Page 82 - 《中国药科大学学报》2025年第5期
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               of Carum carvi L. and elucidates its pharmacological substances basis, which provides a theoretical foundation
               for the anti-vitiligo effects of acacetin.
               Key words    Carum  carvi  L.; UPLC-Q-Exactive  Orbitrap-HRMS; network  pharmacology; melanogenic
                           activity; anti-vitiligo; acacetin

               This study was supported by Tianshan Talent Training Program of Xinjiang Uygur Autonomous Region (2022TSYCCX0023); the
               Natural  Science  Foundation  of  Xinjiang  Uygur  Autonomous  Region  (2022D01E94,  2023D01A05,  2022D01B208);  and  the  Key
               Research and Development Project of Xinjiang Uygur Autonomous Region (2022B03007-3)

                    藏茴香又名葛缕子,是双子叶植物药伞形科葛                        检测试剂(上海爱必信生物科技有限公司);酪氨酸
               缕属植物葛缕子         Carum carvi L.的果实,原产于欧           酶(tyrosinase,TYR)抗体(美国     Santa Cruz 公司);小
               洲和西亚,在我国东北、西藏、新疆等地均有分布。                          眼 畸 形 相 关 转 录 因 子 ( microphthalmia-associated
               藏茴香蕴藏量较大、成本低、易采集 ,先后被《西                          transcription  factor, MITF) 抗 体 ( 美 国  Danvers 公
                                                [1]
               藏自治区药品检验所》《青海省藏药炮制规范》收                           司);β-actin 抗体、HRP-羊抗兔        IgG、HRP-兔抗山
               载,为藏族、维吾尔族传统用药,具有祛风祛寒、温                          羊  IgG、HRP-羊抗小鼠       IgG(武汉博士德生物公
                                [2]
               中健脾的药用价值 。现代研究表明,藏茴香有丰                           司);其他试剂均为市售分析纯。
               富的生物活性,如抗菌 、抗氧化 、抗炎、抗肿瘤、                          1.2    仪 器
                                             [4]
                                   [3]
                   [5]
               利尿 等。以藏茴香为主药的阿提日拉力蜜丸在治                                超 高 压 液 相 串 联     Ultimate  3 000-Q-Exactive
               疗白癜风方面已有多年的临床使用历史 ,并且基                           plus 组合  Oribitrap 高分辨质谱(美国赛默飞世尔公
                                                    [6]
               于课题组前期对藏茴香            70%  乙醇提取物的抗白癜             司);Waters BEH C 色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7
                                                                                  8
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                          [7]
               风相关研究 ,显示出对黑色素生成的促进和酪氨                           μm);全波长酶标仪        Multiskan GO(美国赛默飞世尔
               酸酶的激活,于是期望进一步研究藏茴香的药效物                           公司);实时荧光定量          PCR  仪  LightCylcler480Ⅱ(瑞
               质基础。                                             士罗氏公司)。
                    本研究通过文献检索 、同时运用                 UPLC-Q-      1.3    动物和细胞
                                        [8]
               Exactive-Orbitrap-HRMS  技术分析藏茴香所含化学                   SD  大鼠,雌性,体重(200 ± 20)g,6 周龄,由新
               成分及入血成分,推断确认其成分信息。在此基础                           疆医科大学医学实验动物中心提供,动物生产许可
               上,应用网络药理学探究藏茴香的抗白癜风的作用                           证号:SCXK(新)2018-0002。小鼠皮肤黑色素瘤细
               靶点及机制并通过体外实验进行验证。本研究结                            胞  B16F10 购自北纳生物(BNCC354753),所有动物
               果为藏茴香的质量控制、作用机制研究和药物开发                           实验均符合动物伦理委员会标准。
               提供了数据支持和实验依据。
                                                                 2    方 法
                1    材 料
                                                                 2.1    样品溶液的制备
                1.1    药品与试剂                                         精密称定藏茴香药材粉末               20.018 2 g,加入
                    藏茴香药材      2022 年  8 月购自青海省西宁市,             70%  乙醇   200 mL,超声提取(250 W,35 kHz,20
               由中国科学院新疆理化技术研究所陈丽副研究员                            min),补足减失溶剂重量后减压过滤。滤液旋蒸除
               鉴定为伞型科植物葛缕子              Carum carvi L.的果实;      醇,水溶后石油醚脱脂,水相蒸干,甲醇定容至                      10
               刺槐素标准品(纯度≥95%,四川恒诚致远生物公                          mL,0.22 μm  滤膜过滤,取续滤液进样分析。
               司);甲醇、甲酸        (色谱纯,美国赛默飞世尔公司);                  2.2    含药血浆的制备
               DMEM   高糖培养基、青链霉素双抗、胰蛋白酶、台                            取  SD  大鼠,随机分成      2 组,即空白组和给药
               盼蓝染液(美国         Gibco 公司);胎牛血清(以色列               组,每组    6 只,给药前将大鼠禁食           12 h,自由饮水,
               Biological Industries 公司);二甲基亚砜、L-DOPA、          给药组大鼠灌胃藏茴香提取液(10 g/kg,经预实验
               8-甲氧基补骨脂素、脱氧胆酸钠、BCA                 试剂盒(上        筛选最佳给药量),灌胃            1 次后于    0、0.25、0.5、1、
               海西格玛奥德里奇贸易有限公司);ECL                  化学发光        1.5、2、2.5、3、4、6、8 h 分别眼眶静脉取血           0.5 mL
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