Page 189 - 《水产学报》2025年第8期

曹磊，等 水产学报, 2025, 49(8): 089416

20 μm 1 20 μm 2 20 μm 3 20 μm 4 20 μm 5 20 μm 6 20 μm 7

4 μm 1＇ 4 μm 2＇ 4 μm 3＇ 4 μm 4＇ 4 μm 5＇ 4 μm 6＇ 4 μm 7 ＇

图版 Ⅰ 不同感染组中 ROS 水平
1. MOCK 组，2. WT 感染细胞组，3. ΔeseJ 感染细胞组，4. WT 感染 scaramble 敲降细胞，5. WT 感染 PPARγ 敲降细胞，6. WT 感染 DMSO
处理后细胞，7. WT 感染 GW9662 处理后细胞。1'～7'分别对应 1～7 的局部放大。下同。
Plate Ⅰ ROS levels in different infection groups
1. MOCK group, 2. WT-infected cells group, 3.ΔeseJ-infected cells group, 4. WT-infected scramble knockdown cells group, 5. WT-infected PPARγ
knockdown cells group, 6. WT-infected DMSO-treated cells group, 7. WT-infected GW9662-treated cells group. 1'-7'. magnified views corresponding to
panels 1-7, respectively. The same below.

5 *** **** **** 6 **** **** **** 1.0 *** *** ***
细胞质中线粒体 DNA 的相对水平 relative mtDNA levels in cytosol 4 3 2 1 ** 细胞质中线粒体 DNA 的相对水平 relative mtDNA levels in cytosol 4 2 **** mtROS 平均荧光强度 MFI of mtROS 0.8

0.6
0.4
0.2
0
1 2 3 4 5 6 7
不同实验组 0 1 2 3 4 5 6 7 0 1 2 3 4 5 6 7
不同实验组
不同实验组
different experimental groups different experimental groups different experimental groups
(a) (b) (c)
图 5 效应蛋白 EseJ 上调 PPARγ 表达对杀鱼爱德华氏菌感染引起的线粒体损伤和氧化应激的影响
(a) (b) 使用 qRT-PCR 分析 J774A.1 细胞中 mtDNA 释放情况，(a) 以 16S rDNA 为参照，(b) 以 ND4 基因为参照，(c) 通过荧光共聚焦检测
J774A.1 细胞内 ROS 含量。1. 未经处理的 J774A.1 细胞作为对照，2. 感染杀鱼爱德华氏菌的 J774A.1 细胞，3. 感染 ΔeseJ 的 J774A.1 细胞，
4. 感染杀鱼爱德华氏菌的 scramble 敲降细胞，5. 感染杀鱼爱德华氏菌的 PPARγ 敲降细胞，6. 感染杀鱼爱德华氏菌的 DMSO 处理后细胞，
7. 感染杀鱼爱德华氏菌的 GW9662 处理后细胞。
Fig. 5 Effects of increased expression of PPARγ by EseJ on mitochondrial damage and
oxidative stress caused by E. piscicida infection
(a) (b) mtDNA release in J774A.1 cells was analyzed by qRT-PCR, (a) 16S rDNA as the reference, (b) ND4 gene as the reference. (c) Intracellular ROS
levels across J774A.1 cells were quantified by fluorescence confocal microscopy. (1) uninfected J774A.1 control cells, (2) WT-infected J774A.1 cells,
(3) ΔeseJ-infected J774A.1 cells, (4) WT-infected scramble control cells, (5) WT-infected PPARγ knock-down cells, (6) WT-infected DMSO-treated
cells, (7) WT-infected GW9662-treated cells.

3 讨论 未被完全解析。本研究基于在杀鱼爱德华氏菌
感染过程中 PPARγ 蛋白含量增多的现象，筛选
杀鱼爱德华氏菌作为一种重要的水产病原 证明效应蛋白 EseJ 负责促进 PPARγ 蛋白水平
菌，其致病机制主要依赖于三型分泌系统、六 增加。感染过程中，受 EseJ 诱导产生的 PPARγ
型分泌系统及其效应蛋白。EseJ 作为最早被发 抑制炎症细胞因子表达，缓解线粒体损伤，减

现的 T3SS 效应蛋白之一，其分子量较大且缺 少胞内 ROS 产生等炎症反应，促进杀鱼爱德华
乏其他病原菌中同源蛋白作为参照，其功能尚 氏菌在巨噬细胞内增殖 (图 8)。因此，实验对

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