Page 86 - 《中国药科大学学报》2026年第1期
P. 86
80 学报 Journal of China Pharmaceutical University 2026, 57(1): 78 − 89 第 57 卷
有限公司);NO 试剂盒(上海碧云天生物技术有限 PCR 引物(生工生物工程上海股份有限公司),引物
公司);甲醇、乙腈(色谱级,德国 Merck 公司); 序列见表 1。
Table 1 Primer sequences for qRT-PCR
Gene Forward primer (5'→3') Reverse primer (5'→3')
Il-6 CACGGCCTTCCCTACTTCAC TGCAAGTGCATCATCGTTGT
Il-1β TGGACCTTCCAGGATGAGGACA GTTCATCTCGGAGCCTGTAGTG
Tnf-α GGTGCCTATGTCTCAGCCTCTT GCCATAGAACTGATGAGAGGGAG
Inos GAGACAGGGAAGTCTGAAGCAC CCAGCAGTAGTTGCTCCTCTTC
Cyp7a1 CACCATTCCTGCAACCTTCTGG ATGGCATTCCCTCCAGAGCTGA
Cyp7b1 CGGAAATCTTCGATGCTCCAAAG GCTTGTTCCGAGTCCAAAAGGC
Cyp27a1 TCAGGAGACCATCGGCACCTTT CCAGTCACTTCCTTGTGCAAGG
Cyp8b1 CATGAAGGCTGTGCGTGAGGAA CATCACGCTGTCCAACACTGGA
Fxr GGGATGAGTGTGAAGCCAGCTA GTGGCTGAACTTGAGGAAACGG
Shp CCAAGGAGTATGCGTACCTGAAG GCTCCAAGACTTCACACAGTGC
Bsep CCTTGGTAGAGAAGAGGCGACA ATGGCTACCCTTTGCTTCTGCC
Srebp-1 CGACTACATCCGCTTCTTGCAG CCTCCATAGACACATCTGTGCC
β-actin CATTGCTGACAGGATGCAGAAGG TGCTGGAAGGTGGACAGTGAGG
[5]
1.2 仪 器 (CAPEC-H)组,每组 5 只。参考文献方法 ,采用病
BP211D 型精密天平(德国 Sartorius 公司); 证结合法复制 UC 湿热证小鼠模型,即采用高糖高脂
Milli-Q 纯水仪(德国 Merck 公司);梯度 PCR 仪、 加白酒喂养,联用 2.5%DSS 诱导法分两阶段造模。
QuantStudio 3 实时荧光定量 PCR 仪(美国 Thermo (1)第一阶段:湿热证小鼠造模方法。除对照组小
Fisher Scientific 公司);NanoZoomer S60 数字切片 鼠给予对照饲料喂养和自由饮水外,其余小鼠给予
扫描仪(日本滨松光子学株式会社);BX53 正置显 高脂饲料,自由饮用 200 g/L 蜂蜜水,同时灌胃给予
微镜(日本 Olympus 公司);1290 Infinity Ⅱ超高效 10 g/kg 油脂,隔天灌胃给予 10 mL/kg 白酒(乙醇体
液相色谱仪、6470A 三重四极杆质谱(美国 Agilent 积分数 30%),二者交替进行共 10 d。造模小鼠出
8
公 司 ) ; Acquity UPLC BEH C 柱 ( 2.1 mm×100 现倦怠乏力、活动减少,精神不振,嗜卧欲睡,毛色
1
mm,1.7 μm,美国 Waters 公司)。 略失去光泽,爪尾变软、无力,粪便湿软、尿液变多
1.3 动 物 变黄等症状,表明湿热证模型造模成功。(2)第二
健康的雄性 C57BL/6J 小鼠,鼠龄 6~7 周龄,体 阶段:UC 小鼠造模方法。湿热证造模成功后,除对
质量 20~22 g,购自江苏华创信诺医药科技有限公 照组小鼠自由饮用蒸馏水外,其余各组均自由饮用
司。动物生产合格证号:SYXK(苏)2023-0019。小 蒸馏水配制的 2.5%DSS,连续 7 d。各给药组小鼠
鼠饲养于 (22±2) ℃,湿度 40%~60%,12 h 明暗交替 于 UC 造模的同时给予相应的药物灌胃,每天 1 次,
的 SPF 级实验动物房中,适应性饲养 7 d 后开始实 连续 7 d。根据体表面积法换算,CAPEC-L 组每天
验,实验期间自由摄食和饮水。本研究方案经中国 灌胃 470 mg/kg,相当于临床等效剂量;CAPEC-H
药科大学实验动物伦理委员会批准,伦理批准号: 组每天灌胃 1 410 mg/kg,相当于 3 倍临床等效剂量;
YSL-202503052。 5-ASA 组每天灌胃 200 mg/kg;空白组和模型组灌
胃相同体积的生理盐水。造模相关流程见图 1。
2 方 法
2.2 一般行为学观察、小鼠湿热评分及疾病活动
2.1 分组、造模及给药 指数
将 小 鼠 随 机 分 为 5 组 : 对 照 组 ( Control) 、 定期称量并记录小鼠体质量、摄食量和饮水
模型组(Model)、阳性药 5-氨基水杨酸(5-ASA) 量,观察小鼠毛发、精神状态、粪便性状及隐血情
组、CAPEC 低剂量(CAPEC-L)组、CAPEC 高剂量 况、尿液颜色等。

