Page 103 - 《渔业研究》2025年第5期

644 渔 业 研 究 第 47 卷

明胶降解实验表明，复性后的 Col V c 与 S2 菌 降解程度越严重（图 3b） 。注射约 14 μg/mL rCol ，
Vc
液同样具有液化明胶的能力（图 3a） 。本实验成 5 d 后菲律宾蛤仔成体存活率下降至 72%（图 3c） 。
功提取了菲律宾蛤仔的胶原蛋白，其蛋白质浓度 以上结果表明，纯化的 rCol c 具有胶原降解活性且
V
为 517 μL/mL。复性后的 Col V c 可降解菲律宾蛤仔 对菲律宾蛤仔具有致病性。因此，胶原酶是大牡蛎
的胶原蛋白，并且随着处理时间的延长，胶原蛋白 弧菌 S2 的致病因子。

a)
1 421
1 141
61 481
21 161
121 541
41 181
181 601
61 201
241 661
81 221
301 721
101 241
361 781
121 261
b)
AP028068.1 Vibrio sp. FE10 DNA, chromosome 2, complete genome
99 AP025507.1 Vibrio pomeroyi LMG 20537 DNA, chromosome 2, complete sequence
72
CP094660.1 Vibrio lentus strain ED252 chromosome ED252-c2, complete sequence
50
FM954973.2 Vibrio atlanticus strain LGP32 genome assembly
44
S2 collagenase
99 AP025471.1 Vibrio coralliirubri DSM 27495 DNA, chromosome 2, complete sequence
94
AP025493.1 Vibrio gigantis LMG 22741 DNA, chromosome 2, complete sequence
97 CP062501.1 Vibrio bathopelagicus strain Sal10 chromosome Ⅱ, complete sequence
CP151940.1 Vibrio chagasii strain TBV018 chromosome 2, complete sequence
CP166840.1 Agaribacterium sp. ZY112 chromosome, complete genome
0.20

c)

0 100 200

0 100 200 300 400 500 600 700
图 1 大牡蛎弧菌 S2 胶原酶的序列分析
Fig. 1 Sequence analysis of collagenase from V. crassostreae S2
注：a）大牡蛎弧菌 S2 胶原酶基因序列和蛋白质序列。b）大牡蛎弧菌 S2 胶原酶的同源进化树。c）胶原酶结构域分析：
大牡蛎弧菌 S2 胶原酶（上）和溶珊瑚弧菌胶原酶（下） 。
Notes: a) Gene and protein sequences of collagenase from V. crassostreae S2. b) Phylogenetic tree of collagenase from V.
crassostreae S2. c）Domain analysis of collagenase from V. crassostreae S2 (upper) and V. coralliirubr (lower).

2.3 胶原酶调控菲律宾蛤仔的基因表达 的基因有 78 个，下调的基因有 54 个（图 4a） 。在

差异基因火山图显示，rCol V c 注射后的菲律宾 下调表达的基因中，类肌动蛋白样蛋白的表达下调
蛤仔与对照组相比共有 132 个差异基因，其中上调 至 0.2%，细胞黏附分子 DSCAM 类似物的表达下