Page 111 - 《中国药科大学学报》2026年第2期

第 57 卷第 2 期 范潇敏，等：艾考糊精腹膜透析液中的 α-双羰基类降解产物邻苯二胺衍生化 HPLC-MS/MS 测定研究 237

浓度均为 50 ng/mL 的加标供试品溶液。 复性）、准确度、稳定性。
2.5.2 方法学验证 参照 ICH Q2（R2）指南对所建 专属性 空白溶液在目标物保留时间处无干
立的 OPD 衍生化 HPLC-MS/MS 定量分析方法进 扰峰。各目标衍生物色谱峰与相邻峰之间的分离
行方法学验证，内容包括专属性、线性和范围、检测 度良好，且对照品溶液与加标供试品溶液中目标物
限（LOD）和定量限（LOQ）、精密度（进样精密度、重 的保留时间一致（图 5），表明方法专属性良好。

A 8 000 B 8 000

7 000 7 000 5
6 000
6 000
Intensity/cps 5 000 Intensity/cps 5 000 2 3
4 000
4 000
3 000
3 000
2 000
1 000
1 000 2 000 1
0 0
0 5 10 15 20 25 30 35 0 5 10 15 20 25 30 35
t/min t/min
C 8 000 D 9 000
7 000 5 8 000 5
7 000
6 000
Intensity/cps 5 000 2 3 4 Intensity/cps 6 000 2 3 4
5 000
4 000
4 000
3 000
3 000
2 000
1 000 2 000 1
1 000
0 0
0 5 10 15 20 25 30 35 0 5 10 15 20 25 30 35
t/min t/min
Glucosone(1); 3-DG(2), 3-DGal(3), 4-DG(4); 3,4-DGE (5)
Figure 5 Typical HPLC-MS/MS chromatograms of blank solution (A), standard solution (B), sample solution (C), and spiked sample
solution (D)
1: Glucosone; 2: 3-DG; 3: 3-DGal; 4: 4-DG; 5: 3,4-DGE

线性与范围、LOD 与 LOQ 取“2.5.1”项下 线性回归。结果如表 3 所示，各目标物在相应浓度
对照品储备液逐级稀释，按照“2.3”项下衍生化条件 范 围 内 线 性 关 系 良 好 ， 相 关 系 数 （ r） 均 不 小 于
制备系列杂质浓度的线性溶液，各杂质浓度范围见 0.999 0。葡萄糖醛酮、3-DG、3-DGal、3,4-DGE 的
表 3，分别进样测试。以线性溶液中各杂质峰面积 y 截距绝对值与对照品溶液峰面积百分比分别为
为纵坐标，杂质浓度为横坐标，用最小二乘法进行 5.3%、1.9%、3.5% 和 7.9%。

Table 3 Linear range, LOD and LOQ
Name Linear regression r Linear range/(ng/mL) LOD/(ng/mL) LOQ/(ng/mL)
Glucosone y = 175.38x −438.75 0.999 8 4.97−149.12 2.5 5.0
3-DG y = 435.33x −393.51 0.999 9 4.88−146.25 2.4 4.9
3-DGal y = 252.74x−413.33 0.999 9 4.75−142.50 2.4 4.8
3,4-DGE y = 461.41x −1 704.10 0.999 8 1.00−150.00 0.5 1.0

取葡萄糖醛酮、3-DG、3-DGal 对照品适量，按 加标供试品溶液（平行制备 6 份）。对照品溶液连
照“2.3”项下衍生化条件制备质量浓度约为 5.0 ng/mL 续进样 6 针，加标供试品溶液分别进样 1 针，记录
的定量限（LOQ）溶液及 2.4 ng/mL 的检测限（LOD） 色谱图，以外标法计算各杂质含量。葡萄糖醛酮、
溶液。取 3,4-DGE 对照品适量，按照“2.3”项下 3-DG、3-DGal、3,4-DGE 峰面积的相对标准偏差分
衍生化条件制备质量浓度约为 1.0 ng/mL 的定量限 别为 3.2%、1.7%、2.7% 和 2.2%，表明方法进样精
（ LOQ） 溶 液 及 0.5 ng/mL 的 检 测 限 （ LOD） 溶 液 密度良好。6 份加标供试品溶液中，葡萄糖醛酮、3-
（表 3），分别进样测试。定量限溶液各峰信噪比 DG、3-DGal、3,4-DGE 含量的相对标准偏差分别为
（s/n）均大于 10，检测限溶液各峰 s/n 均大于 3。 4.1%、0.9%、2.2% 和 1.7%，表明方法重复性良好。
精密度 按照“2.5.1”项下制备对照品溶液、 准确度 按照“2.5.1”项下制备对照品溶液、