Page 41 - 《中国药科大学学报》2026年第2期

第 57 卷第 2 期 张欣艺，等：胰脂肪酶抑制剂筛选方法的研究进展 167

制作用。 制剂前后干燥瘢痕的面积变化，从而实现对抑制效
2.3 表面液滴蒸发传感平台筛选法 果的高效、便捷评估。本法具有检测成本低、分析
本法基于胰脂肪酶催化三酰甘油水解生成油 快速且信号直观易于量化等优点，适用于抑制剂的
酸钠，油酸钠可显著降低液滴表面张力，促使液滴 高通量初筛；然而，该方法易受环境因素干扰，实验
在疏水玻璃基底上发生铺展，干燥后形成较大面积 重复性面临挑战，不适用于高精度的活性定量研
的瘢痕；当体系中加入胰脂肪酶抑制剂后，酶活性 究。Mu 等 [29] 在经 DMOAP 修饰的疏水玻璃基板
受抑制，油酸钠生成量减少，液滴铺展程度降低，导 上，通过量化胰脂肪酶、甘油三酯及不同浓度奥利
[28]
致干燥瘢痕面积相应减小 （见图 5）。该方法通过 司他作用下的干燥瘢痕面积，评估了其抑制活性，
便携式显微镜结合智能手机终端，定量分析加入抑 并计算出奥利司他的 IC 为（0.59±0.09） µmol/L。
0
5

TG
TG
TG
TG TG
三酰甘油组

TG
TG
TG
TG TG
脂肪酶+TG组

TG
TG
脂肪酶+抑制剂+TG组
图 5 表面液滴蒸发传感平台筛选示意图
图注： ：甘油三酯； ：胰脂肪酶与甘油三酯结合； ：胰脂肪酶与潜在抑制剂结合； ：干燥面积

3 虚拟筛选法 批量执行对接计算；最终，结合能≤−4.0 kcal/mol 的
候选化合物作为潜在胰脂肪酶抑制剂，以供后续实
虚拟筛选法是一种基于胰脂肪酶三维结构或
[31]
验验证 ，具体流程示意图见图 6。该方法结合模
其配体的定量构效关系模型，借助计算软件模拟分
式直观可视、预测精度高，但对蛋白结构依赖性强，
子间相互作用，从而从大量化合物库中快速甄别
难以考虑柔性变化，适用于结构明确的靶点体系。
潜在活性分子的方法。根据靶标蛋白结构是否已
郑啸丹等 [32] 通过基于受体结构的虚拟筛选，成
知，该方法可分为基于受体的筛选和基于配体的
筛选 。 功从 3 286 种天然化合物中发现多个潜在胰脂肪酶
[30]
3.1 基于受体的虚拟筛选 抑制剂。该研究采用 Autodock Vina 与 Sybyl-X 软
基于受体的虚拟筛选主要通过分子对接技术 件 Surflex-Dock 两级对接策略，并结合类药性筛选
实现。其典型流程如下：首先，从蛋白质结构数据 与结构聚类分析，最终遴选出 31 种候选化合物。
库中获取包含催化三联体（Ser152-His263-Asp176） 体外实验证实多数化合物具有显著抑制活性，如辅
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的胰脂肪酶三维结构，并对该结构进行预处理，包 酶 Q9 的 IC 为（0.53±0.36） μg/mL。
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括去除水分子、添加氢原子、优化质子化状态及能 3.2 基于配体的虚拟筛选
量最小化；其次，对小分子数据库中的化合物进行 基于配体的虚拟筛选主要方法包括药效团模
结构优化，包括电荷分配、三维构象生成及能量最 型、分子相似性搜索以及定量构效关系（quantitative
[33]
小化；随后，采用半柔性对接方法设置相关参数，并 structure activity relationship，QSAR）模型 。