Page 109 - 《中国药科大学学报》2026年第2期

第 57 卷第 2 期 范潇敏，等：艾考糊精腹膜透析液中的 α-双羰基类降解产物邻苯二胺衍生化 HPLC-MS/MS 测定研究 235

公司)。 流比均与上述定性质谱检测条件一致。MRM 检测
各成分的离子对及参数见表 1。
2 方法与结果
Table 1 Mass spectrometry conditions
2.1 色谱条件
Name Parent ion m/z Fragment ions m/z CE/eV DP/V
Shim Pack Velox Biphenyl（ 4.6 mm×150 mm, Glucosone 251.0 173.0 23 60
2.7 μm）色谱柱；流动相 A 为 5 mmol/L 甲酸铵水溶 3-DG, 3-DGal, 235.0 199.0 24 60
4-DG
液（甲酸调节 pH 为 2.85），流动相 B 为甲醇；柱温
3,4-DGE 217.0 169.0 20 60
50℃；流速为 1.0 mL/min，线性梯度洗脱（A:B）程序：
0 min (80∶20) →10 min (75∶25) → 25 min (60∶40)→ 2.3 衍生化条件的优化
27 min (20∶80)→ 31 min (20∶80)→ 31.01 min 采用葡萄糖醛酮、3-DG、3-DGal、3,4-DGE 对
(80∶20)→ 35 min (80∶20)；进样体积 10 μL。 照品溶液作为优化对象，通过单因素实验考察
2.2 检测条件 OPD 浓度、反应体系 pH 及反应时间对衍生化效率
2.2.1 定性条件 的影响，以各衍生物色谱峰面积为评价指标，确定
紫外检测条件：扫描波长为 190 ~400 nm。 最佳衍生化反应条件。
质谱检测条件：电喷雾正离子化全扫描检测， 2.3.1 OPD 浓度优化 取各杂质对照品和 OPD 适
质谱扫描 m/z 范围为 100~280 D。氮气气帘气 10 量，采用甲醇-水（2∶8）配制各杂质质量浓度均为
psi(1 psi=6.895 kPa)，雾化气 30 psi，辅助气 20 psi， 500 ng/mL， OPD 质 量 浓 度 分 别 为 0.1、 0.5、 1.0、
离子喷雾电压 4 000 V，离子源温度 300 ℃，碰撞室 2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mg/mL 的测试溶液，各浓度
入口电压 10 V、出口电压 7 V，碰撞气 8 psi。切阀 水平平行配制 3 份，分别进样测试。结果表明，OPD
方式：0.0~5.0 min 进废液，5.0~35.0 min 进质谱。离 浓度显著影响衍生化效率，葡萄糖醛酮、3-DG、3-
子源前设置分流，进入质谱的比例为总流量的 DGal、3,4-DGE 在 OPD 质量浓度为 1.0~6.0 mg/mL
1/3（分流比 1∶2）。 时峰面积达到最大且变化率均不超过 10%（图 3-
2.2.2 定量条件 质谱离子化参数、切阀方式、分 A）。因此 OPD 质量浓度优化为 1.0 mg/mL。

A B C

350 100 250
300 80 200
Peak area/×10 3 200 Peak area/×10 3 60 Peak area/×10 3 150
250
150
100
40
100
50 20 50
0 0 0
0 1 2 3 4 5 6 2 3 4 5 6 7 8 0 2 4 6 8 10
c(OPD)/(mg/mL) pH t/h
3,4-DGE; 3-DG; 3-DGal; Glucosone
Figure 3 Derivatization condition optimization of OPD concentration (A), pH (B) and reaction time(C)

2.3.2 反应体系 pH 优化 取各杂质对照品和 应介质。
OPD 适量，采用甲醇-水（2∶8）配制各杂质质量浓度 2.3.3 反应时间优化 取各杂质对照品和 OPD 适
均为 500 ng/mL，OPD 质量浓度为 1.0 mg/mL 的测 量，采用甲醇-水（2∶8, pH ≈ 5.2）配制各杂质质量浓
试溶液，用甲酸或氨水调节反应体系 pH 分别为 2、 度均为 500 ng/mL，OPD 质量浓度为 1.0 mg/mL 的
3、4、5、6、7、8，各 pH 水平平行配制 3 份，分别进 测试溶液，在反应 0~10 h 内进样检测。结果表明，
样测试。结果表明，葡萄糖醛酮、3-DG、3-DGal、 葡 萄 糖 醛 酮 、 3-DG、 3-DGal、 3,4-DGE 峰 面 积 在
3,4-DGE 在 pH 5~8 时峰面积变化率均不超过 15% 2~10 h 内变化率均不超过 5%（图 3-C），因此该衍生
（图 3-B）。因此采用甲醇-水（2∶8, pH ≈ 5.2）作为反 化反应在室温条件下 2 h 即可完成。