Page 110 - 《渔业研究》2025年第5期
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渔业研究 2025，47（5） ：651 − 660                                           http://www.hyyysci.com
                Journal of Fisheries Research                                     DOI:10.14012/j.jfr.2025100

                葛 辉，郭 香，巫旗生，等. 大黄鱼源锥体虫荧光定量          PCR  检测方法的建立及应用[J]. 渔业研究，2025，47（5） ：651 − 660.
                Ge H，Guo X，Wu Q S，et al. Establishment and preliminary application of fluorescence quantitative PCR detection method for cone cell parasites
                in Larimichthys crocea[J]. Journal of Fisheries Research，2025，47（5） ：651 − 660.

                        大黄鱼源锥体虫荧光定量                                 PCR      检测方法的

                                                   建立及应用



                               葛    辉 ，郭    香 ，巫旗生 ，宁    岳 ，叶    军 ，
                                       1
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                                吴丽云 ，谢鑫怡 ，张东玲 ，黄    强 ，王为刚                              4
                                                                            3
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                       （1.   福建省水产研究所，福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室，福建 厦门 361013；
                                           2.   集美大学水产学院，福建 厦门 361021；
                                         3.   霞浦县海洋渔业发展中心，福建 宁德 355100；
                                          4.   连江县水产技术推广站，福建 福州 350599）
                  摘要：【背景】2023         年至   2025  年，锥体虫（Trypanosoma spp.）严重威胁着大黄鱼（Lar-
                  imichthys crocea）产业的健康发展，造成巨大的经济损失。目前，对于大黄鱼锥体虫病的防
                  控措施有限，早期诊断对防控至关重要，但现有检测方法存在灵敏度低、操作繁琐等局限。
                  【目的】建立大黄鱼锥体虫快速精准检测技术，探究其组织分布特征，为病害早期诊断和流
                  行病学调查提供技术支持。【方法】基于大黄鱼源锥体虫                             18S rDNA  保守序列设计特异性引
                  物与   TaqMan  探针，构建荧光定量           PCR（qPCR）方法；通过重组质粒梯度稀释建立标准曲
                  线，验证方法的特异性、灵敏度和重复性；采集三都岛、霞浦、连江养殖区大黄鱼样品，检
                  测感染率并分析          9  种组织中锥体虫含量差异。【结果】该方法标准曲线线性关系良好
                  （R =0.997） ，检测下限达        25  拷贝/µL；组间与组内循环阈值变异系数分别<2.0%                     和<1.5%，
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                  重复性稳定；对车轮虫（Trichodina） 、副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus） 、神经坏死
                  病毒（NNV）等常见水产病原无交叉反应，特异性显著。60                             尾样品总体感染率为           93.33%，
                  三都岛感染率（100%）最高；组织分布显示，血液、心脏、脾脏中锥体虫含量极显著高于
                  鳃、肝脏、肾脏等其他组织（P<0.01） ；此外，鲻鱼（Mugil cephalus） 、真鲷（Pagrus major）
                  中仅少量感染且病原含量极低；非鱼类样品中裙带菜（Undaria pinnatifida）检出率（93.33%）
                  最高，网衣、福建牡蛎（Crassostrea angulata）检出少量，其余未检出。【结论】本研究建
                  立的荧光定量        PCR  方法具有高特异性、灵敏性和重复性，可用于大黄鱼锥体虫病的早期诊
                  断；锥体虫在血液、心脏、脾脏中富集的组织趋向性，为解析其致病机制、制定针对性防控
                  策略提供了科学依据，对保障大黄鱼养殖产业健康发展具有重要意义。
                  关键词：大黄鱼；锥体虫；荧光定量 PCR；检测方法；组织分布
                  中图分类号：S917.4      文献标识码：A      文章编号：2096 − 9848 （2025） 05 − 0651 − 10

                  大黄鱼（Larimichthys crocea）是中国东南沿               营养丰富，成为海水养殖产业的重要支柱品种之
              海地区特有的高经济价值养殖鱼类，其肉质细嫩、                           一 [1] 。据统计，2024    年中国大黄鱼养殖产量达

                   收稿日期：2025-09-01    修回日期：2025-09-25
                   基金项目：福建省促进海洋与渔业产业高质量发展专项（FJHYF-L-2025-02-012） ；大黄鱼种业创新与产业化开发（2021FJSC2Y01） ；
                          福建省海洋与渔业综合服务专项（FYZF-KTYJ-2025-10、FYZF-BHZL-2025-2）
                   第一作者：葛 辉，男，副研究员，研究方向为海洋经济动物疾病防控。E-mail: gehuizlj@163.com
              ©《渔业研究》编辑部。本文为使用        CC BY-NC-ND 4.0 许可协议的开放获取作品。
              © Editorial Office of Journal of Fisheries Research. This is an open access article under the CC BY-NC-ND 4.0 license.
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