Page 37 - 《中国药科大学学报》2025年第5期

第 56 卷第 5 期 黄 雍，等：黄芪显微组织化学定位研究与应用 569

染色方法进行优化。 色，木栓层呈较深的棕色（图 4-C），黄酮在各组织之
亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法染色结果如 间的分布清晰可见；未被染色部分呈白色，消除了
图 2-B 所示，木质部和木栓层呈黄褐色，韧皮部呈 黄芪自身颜色对染色结果的影响。因此，水合氯醛
黄色（图 2-B），相较于氢氧化钠直接染色（图 2-A）， 透化结合亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法染色为更优
染色更深，不同部位染色程度对比更加明显。 的黄酮显微组织化学定位法，染色结果显示黄酮主

A B 要分布于木栓层、木质部导管、木纤维及韧皮部纤
1
维中，但在木栓层中含量更为丰富。
3 2 A B

2 1b
1
3 1c
100 μm 100 μm
2 1 3b
3a
Figure 2 Flavonoid staining micrographs of Astragalus 3
membranaceus section 4 100 μm 4b 40 μm
A: NaOH-based method; B: NaNO 2 -Al(NO 3 ) 3 -NaOH method
1: Xylem；2: Vascular cambium; 3: Phloem Figure 3 Chloral hydrate-cleared micrographs of Astragalus

水合氯醛透化结果如图 3 所示，透化后切片呈 membranaceus section
A: Overall micrograph; B: Magnified view
现透明状，各组织间结构清晰可见。黄酮染色结果 1: Xylem； 2: Vascular cambium; 3: Phloem； 4： Periderm； 1b:
Xylem fiber; 1c: Vessel element; 3a: Phloem parenchyma cell; 3b:
如图 4 所示，木纤维、木质部导管、韧皮纤维呈黄 Phloem fiber; 4b: Phellem
A B C

1a
1b 3b
3a
1 1c
2 4a
3
4 100 μm 40 μm 4b 40 μm

Figure 4 Composite micrographs of chloral hydrate-cleared and NaNO 2 -Al(NO 3 ) 3 -NaOH stained Astragalus membranaceus section
A: Overall micrograph; B: Magnified view of xylem; C: Magnified view of phloem and periderm
1: Xylem；2: Vascular cambium; 3: Phloem；4：Periderm；1a: Xylem parenchyma cell; 1b: Xylem fiber; 1c: Vessel element; 3a: Phloem
parenchyma cell; 3b: Phloem fiber; 4a: Phelloderm; 4b: Phellem
3.3 黄芪不同部位含量检测 结果表明，黄芪甲苷Ⅳ在黄芪根中特异性富集于周
显微组织化学定位方法在微观层面表征了黄 皮组织。

芪根部不同部位化学成分的差异，为在宏观层面更
为直观地掌握各个部位总皂苷，总黄酮及黄芪甲苷
的含量，验证显微组织化学定位的实际应用价值，
本研究对黄芪根的各部位进行组织结构分离和含
量检测。
3.3.1 黄芪甲苷含量 结果显示，最低检测限

（LOD，S/N=3）为 57.5 μg/mL。根据图 5 所示分离 Figure 5 Dissection of Astragalus membranaceus root
结果，黄芪样品被分离为周皮、韧皮部及木质部 (from left to right: periderm, phloem, xylem)

3 个部分。通过高效液相色谱法检测（图 6）及定量 3.3.2 总皂苷含量 根据表 1 检测结果，黄芪各部
分析（表 1）发现，黄芪甲苷Ⅳ的分布呈现显著组织 位总皂苷含量呈现显著组织特异性：在过筛部分
特异性：周皮过筛部分（65 目）中黄芪甲苷Ⅳ含量 （65 目）中，韧皮部总皂苷含量最高（6.92%），木质部
为 0.367%，其筛余物中含量进一步升高至 0.850%； 次之（6.67%），周皮最低（5.80%），其中周皮与韧皮
而韧皮部与木质部中该成分均低于检测限。上述 部、木质部均存在非常显著差异（P < 0.01）；而在筛