Page 194 - 《水产学报》2026年第3期

3 期 水 产 学 报 50 卷
1.0

pH 5.5
pH 6.0
0.8 pH 6.5
pH 7.0 pH 5.5 pH 6.0 pH 6.5 pH 7.0 pH 7.5 pH 8.0 pH 8.5 pH 9.0
pH 7.5
0.6
pH 8.0
吸光度 absorbance 0.4 pH 8.5
pH 9.0
0.2

0
300 400 500 600 700
波长/nm
wave length
(a)
1.0
0 μL
0.2 μL
0.8 0.4 μL
0.6 μL
0.8 μL 0 0.2 μL 0.4 μL 0.6 μL 0.8 μL 1.0 μL 1.2 μL
1.0 μL
0.6
吸光度 absorbance 0.4 1.2 μL

0.2

0
300 400 500 600 700
波长/nm
wave length
(b)

图 4 20 nm 胶体金标记抗体最适 pH 和抗体最适添加量的确定
(a) 不同 pH 值条件下 20 nm 胶体金溶液标记抗体吸光度曲线 (300~700 nm 波长) ，(b) 不同抗体添加量条件下 20 nm 胶体金溶液标记抗体的
吸光度曲线 (300~700 nm 波长)。
Fig. 4 Determination of the optimal pH and the optimal amount of antibody for 20 nm colloidal gold solution labeling
(a) absorbance curves of 20 nm colloidal gold solution-labeled antibodies (300-700 nm wavelength) under different pH values, (b) absorbance curves of
20 nm colloidal gold solution-labeled antibodies under different antibody dosages (300-700 nm wavelength).
II 感染的检测效果，本实验采用腹腔注射感染稀 其余阴性样本无目的条带出现 (图 10-b) 。试纸条
有鮈鲫，对鳃、鳔、肝脏、皮肤、脑、脾脏、鼻 检测结果显示，阳性样本检测线 (T 线) 与质控线
孔、头肾、后肠、鳍条、心脏及肌肉等 12 个组织 (C 线) 均呈现褐红色条带，其余样本仅显示质控
进行 RT-PCR 与试剂盒检测分析 (图 9) 。试剂盒 线，检测结果与 RT-PCR 电泳结果完全吻合。因
检测结果显示，鳃、鳔、肝脏、皮肤、脑、脾脏、 此，本试剂盒具有良好的诊断可靠性，检测准确
肌肉、头肾及后肠组织匀浆中均稳定检出 GCRV- 度高 (图 10-c)。
II，而鳍条、心脏与鼻孔组织未检出病毒。检测
结果与 RT-PCR 结果基本相符。 3 讨论

2.9 试剂盒检测准确度评估 草鱼出血病是我国淡水养殖业中危害最为严

本实验采用灌胃方式感染草鱼 (图 10-a)。根 重的病毒性疾病之一。近年来其流行和致病的病
据国标法检测 (GB/T 36 190—2018) 标准，图 10 原为 GCRV-II。流行病学研究表明，该病毒可通
编号 1~5 的草鱼样本 RT-PCR 检测结果为阳性， 过水平传播途径导致幼鱼暴发性感染，造成大量
在 1.5% 琼脂糖凝胶中均出现 M6 特异性条带，而 死亡，对草鱼养殖业可持续发展构成严峻挑战 。
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