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Chinese Journal of Medical Instrumentation 2025年 第49卷 第6期

综 合 评 述

毒、寄生虫） [20-23] 、自身免疫性疾病（系统性红斑 （
Northern blotting, NB） 、 原 位 杂 交 （ in situ
狼疮、类风湿性关节炎） [24-25] 等，此处不再赘述， hybridization, ISH） 、 微 阵 列 技 术 （ microarray） 、
仅通过表1对近五年（2021—2025年）miRNA作为 实时荧光定量反转录聚合酶链式反应（reverse
生物标志物的部分代表性研究进行梳理。 transcription qPCR, RT-qPCR）和二代测序（next-

generation sequencing, NGS）。以下是对这些技术
表1 miRNA作为多种疾病的潜在生物标志物
Tab.1 miRNA as potential biomarkers in different diseases 的简单总结。
疾病 功能 相关miRNA 样本类型 文献 3.1.1 基于Northern杂交的miRNA检测技术
miR-17、 miR-19、 血清、血浆 Northern杂交作为经典的RNA检测技术，其操
疾病诊断 [26]
miR-21、miR-221 及其外泌体 作流程为：通过RNA提取获得样本后，经琼脂糖
肺癌
血清、 凝胶电泳实现不同相对分子质量分离，再将RNA条带
诊断和预后 miR-21 [8]
血浆等
转移至尼龙膜或硝酸纤维素膜并完成固定，随后与
疾病诊断 miR-92b 血清外泌体 [27]
乳腺癌 特异性标记探针进行杂交反应，最终通过放射自
预后判断 miR-106b-5p 肿瘤组织 [28]
显影或酶促反应显色，实现特定miRNA的检测分
miR-200c-3p、 [41]
预后判断 miR-222-5p、 血浆 [29] 析 。研究表明，在Northern杂交中使用生物素标
肝癌 miR-512-3p 记探针可以经济、高效地检出低丰度小RNA [42-43] 。
诊断和预后 miR-34a 血清外泌体 [30] 相对于其他检测技术，NB的独特优势在于可以同
let-7b-5p、 时提供miRNA的序列和长度信息，但其缺点在于
miR-149-5p、
疾病诊断 尿液 [31] 检测过程烦琐、耗时长、通量低、需要样本量大、
膀胱癌 miR-146a-5p、
miR-423-5p 成本高，在实际临床中的应用有限。
诊断和预后 miR-10a-5p 组织 [32] 3.1.2 基于ISH的miRNA检测技术
冠心病 预后判断 miR-361-5p 血清 [33] 原位杂交指用已知标记的核酸探针或组织切片
心力衰竭 预后判断 miR-19b-3p 血清 [34] 与细胞的待测核酸的互补序列杂交，从而对组织细

miR-128 血清 [35] 胞的核酸进行定位、定性及相对定量。其检测过程
阿尔茨海 疾病诊断 miR-30b-5p、 为：组织中的miRNA经福尔马林固定、石蜡包
默病 miR-22-3p、 血清外泌体 [36]
miR-378a-3p 埋、切片、抗原修复后，与荧光素或其他报告分子
（ 如生物素、地高辛等）标记的特定探针杂交，经
hsa-miR-374a-5p、
hsa-miR-374b-5p、 一系列反应后，得到检测信号。与其他方法相比，
hsa-miR-199a-3p、 血清细胞
帕金森病 疾病诊断 [37] ISH的 主 要 优 势 在 于 它 能 够 定 位 miRNA的 原 始
hsa-miR-28-5p、 外囊泡
hsa-miR-22-5p、 位 置 ， 监 测 其 细 胞 和 亚 细 胞 分 布 ， 从 而 确 定
hsa-miR-151a-5p [41]
miRNA的时空表达谱 ，这对于疾病发生机制识
高胆固 疾病诊断 miR-33b 血清 [19] 别及发展和预后监测具有重要意义。然而，目前针
醇血症
miR-146a、 对miRNA作为生物标志物的研究中，大多需要联
COVID- 预后判断 miR-155、 血清/血浆 [22] 合多种miRNA进行诊断结果确定，因此低通量可
19感染
miR-221
能是限制其临床应用的主要因素之一。
痰液、
肺结核 疾病诊断 miR-29 [38] 3.1.3 基于Microarray的miRNA检测技术
脑脊液等
系统性红 疾病诊断 miR-181a、 血清 微阵列技术也基于目标miRNA分子与互补探
斑狼疮 miR-223 [39] 针的杂交。其基本方法是：将已知序列的DNA探
miR-885-5p、 针固定在尼龙膜或玻璃等固体表面，靶miRNA分
类风湿性 疾病诊断 miR-6894-3p、 血清外泌体 [40]
关节炎 子对应的cDNA经荧光素或生物素等物质标记后，
miR-1268a
与互补的探针杂交，经过一系列反应产生荧光信

3 miRNA检测技术 号，从而得到其表达图谱。基于微阵列的方法是首
[41]
批用于大量miRNA并行分析的技术之一 ，此外
3.1 传统miRNA检测技术 它还有通量高、速度快、成本低等优势；然而，由
传 统 miRNA检 测 技 术 包 括 Northern印 迹 于miRNA序列短、相似性高，且样本中的miRNA

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