Page 57 - 《中国药科大学学报》2025年第5期

第 56 卷第 5 期 李 越，等：NSUN2 通过介导 ARMC9 的 m C 5 修饰促进胃癌细胞的增殖、转移和侵袭 589

mRNA 发生 m C 5 甲基化修饰。 过表达组和其对照组 AGS 细胞，通过实时荧光定
3.5 ARMC9 mRNA 的 m C 5 修饰可以提高其稳定性 量 PCR 检测 ARMC9 mRNA 表达水平。结果显示，
为了探究 NSUN2 催化 ARMC9 mRNA 发生 过表达组和对照组分别与其 0 h 相比，NSUN2 过表
m C 5 甲基化修饰后，是否可以提高 ARMC9 蛋白表 达的情况下（P<0.01，图 5-B），AGS 细胞中的 ARMC9
达水平，本研究在 AGS 细胞中过表达 NSUN2 后进 mRNA 水平上调（P<0.05，图 5-C），ARMC9 mRNA
行蛋白免疫印迹实验。结果显示，与对照组相比， 降解速率明显低于对照组（P<0.001，图 5-D）。这表
NSUN2 高表达使得 ARMC9 蛋白水平升高（图 5-A）。 明过表达 NSUN2 可能通过促进 ARMC9 mRNA 的
为了进一步探究 NSUN2 如何提高 ARMC9 蛋白水 m C 5 修饰从而抑制其降解，上调了 ARMC9 的 mRNA
平，使用 10 μmol/L 放线菌素 D 分别处理 NSUN2 水平，继而上调了 ARMC9 蛋白水平。

A B AGS C AGS D AGS

***
**
Vector FLAG-NSUN2 25 1.5 1.5 Vector FLAG-NSUN2
20
1.0
15
1.0
ARMC9 Relative NSUN2 mRNA expression 10 5 Relative ARMC9 mRNA expression 0.5 Relative ARMC9 mRNA expression 0.5 *** *** ***
β-Tubulin 0 Vector 0 Vector 0
FLAG-NSUN2 FLAG-NSUN2 Hours after actinomycin D/h
9
3
0
6
Figure 5 NSUN2 affects ARMC9 expression level through mRNA degradation rate ( x ± s, n=3)
A: Protein levels of ARMC9 in AGS cells which have been transfected with NSUN2; B: Overexpression efficiency of NSUN2; C: ARMC9
mRNA level of NSUN2 overexpressing AGS cells; D: ARMC9 mRNA levels of AGS cells at 0, 3, 6, and 9 h after actinomycin D treatment
**P<0.01, ***P<0.001
3.6 ARMC9 促进 AGS 细胞的增殖、迁移和侵袭 从细胞功能层面验证了 NSUN2 的高表达状态是推
Sun 等 [23] 发现 ARMC9 在肝癌中表达，敲减后 动胃癌恶性进展的关键因素之一。
可以抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，推测 基于 NSUN2 作为 m C 5 甲基转移酶这一重要
其与肝癌的恶性进展有关。为了探究 ARMC9 在 的生化特性，本研究进一步展开了对其潜在靶点以
胃癌中是否也存在促进肿瘤进展的功能，本研究将 及作用机制的深入探索。目前，已有大量研究表
ARMC9 过表达质粒及其空载体分别转染至 AGS 明，在多种不同类型的人类肿瘤组织样本中，NSUN2
细胞中（图 6-A），48 h 后分别检测了 ARMC9 mRNA 的表达水平呈现出显著上调的趋势 [24−28] 。这提示
和蛋白的表达情况，验证了它的过表达效率（图 6- NSUN2 极有可能通过调控特定的 RNA 甲基化修
B、C）。随后，进行了细胞集落形成和细胞迁移及 饰模式，对下游靶点的 m C 5 水平产生重要影响，进
侵袭实验。结果发现，ARMC9 高表达使得 AGS 细 而参与到肿瘤的发生与发展过程中。例如，在胆囊
胞的形成克隆集落的能力增强（图 6-D），迁移侵袭 癌的相关研究中，通过抑制 NSUN2 的表达，癌细胞

的细胞数量明显增多（图 6-E），提示 ARMC9 可以 的增殖速率明显减缓 ，这一结果充分表明 NSUN2
[29]
促进胃癌恶性进展。 在胆囊癌的发生发展中起到了重要的促进作用。
类似的，在人类膀胱尿路上皮癌的研究中，NSUN2
4 讨 论
介导的 m C 5 修饰也被证实为肿瘤发生的重要驱动
本研究探讨了 NSUN2–m C–ARMC9 这一作 因素之一 。这些来自不同肿瘤类型的研究结果，
5
[30]
用轴在人类胃癌发生、发展进程中所扮演的关键角 均表明 NSUN2 在多种癌症的发生、发展过程中具
色及其内在作用机制。本研究选取了人胃癌细胞 有显著的促癌作用，进一步凸显了深入研究 NSUN2
系 AGS 作为主要研究对象，实验结果显示，当 在胃癌中作用机制的重要性。
NSUN2 表达水平显著升高时，胃癌细胞的克隆集 进一步研究发现， ARMC9 mRNA 能够作为
落形成能力以及迁移、侵袭能力均得到明显增强， NSUN2 的重要作用靶点，并且受到 NSUN2 的特异