Page 175 - 《水产学报》2026年第01期
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1 期 水 产 学 报 50 卷
释至一定体积，4 ℃ 保存。配置不同浓度的硒标 6 个肌纤维视野 (在 100 倍显微镜下) 计算肌纤维
准溶液，准备工作完成之后，电感耦合等离子体 的直径 (μm) 和密度 (N/mm )，以及结缔组织与肌
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质谱仪 (ICP-MS) 测定硒含量。 纤维面积的比例 (%)。
1.6 肌肉抗氧化相关指标测定 1.8 肌肉组织总 RNA 的提取、基因表达分析
测定了肌肉中 T-SOD 和 CAT 活性、T-AOC、 肌肉组织总 RNA 提取和基因表达分析参照
MDA 含量，采用南京建成生物工程研究所的试剂 [16]
近期的研究 。基因表达采用 qRT-PCR 方法检测，
盒，具体步骤参照试剂盒说明书。
相对表达水平采用 2 −∆∆C t 方法计算。本实验选用
1.7 肌肉组织 H.E 切片 双内参进行标准化，这两个内参组合在不同处理
肌肉组织学的观察通过苏木精-伊红 (H.E) 染 之间表达水平没有显著性差异。qRT-PCR 引物序
色进行，染色方法参照之前的研究 。随机分析 列见表 2。
[16]
表 2 引物序列
Tab. 2 Primers used for quantitative real-time PCR analysis
基因 正向引物 反向引物 登录号
genes forward primer (5′-3′) reverse primer (5′-3′) accession no.
gpx1 ACTACACTCAGATGAACGAGCTC CAAAGTTCCACGAGACGTCATTC MN062284
gpx2 TCCCCTGTAATCAGTTTGGCTAC GCCTTTGAATGTCGGGTTCTATG XM_027172340.1
gpx3 AGAACAACATCTGGGTCTCTGTC GATTTTCCCCAGGTTCCTGTTTC MN062285
selenof GGCTTTTACCGTTGCTTCAGT ACCTCCCCAATTTTCATCCA XM_027150758.1
selenok ACAGTAGGACACAGTCGCCA GCTTGACGAGGGTCTGAAAGA XM_027166810.1
selenom GCTGCGTTTCTTCCATGCTT TCCTCCACAACTCTCCACCT XM_027145607.1
selenon CCGCATCTGGGCTTTATTC GCGACGCCTGTGAGTTTCT XM_027143731.1
selenot CCCTCTGCCTATTTACCGGC CCAAACAGCATGAACGGGTC
XM_027156829.1
selenoh GCGTGAGGCTCTCTTCTCTG TTTACGGGGAGGACCCTTCT XM_027154592.1
selenos TCCGTGGTAATGCGTCAGG TTTGTCCGTCTTGGGCTTC XM_027163809.1
selenow GTACAGGCCCAAGTTCACCA TCCCCGTTCTTCTTCGAGTG MN062288
sps2 GTCCCTGATCCAGACTACAGATTT TGTCACAGAAGTGCCTCCCTC XM_027170772.1
txnrd AGACAAGGCTGGGGTGATTG GACCGCAGCTACCATACTCC MN062291
msrb1 TCTGAATGACGGACCCAAGC ACTCTACTGTCCATCTGCCTCT XM_027141750.1
selenoo GCTTCATGGACCGCTTT CCAGGTTCCAGCGAC XM_0271
selenou CGTGTACACCCTGCGTC CTGCAGAGCAGAGA XM_0271
selenoe GGGAAAACTGATGGCT GCCCAATGCTCCATG XM_0271
selenoi TGGGTTGTCTGTTTGCC AGGCCTCGTACACAG XM_0271
β-actin GGACTCTGGTGATGGTGTGA CTGTAGCCTCTCTCGGTCAG EU161066
rpl7 GGCAAATGTACAGGAGCGAG GCCTTGTTGAGCTTGACGAA KP938522
hprt ATGCTTCTGACCTGGAACGT TTGCGGTTCAGTGCTTTGAT KP938523
tuba TCAAAGCTGGAGTTCTCGGT AATGGCCTCGTTATCCACCA KP938526
b2m GCTGATCTGCCATGTGAGTG TGTCTGACACTGCAGCTGTA KP938520
ubce TCAAGAAGAGCCAGTGGAGG TAGGGGTAGTCGATGGGGAA KP938524
tbp AGCAAAGAGTGAGGAGCAGT ACTGCTGATGGGTGAGAACA KP938525
gapdh TTTCAGCGAGAGAGACCCAG ATGACTCTCTTGGCACCTCC KP938521
18S rRNA AGCTCGTAGTTGGATCTCGG CGGGTATTCAGGCGAGTTTG KP938527
elfa GTCTGGAGATGCTGCCATTG AGCCTTCTTCTCAACGCTCT KU886307
https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
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