Page 196 - 《水产学报》2026年第3期
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3 期                                     水    产    学    报                                 50 卷

                         草鱼组织

                  PBS              SVCV    CyHV-3  GCRV-Ⅰ
                        C. idella tissue                                                       对照组
                                                                                               control
                                                                                               感染组
                                                                                               GCRV-Ⅱ

                                                                                    (a)
                 图 7    GCRV-II 抗原检测试剂盒特异性验证结果
                                                                 bp    M 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10
                   Fig. 7 GCRV-II antigen rapid detection kit   500                                  320 bp
                          specificity validation results        250
                                                                100
                                                                                    (b)

                    第 0 天         第 15 天        第 45 天
                     day0          day15         day45             样本 1    样本 2    样本 3    样本 4   样本 5
                                                                  sample 1  sample 2  sample 3  sample 4  sample 5

                  +      −      +       −      +      −
                    第 60 天        第 75 天        第 90 天             样本 6    样本 7    样本 8    样本 9   样本 10
                    day60          day75         day90            sample 6  sample 7  sample 8  sample 9  sample 10




                  +      −      +       −      +      −                             (c)

               图 8    GCRV-II 抗原检测试剂盒储存稳定性验证结果
                                                                 图 10    GCRV-II 抗原检测试剂盒检测准确度验证
              +. 阳性,−. 阴性。
                                                               (a) 健康草鱼与感染  GCRV-II 草鱼,(b) 10  尾草鱼样本  RT-PCR  检
                      Fig. 8 Results of storage stability of   测分析;M. DL2000 DNA marker,1~10. 样本  1~10,(c) 10  尾草鱼
                           GCRV-II antigen test kit            样本试剂盒检测分析。
              +. positive, −. negative.                           Fig. 10 Verification of GCRV-II antigen rapid
                                                                         detection kit detection accuracy
                 bp   M 1 2 3  4 5  6  7 8  9 10 11 12

                500                                            (a) healthy and GCRV-II infected C. idella, (b) RT-PCR detection res-
                250                                  320 bp
                100                                            ults; M. DL2000 DNA marker, 1-10. sample 1-10, (c) detection results
                                   (a)                         using GCRV-II antigen rapid detection kit.
                   头肾    后肠     脾脏    皮肤     肌肉     脑          昂贵设备) 、操作简便 (无需专业培训) 等优势,
                head kidney hindgut  spleen  skin  muscle  brain  大幅降低了检测门槛。该技术结合其他检测技术
                                                               可应用于苗种筛查、养殖过程病原监测及抗病种
                                                               质选育等多个环节,实现疫病全程防控,有效阻
                   鳃      鳔     肝脏     鳍条    心脏    鼻孔          断  GCRV-II 的传播,从而破解“疫病-补苗-再感染”
                   gill  swim bladder  liver  fin bar  heart  nostril
                                                               的恶性循环,为草鱼出血病疫病防控提供可靠、
                                                               便捷的技术支撑,助力草鱼养殖业的可持续发展。

                                    (b)                            胶体金标记抗体的作用机制基于                pH  调控的

                                                               静电吸附原理。在酸性环境中,带正电荷的胶体
                        图 9    GCRV-II 抗原检测试剂盒
                                                               金与质子化抗体的同性电荷相斥;当                  pH  升至等
                          发病个体各器官检测结果
                                                               电点以上时,抗体去质子化带负电,与胶体金产
              (a) 各组织  RT-PCR  检测结果;M. DL2000 DNA marker,1. 头肾,
              2. 后肠,3. 脾脏,4. 皮肤,5. 肌肉,6. 脑,7. 鳃,8. 鳔,9. 肝脏,    生静电结合。通过紫外光谱分析发现,520 nm                   特
              10. 鳍条,11. 心脏,12. 鼻孔,(b) 各组织试剂盒检测结果。             征吸收峰右移程度反映抗体结合量,峰高体现胶
               Fig. 9 Results of GCRV-II antigen rapid detection kit
                                                               体金均一性。当       520 nm  特征吸收峰右移程度与峰
                       by organs of pathogenic individuals
                                                               高同时达到临界值时,可获得使抗体标记充分且
              (a)  RT-PCR  detection  results  of  different  organs;  M.  DL2000  DNA
                                                               颗粒分散均匀的最佳标记体系 。本研究开发的
                                                                                          [37]
              marker, 1. head kidney, 2. hindgut, 3. spleen, 4. skin, 5. muscle, 6. brain,
              7. gill, 8. swim bladder, 9. liver, 10. fin, 11. heart, 12. nostril. (b) detec-  GCRV-II 抗原检测试剂盒采用  20 nm  的胶体金标
              tion results of each organization's reagent kit.  记  VP35#8,通过   520 nm  特征吸收峰峰高及右移
              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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