Page 64 - 《中国药科大学学报》2026年第1期
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               测物/内标）峰面积比值，得到每一待测物和内标的                          理。对于超出标曲定量范围的血浆样品，分别将其
               基质因子。计算待测物的基质效应因子与内标的                            用空白血浆基质稀释           2~5 倍后进行浓度测定。血
               基质效应因子的比值，得到内标归一化的基质效应                           浆药物浓度-时间曲线见图            2，计算得到的关键药代
               因子，其    RSD  应≤15%。结果显示，低、中、高             3 个    动力学参数见表        1。

               浓度水平的泰妙菌素基质因子分别为（95.6±3.3）%                            10 000
               （n=6）、（94.9±5.6）%（n=6）、（100.2±5.3）%（n=6）；内
               标美洛昔康的基质因子为（102.35±1.9）%（n=18）。                        1 000
               内标归一化基质效应因子分别为                 95.7%、92.4%  和
               96.5%，RSD  分别为     7.14%、7.62%  和  4.55%，符合          c/(ng/mL)  100
               接受标准。
                                                                        10
                3.1.7 稀释效应 设置稀释效应因子为                5，将浓度
               超过定量上限的稀释质控样品                DQC（40 μg/mL）与
                                                                         1
               空白血浆体积比        1∶19 混合，平行配制       6 份，再分别                  0       6      12      18      24
                                                                                         t/h
               用空白血浆稀释。按“2.3”项方法处理，分离上清液                                       Tiamulin fumarate active pharmaceutical
               于  LC-MS/MS  系统中进样分析。要求           DQC  的  RSD                   ingredient (iv)
                                                                               Tiamulin formulation 1 (ig)
               ≤15%， 且 至 少 有     2/3 检 测 浓 度 与 其 理 论 值                         Tiamulin formulation 2 (ig)
                                                                               Tiamulin formulation 3 (ig)
               的  RE  在±15%  内。结果显示，RSD        为  5.38%（n=6），
               RE  为–10.38%，本研究中的稀释操作引起的稀释效                     Figure 2    Plasma  drug  concentration-time  profiles  of  different
                                                                tiamulin  formulations  following  intravenous  (iv,  10  mg/kg)  and
               应达到生物样品分析的接受标准。                                  intragastric (ig, 20 mg/kg) administration ( x ± s, n=6)

                3.1.8 稳定性考察 取质量浓度为               100 ng/mL  和
                                                                 4    讨 论
               15 000 ng/mL  泰妙菌素工作液在室温放置           10 h 后按
               “2.3”项下方法处理，得到药物浓度为                 5 ng/mL  和        本研究建立了快速灵敏的             LC-MS/MS  检测方
               750 ng/mL  的质控样品，与新鲜配制的质控样品的峰                    法，通过优化梯度洗脱程序与质谱参数，将液相分
               面积比进行对比，考察室温放置稳定性。结果显示，                          离时间缩短至       5 min 以内，定量下限低至          2 ng/mL，
               待测物峰面积比值的稳定性为               92.09%  和  103.90%，  较现有研究检测灵敏度提升              5 倍，这一优势使其能
               RSD≤15%（n=6），说明低、高浓度质控工作液在室温                     够精准捕获生物样品中低浓度水平的泰妙菌素，尤
               下放置    10 h 是稳定的。分别取质量浓度            100 ng/mL    其适用于药物代谢后期血浆中药物浓度的准确定
               和  15 000 ng/mL  泰妙菌素工作溶液与空白血浆体积                 量。有研究表明        [13−14] ，与甲醇相比，乙腈对泰妙菌素
               比  1∶19 混合，配制成质量浓度为             5 ng/mL  和  750  具有更高的提取效率，回收率分别为                     69.0%  和
               ng/mL  的含药血浆，于不同条件下保存考察泰妙菌                       24.5%，并且乙腈蛋白沉淀法具有操作简便、耗时短
               素在血浆中的稳定性。结果显示，含有泰妙菌素的                           的优点，可满足小型猪药代动力学研究中多时间
               血浆样品在室内恒温放置             10 h、–70 ℃  的恒温储存        点、大样本量的检测需求。因此，我们选择乙腈蛋
               30 d 以及在–20 ℃    的恒温环境下经过          5 次循环冻        白沉淀法处理血浆样本。本研究建立的                  LC-MS/MS
               融，RSD≤15%（n=6），RE     在±15%   内，表明泰妙菌素           检测方法大幅提升了样品检测效率，可满足大批量
               在血浆样本中稳定。标准曲线和质控样品在                    4 ℃  自    生物样品的快速分析需求，有效解决了现有部分检
               动进样器放置        24 h 后再次进样分析。结果显示，                 测方法分析周期过长的问题。
               RSD≤15%（n=6），RE    在±15%   内，表明在此条件下                  在进行制剂比较研究之前，先考察了泰妙菌素
               已制备样品的再进样稳定性满足要求。                                经静脉注射给药后的药代动力学特征，用以评价泰
                3.2    泰妙菌素不同制剂在小型猪体内的药代动力                      妙菌素本身在猪体内的药代动力学过程和计算不
               学研究                                              同制剂的绝对生物利用度。结果提示泰妙菌素原
                    应用本研究建立并验证的             LC-MS/MS  分析方       料药在小型猪体内的暴露量较大，组织分布范围较
               法，测定了小型猪经静脉注射泰妙菌素原料药、灌                           广，经静脉注射后代谢适中，该药代动力学特征与
               胃给予    3 种泰妙菌素制剂后，各时间点血浆样品中                      Huang 等 [15]  报道的猪体内泰妙菌素注射剂药代动
               的泰妙菌素浓度。血浆样品按“2.3”项下方法处                          力学结果一致，这确保了制剂生物利用度计算的可
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