Page 40 - 《中国药科大学学报》2026年第2期

166 学报 Journal of China Pharmaceutical University 2026, 57(2): 163 − 171 第 57 卷

题。Zhu 等 [20] 采用 3-氨丙基三甲氧基硅烷对磁性 一项研究中，基于戊二醛交联法，Chen 等 [21] 将胰脂
纳米颗粒进行氨基化修饰，氨基化磁性纳米颗粒与 肪酶共价固定于金属有机框架材料 UiO-66-NH 2
胰脂肪酶表面羧基发生共价结合，成功制备出复合 上，并以此对夏枯草提取物进行筛选，共鉴定出
材料；并将该材料应用于乌龙茶提取液中胰脂肪酶 13 种潜在活性成分。进一步活性验证表明，其中咖
抑制剂的筛选，结果显示（−）-表没食子儿茶素-3-O- 啡酸、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷、迷迭香酸
没食子酸酯对胰脂肪酶抑制效果最为显著。在另 和熊果酸对胰脂肪酶均表现出较强的抑制能力。

O O
O O O O
O H H O H + 化学共价 O C
Fe 3 O 4 Si NH 2 Fe 3 O 4 Si N H 2 N Fe 3 O 4 Si N N
O O O
样品

HPLC-Q- 3 4 5
TOF-MS 2
Intensity a b 1 1 2 3 4 5 6 7 8
6 7 8
c 7
固定化 孵育 磁分离 清洗 洗脱液
0 5 10 15 20
t/min
图 3 固定化胰脂肪酶法示意图
注： ：胰脂肪酶； ：磁性纳米颗粒； ：胰脂肪酶@磁性纳米粒子颗粒； ：潜在胰脂肪酶抑制剂； ：提取物中小分子化合物； ：胰脂肪酶
@磁性纳米粒子颗粒-抑制剂复合物

包埋法是将胰脂肪酶分子包裹在特定空间结 物”的物理分离，最后用质谱对活性分子进行精准
构的惰性载体材料内部，从而阻止酶分子自由扩散 鉴定 ；具体示意图见图 3。本法兼具高通量、酶无
[24]
到周围介质中，同时允许小分子化合物自由通过载 需固定化、高灵敏度及高选择性等特点，能快速从
体网格进行扩散和传质。本法优点在于操作条件 复杂体系中锁定活性化合物结构。但是，该方法难
温和、对酶活性中心影响小，且适用范围广，从而获 以完全避免非特异性吸附与弱结合物解离造成的
得稳定性良好的固定化酶。然而，该方法也存在化 假阳性或假阴性结果，且其本质为定性筛选，无法
合物在载体网格内扩散，易产生传质阻力，可能导 直接提供活性强度的定量信息 。
[25]
致反应速率降低的不足 。Fan 等 [23] 采用海藻酸 Huang 等 [26] 采 用 亲 和 超 滤 结 合 UPLC-Q-
[22]
钠、β-环糊精和羧甲基纤维素钠的三元复合材料包 Exactive Orbitrap/MS 技术，从杜仲茶中筛选出京尼
埋胰脂肪酶，并成功从芪类化合物中筛选出赤松 平苷酸、槲皮素-3-O-桑布苷、异绿原酸 A 及槲皮素
素、紫檀芪、白藜芦醇、丹叶大黄素、白皮杉醇和虎 等成分，并证实它们与胰脂肪酶具有较强的结合能
杖苷对胰脂肪酶均有抑制效果。 力。Quan 等 [27] 通过 AUF-HPLC-HRIP 方法筛选出
2.2 亲和超滤质谱法 原花青素 B5 3,3'-二-O-没食子酸酯和 1,6-二-O-没
本法是利用胰脂肪酶与抑制剂小分子形成特 食子酰基-2-O-肉桂酰基-β-D-葡萄糖苷等化合物，
异性结合物，通过超滤膜实现“结合物”与“非结合 研究结果证实这些成分对胰脂肪酶具有显著的抑

亲和超滤 HPLC-Q-TOF-MS

提取

孵育 结合 超滤 解离 洗脱液

图 4 亲和超滤质谱法示意图
图注： ：胰脂肪酶； ：潜在胰脂肪酶抑制剂