Page 185 - 《水产学报》2026年第01期

1 期 岳颍淇，等：饲料添加白藜芦醇对大口黑鲈生长、抗氧化及氨氮解毒的影响 50 卷

表 1 实验饲料配方和近似组成 (干物质) g/L NH Cl 母液每隔 8 h 进行浓度调节，采用 YSI
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Tab. 1 Formulation and proximate composition of 多参数水质测定仪监控水中氨氮浓度。每隔 12 h
the experimental diets (dry matter) %
记录 1 次死亡率，并及时清除死亡动物。
饲料中白藜芦醇添加量 急性氨氮暴露结束后，采用 120 mg/L MS-
项目 dietary supplementation
levels of resveratrol 222 进行麻醉。每缸随机挑选 3 尾实验鱼，尾静
item
0.00% 0.50% 1.00% 脉抽血，并获取血清，−20 ℃ 保存，用于免疫应
原料 ingredients 答分析；抽血后的鱼，解剖获取肝脏，一部分肝
秘鲁鱼粉 Peru fish meal 15.00 15.00 15.00 脏保存于 4% 多聚甲醛溶液中，用于组织学观察，
豆粕 soybean meal 25.00 25.00 25.00 一部分肝脏−20 ℃ 保存，用于酶活性分析。
大豆浓缩蛋白
16.00 16.00 16.00 1.5 生化分析
soy protein concentrate
玉米蛋白粉 corn gluten meal 9.00 9.00 9.00 采用 AOAC(2000) 标准方法测定实验饲料和
[21]
菜籽粕 rapeseed meal 3.00 3.00 3.00 全鱼样品的粗成分 。将样品置于 105 ℃ 烘箱中
棉籽粕 cottonseed meal 2.00 2.00 2.00 干燥直至恒重，以确定水分含量；粗蛋白含量的
鱼粉 fish oil 2.50 2.50 2.50 测定采用 FP-528 全自动蛋白质分析仪 (Leco 公司，
大豆油 soybean oil 2.50 2.50 2.50 美国)；粗脂肪含量的测定采用 2055 索氏抽提系
统 (Foss 公司，瑞典)；粗灰分含量的测定是将碳
小麦面粉 wheat flour 21.50 21.50 21.50
化后的样品置于马弗炉中 550 ℃ 烘至恒重。
沸石粉 zeolite powder 1.50 1.00 0.50
采用 7600-110 全自动生化分析仪 (日立，日
维生素预混料 vitamin premix 1) 0.50 0.50 0.50
本) 测定血清中总蛋白 (TP)、白蛋白 (ALB)、球蛋
矿物质预混料 mineral premix 2) 0.50 0.50 0.50
白 (GLB)、总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、葡萄
磷酸二氢钙 monocalcium phosphate 1.00 1.00 1.00
糖 (Glu)、乳酸脱氢酶 (LDH)、谷丙转氨酶 (ALT)
白藜芦醇 resveratrol 3) 0.00 0.50 1.00
和谷草转氨酶 (AST) 含量；采用商业试剂盒测定
近似组成 proximate composition
血清中溶菌酶活性 (LYZ)、总补体 (CH50)、总免
粗蛋白 crude protein 39.07 39.15 39.32
疫球蛋白含量 (Ig) 及抗体滴度 (Ab titer)(伊利康公
粗脂肪 crude lipid 7.25 7.23 7.26
司，中国)。
注：1)维生素预混料(IU或mg/kg)含维生素A 8 000 000 IU，维生素D
肝脏样品在预冷的磷酸缓冲液中匀浆，4 ℃
2000 000 IU，维生素E 5 000 IU，维生素K 1 000 mg，维生素B 1
1 500 mg，维生素B 2 1 500 mg，维生素B 6 800 mg，维生素B 12 20 mg， 12 000 r/min 离心 15 min，收集上清液。采用商
烟酰胺 400 mg，泛酸钙 25 mg，叶酸 25 mg，生物素8 mg，肌醇100 业试剂盒 (南京建成生物工程研究所) 测定总抗氧
mg。2)矿物质预混料(mg/kg)含一水硫酸锰 50，碘化钾 100，氯化钴
化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化
(1%)100，五水硫酸锰 20，一水硫酸亚铁 260，一水硫酸锌 150，亚
氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPX) 活性及
硒酸钠(1%) 50。3)镇海百川生物科技有限公司，宁波。
Notes: 1) vitamin premix(IU or mg/kg), VA 8 000 000 IU, VD 2 000 000 丙二醛 (MDA) 含量；使用 ELISA 试剂盒 (南京建
IU, VE 5 000 IU, VK 1 000 mg, VB 1 1 500 mg, VB 2 1 500 mg, VB 6 800 成生物工程研究所) 测定肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、
mg, VB 12 20 mg, nicotinamide 400 mg, calcium pantothenate 25 mg,
白细胞介素-1 (IL-1)、白细胞介素-8 (IL-8) 含量、
folic acid 25 mg, biotin 8 mg, inositol 100 mg. 2) mineral premix(mg/kg
精氨酸琥珀酸合成酶 (ASS)、精氨酸琥珀酸裂解
diets), MnSO 4 ⋅H 2 O 50, KI 100, CoCl 2 (1%)100, CuSO 4 ⋅5H 2 O 20,
FeSO 4 ⋅H 2 O 260, ZnSO 4 ⋅H 2 O 150, Na 2 SeO 3 (1%) 50. 3) Zhenhai 酶 (ASL)、精氨酸酶 (ARG) 及鸟氨酸氨基甲酰转
Baichuan Biotechnology Co., Ltd., Ningbo, China. 移酶 (OTC) 活性。

1.4 急性氨氮暴露及样品采集 1.6 组织学分析
摄食生长实验结束后，每缸随机挑选 15 尾实 肝脏组织经 4% 多聚甲醛 (PFA，Sigma-Ald-
验鱼，置于半致死浓度 (33.24 mg/L) 氨氮水体中， rich，美国，pH 7.4) 固定 24 h 后，依次进行脱水、
开展 96 h 的急性氨氮暴露实验。本实验采用的半 透明及浸蜡处理：脱水过程包括 70% 乙醇 (4 h)、
致死浓度参考 Egnew 等 ，其测定条件 (水温 25 ℃， 80% 乙醇 (2 h)、90% 乙醇 (1 h)、95% 乙醇 (1 h)
[19]
pH 7.8～0.2) 与本研究一致，且预实验验证了该浓 及 2 次无水乙醇 (每次 30 min)；透明处理采用乙
度在本实验体系下的适用性。实验期间，采用 10 醇-二甲苯混合液 (1∶1，30 min) 和 2 次二甲苯

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