (5.32%),木质部最低(4.52%),其中木质部与周皮、
S6
S5 韧皮部均存在显著差异(P < 0.05)。综合比较表明,
S4
S3
S2 韧皮部整体表现出更高的总皂苷积累水平。
S1
3.3.3 总黄酮含量 根据表 1 检测结果,黄芪总黄
酮的分布特征呈现明显组织特异性差异:在过
1 65 目筛部分中,周皮总黄酮含量最高(0.638%),木
质部次之(0.463%),韧皮部最低(0.296%),其中韧
1
皮部与周皮、木质部均存在非常显著差异(P < 0.01);
0 10 20 30 40 50 60 70 而在筛余部分,周皮总黄酮含量最高(0.876%),木
t R /min
质部次之(0.370%),韧皮部最低(0.299%),其中周
Figure 6 HPLC chromatograms of astragaloside IV in different
root regions of Astragalus membranaceus 皮与木质部、韧皮部均存在非常显著差异(P < 0.001)。
S1: Periderm; S2: Screened residue of periderm; S3:Phloem; 值得注意的是,周皮总黄酮含量在所有检测样本中
S4: Screened residue of phloem; S5: Xylem; S6: Screened
residue of xylem; S7: Astragaloside IV standard; Peak 1: 均占据最高值,其过筛与筛余物部分含量分别达韧
Astragaloside IV peak
皮部的 2.1 倍与 2.9 倍,该定量结果与前期黄酮类
余部分,周皮总皂苷含量最高(5.71%),韧皮部次之 成分显微组织化学定位分析高度吻合。
Table 1 Content detection of different parts of Astragalus membranaceus ( x ± s,n = 3)
Sample Astragaloside IV /% Total saponins /% Total flavonoids /%
Periderm(65 mesh) 0.367±0.003 ### 5.80±0.08 ## 0.638±0.014 ###
Phloem(65 mesh) ND *** 6.92±0.26 ** 0.296±0.008 ***
Xylem(65 mesh) ND *** 6.67±0.20 ** 0.463±0.027 **##
Screened residue of periderm 0.850±0.036 ### 5.71±0.25 0.876±0.039 ###
Screened residue of phloem ND *** 5.32±0.13 0.299±0.024 ***
Screened residue of xylem ND *** 4.52±0.29 *# 0.370±0.011 ***#
* ** *** # ## ###
P < 0.05, P < 0.01, P < 0.001 vs Screened residue of periderm; P < 0.05, P < 0.01, P < 0.001 vs Screened residue of phloem;
The value marked as “ND” in this table is below the limit of detection (LOD), which is set at 57.5 μg/mL. “ND” stands for “Not Detected”
4 讨 论 从细胞结构层面分析染色结果,木薄壁细胞、
韧皮薄壁细胞、形成层及栓内层细胞构成黄芪皂苷
本研究通过优化黄芪显微组织化学定位方法,
显色区域,均属于细胞壁未加厚的组织类型,木纤
快速直观地显示不同类型化合物在黄芪根中的分
维、木质部导管、韧皮部纤维以及木栓层细胞构成
布,并通过定量检测进一步验证其分布差异。氢氧
黄芪黄酮显色区域,均属于次生壁加厚细胞类型 。
[13]
化钠染色法是中药材黄酮显微组织化学定位研究
黄酮染色和皂苷染色呈相反的模式。这种分布差
中的常用方法,如朱新焰等 [11] 对紫金龙黄酮、滕红
异可能与细胞功能分化及次生代谢途径密切相关:
梅等 对黄芪黄酮的研究均采用了此方法。然而,
[8]
次生壁加厚细胞(如纤维和导管)作为植物结构支
在显色过程中,中药材自身颜色可能对染色结果造 撑组织,可能通过富集黄酮类抗氧化成分抵御外界
成干扰。鉴于此,本研究引入了水合氯醛透化步 胁迫;而细胞壁未加厚的薄壁组织(如韧皮薄壁细
骤,并采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠染色法替代 胞和形成层)作为物质合成与储存的主要区域,更
氢氧化钠染色法,通过络合反应增强显色特异性, 利于皂苷类成分的积累。二者的差异化分布体现
使组织间的黄酮分布情况更清晰。显色方法优化 了黄芪在长期进化中形成的次生代谢产物空间分
后,未染色部分呈透明状,有效排除了黄芪自身颜 配策略,可能与其生长发育(如细胞壁加厚进程)及
色的干扰,相较于氢氧化钠法染色黄芪黄酮 ,实现 生理功能(如防御反应、物质运输)直接相关。
[12]
了导管、木纤维和韧皮纤维的成功染色,并且更为 当前关于黄芪的组织化学定位研究,主要聚焦
清晰地呈现黄酮于组织间的分布情况。 于探究其各营养器官中化学成分的分布情况,研究

