Page 86 - 《中国药科大学学报》2026年第1期
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               有限公司);NO      试剂盒(上海碧云天生物技术有限                    PCR  引物(生工生物工程上海股份有限公司),引物
               公司);甲醇、乙腈(色谱级,德国                 Merck 公司);      序列见表     1。


               Table 1    Primer sequences for qRT-PCR
                       Gene                  Forward primer (5'→3')               Reverse primer (5'→3')
                     Il-6               CACGGCCTTCCCTACTTCAC                  TGCAAGTGCATCATCGTTGT
                     Il-1β              TGGACCTTCCAGGATGAGGACA                GTTCATCTCGGAGCCTGTAGTG
                     Tnf-α              GGTGCCTATGTCTCAGCCTCTT                GCCATAGAACTGATGAGAGGGAG
                     Inos               GAGACAGGGAAGTCTGAAGCAC                CCAGCAGTAGTTGCTCCTCTTC
                     Cyp7a1             CACCATTCCTGCAACCTTCTGG                ATGGCATTCCCTCCAGAGCTGA
                     Cyp7b1             CGGAAATCTTCGATGCTCCAAAG               GCTTGTTCCGAGTCCAAAAGGC
                     Cyp27a1            TCAGGAGACCATCGGCACCTTT                CCAGTCACTTCCTTGTGCAAGG
                     Cyp8b1             CATGAAGGCTGTGCGTGAGGAA                CATCACGCTGTCCAACACTGGA
                     Fxr                GGGATGAGTGTGAAGCCAGCTA                GTGGCTGAACTTGAGGAAACGG
                     Shp                CCAAGGAGTATGCGTACCTGAAG               GCTCCAAGACTTCACACAGTGC
                     Bsep               CCTTGGTAGAGAAGAGGCGACA                ATGGCTACCCTTTGCTTCTGCC
                     Srebp-1            CGACTACATCCGCTTCTTGCAG                CCTCCATAGACACATCTGTGCC
                     β-actin            CATTGCTGACAGGATGCAGAAGG               TGCTGGAAGGTGGACAGTGAGG

                                                                                                     [5]
                1.2    仪 器                                      (CAPEC-H)组,每组      5 只。参考文献方法 ,采用病
                    BP211D 型精密天平(德国           Sartorius 公司);    证结合法复制       UC  湿热证小鼠模型,即采用高糖高脂
               Milli-Q  纯水仪(德国     Merck 公司);梯度      PCR  仪、    加白酒喂养,联用         2.5%DSS  诱导法分两阶段造模。
               QuantStudio 3 实时荧光定量      PCR  仪(美国    Thermo    (1)第一阶段:湿热证小鼠造模方法。除对照组小
               Fisher Scientific 公司);NanoZoomer S60 数字切片        鼠给予对照饲料喂养和自由饮水外,其余小鼠给予
               扫描仪(日本滨松光子学株式会社);BX53 正置显                        高脂饲料,自由饮用         200 g/L  蜂蜜水,同时灌胃给予
               微镜(日本     Olympus 公司);1290 Infinity Ⅱ超高效         10 g/kg 油脂,隔天灌胃给予        10 mL/kg 白酒(乙醇体
               液相色谱仪、6470A       三重四极杆质谱(美国           Agilent   积分数    30%),二者交替进行共          10 d。造模小鼠出
                                            8
               公 司 ) ; Acquity  UPLC  BEH  C 柱 ( 2.1  mm×100    现倦怠乏力、活动减少,精神不振,嗜卧欲睡,毛色
                                           1
               mm,1.7 μm,美国    Waters 公司)。                      略失去光泽,爪尾变软、无力,粪便湿软、尿液变多
                1.3    动 物                                      变黄等症状,表明湿热证模型造模成功。(2)第二
                    健康的雄性      C57BL/6J 小鼠,鼠龄    6~7 周龄,体       阶段:UC    小鼠造模方法。湿热证造模成功后,除对
               质量   20~22 g,购自江苏华创信诺医药科技有限公                     照组小鼠自由饮用蒸馏水外,其余各组均自由饮用
               司。动物生产合格证号:SYXK(苏)2023-0019。小                    蒸馏水配制的        2.5%DSS,连续    7 d。各给药组小鼠
               鼠饲养于     (22±2) ℃,湿度   40%~60%,12 h 明暗交替         于  UC  造模的同时给予相应的药物灌胃,每天                 1 次,
               的  SPF  级实验动物房中,适应性饲养             7 d 后开始实       连续   7 d。根据体表面积法换算,CAPEC-L             组每天
               验,实验期间自由摄食和饮水。本研究方案经中国                           灌胃   470 mg/kg,相当于临床等效剂量;CAPEC-H
               药科大学实验动物伦理委员会批准,伦理批准号:                           组每天灌胃      1 410 mg/kg,相当于   3 倍临床等效剂量;
               YSL-202503052。                                   5-ASA  组每天灌胃      200 mg/kg;空白组和模型组灌
                                                                胃相同体积的生理盐水。造模相关流程见图                     1。
                2    方 法
                                                                 2.2    一般行为学观察、小鼠湿热评分及疾病活动
                2.1    分组、造模及给药                                 指数
                    将 小 鼠 随 机 分 为    5 组 : 对 照 组 ( Control) 、        定期称量并记录小鼠体质量、摄食量和饮水
               模型组(Model)、阳性药          5-氨基水杨酸(5-ASA)           量,观察小鼠毛发、精神状态、粪便性状及隐血情
               组、CAPEC    低剂量(CAPEC-L)组、CAPEC         高剂量       况、尿液颜色等。
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