Page 38 - 《中国药科大学学报》2026年第2期

164 学报 Journal of China Pharmaceutical University 2026, 57(2): 163 − 171 第 57 卷

Key words pancreatic lipase; inhibitor; p-nitrophenyl-based assay; fluorescence assay; immobilized enzyme
method; affinity ultrafiltration with mass spectrometry; virtual screening

This study was supported by the National Natural Science Foundation of China(No.82160457);Gansu Provincial Science and
Technology Program (Special Project for Technology Commissioner)(No.25CXGA022);Gansu Provincial Department of Education
University Faculty Innovation Fund Project(No.2023A-077);and Lanzhou Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of
Sciences Open Fund(HWS202306)

近年来，全球肥胖与超重问题持续加剧，已成 法、现代新型筛选法与虚拟筛选法，详细讨论各类
为不容忽视的公共卫生挑战。据世界卫生组织统 方法的筛选原理、优缺点及应用现状，并对胰脂肪
计，全球已有超过 19 亿成年人超重，其中 6.5 亿人 酶抑制剂筛选方法中存在的瓶颈问题提出解决思
患有肥胖症。《中国居民营养与慢性病状况报告 路，以期为中药及天然产物来源的胰脂肪酶抑制剂
（2020 年）》显示，中国成年居民的超重或肥胖率已 研究提供方法学参考。
突破 50%；由此引发的高血脂、动脉粥样硬化及
1 传统筛选法
2 型糖尿病等并发症对社会构成了沉重负担 。胰
[1]
脂肪酶作为小肠中催化膳食脂肪水解的关键酶，因 1.1 对硝基苯酚法
其在脂肪吸收中的核心作用，成为抗肥胖药物研发 本法以对硝基苯酚棕榈酸酯为底物，其在胰脂
[2]
的重要靶点 。然而，目前唯一广泛应用于临床的 肪酶作用下水解生成对硝基苯酚；该产物在 405 nm
胰脂肪酶抑制剂奥利司他，存在油便、腹泻及肝毒 波长下具有特征吸收。通过测定加入抑制剂后体
性等副作用 ；因此，寻找新型、高效、副作用小的 系吸光度的下降值，进而可定量评估胰脂肪酶的抑
[3]
胰脂肪酶抑制剂显得尤为迫切。 制效果 ，示意图见图 1。本法操作简便、成本低
[7]
多种中药（如：荷叶、大黄、山楂等）均具有“去 廉，常用于天然产物的初步筛选或已知化合物的活
油腻”“降脂”功效 [4−6] ，是发现结构新颖的胰脂肪酶 性验证。然而，该方法也存在一定局限性，如假阳
抑制剂先导化合物的重要资源。为加速先导化合 性风险较高，且所采用人工合成底物与人体内天然
物发现，本文系统综述胰脂肪酶抑制剂的传统筛选 甘油三酯差异较大，可能影响筛选结果的准确性。

无抑制剂反应 2.00
2.75
1.50
空白对照组
1.25
1.00
0.75
0.50
0.25
0
300 350 400 450 500
405 nm
抑制剂反应
抑制剂处理组
图 1 对硝基苯酚法示意图
注： ：胰脂肪酶； 底物：对硝基苯酚棕榈酸酯（p-nitrophenol palmitate，p-NPP）； ：产物：对硝基苯酚（p-nitrophenol，p-NP）； ：胰脂肪
酶-抑制剂复合物； ：未结合小分子

Jin 等 研究发现，穿山甲 95% 乙醇洗脱部位 述化合物均表现出较强的胰脂肪酶抑制活性。
[8]
[9]
对胰脂肪酶的抑制率高达（68.34±1.47）%；UPLC-Q- Birari 等 对光果甘草根中 12 种化学成分（包括查
TOF-MS/MS 分析鉴定出原薯蓣皂苷、原纤细皂 尔酮类、黄酮类、二氢黄酮苷元及黄酮苷等）进行筛
苷、薯蓣皂苷和纤细皂苷为活性化合物，并证实上 选，结果表明异甘草素的抑制效果最为显著。