Page 143 - 《水产学报》2026年第3期

3 期 陈林辉，等：高脂饲料中添加丙酸钠对大口黑鲈幼鱼生长、肝脏健康及肠道菌群的影响 50 卷

表 1 饲料组成及营养水平 (干物质) 836×g 条件下，离心 10 min，抽取上层血清，−20 ℃
Tab. 1 Formulation and proximate composition of 保存，用于血清生化分析；抽血后的鱼，解剖获
the experimental diets (dry matter) %
取肝脏和肠道，一部分−20 ℃ 保存，用于酶活性
组别 groups 分析，一部分−80 ℃ 保存，用于 提取，另一
项目 RNA
items CON HFD HFD+ 部分保存于 多聚甲醛溶液中，用于后续组织
NaSP 4%
切片分析；在无菌条件下取适量的肠道内容物，
原料 ingredients
鱼粉 peruvian fish meal 1) 50.00 50.00 50.00 −80 ℃ 保存，用于肠道菌群多样性分析。
豆粕 soybean meal 2) 10.00 10.00 10.00 1.4 全鱼体成分分析
大豆浓缩蛋白 soy protein concentrate 3) 13.00 13.00 13.00
参照 AOAC [29] 方法，测定饲料及全鱼样品中
鱼油 fish oil 4) 3.00 7.00 7.00
粗蛋白、粗脂肪、水分及灰分的含量。样品于烘
豆油 soybean oil 3.00 7.00 7.00
箱中 105 ℃ 烘干至恒重，测定水分含量；使用
小麦面粉 wheat flour 7.00 7.00 7.00
PEIOU SKD-800 蛋白质分析仪 (上海沛欧分析仪
维生素预混料 vitamin premix 5) 0.75 0.75 0.75
器有限公司) 测定粗蛋白含量；使用索氏抽提法测
矿物质预混料 mineral premix 6) 0.75 0.75 0.75
定粗脂肪含量；碳化后的样品在马弗炉中 550 ℃
维生素C vitamin C 0.2 0.2 0.2
灼烧至恒重，测定灰分含量。
1.50 1.50 1.50
磷酸二氢钙 Ca(H 2 PO 4 ) 2
羧甲基纤维素钠 sodium carboxymethyl cellulose 1.00 1.00 1.00 1.5 生化分析
微晶纤维 microcrystalline cellulose 9.80 1.80 1.30
测定血清总蛋白 (TP)、甘油三酯 (TG)、总胆
丙酸钠 sodium propionate 7) 0.00 0.00 0.50
固醇 (TC)、高密度脂蛋白 (HDL-C)、低密度脂蛋
合计 total 100.00100.00100.00
白 (LDL-C)、 谷 丙 转 氨 酶 (ALT) 和 谷 草 转 氨 酶
近似组成 proximate composition
(AST) 等指标。称取 0.1 g 肝脏或肠道组织，按重
粗蛋白质 crude protein 45.64 45.52 45.57
量体积比 加入生理盐水，在冰上使用匀浆器
粗脂肪 crude lipid 10.13 17.73 17.85 1∶9
注：1、4. 秘鲁鱼粉和鱼油由埃克萨尔马渔业公司生产，秘鲁；2、 制备 10% 的组织匀浆液。并在 4℃ 离心 (2 800×g，
3. 豆粕和大豆浓缩蛋白由福建长德蛋白科技有限公司生产。5. 维生 10 min)，收集上清液。检测肝脏总抗氧化能力 (T-
素预混料(每千克饲料)，VA 800 000 000 IU，VD 200 000 000 IU，
AOC)、过氧化氢 (H O ) 含量、超氧化物歧化酶
2
2
VE 5 000 IU，VK 1 000 mg，VB 1 1 500 mg，VB 2 1 500 mg，VB 6
800 mg，VB 12 20 mg，烟酰胺400 mg，泛酸钙25 mg，叶酸25 mg， (SOD) 活性、过氧化氢酶 (CAT) 活性、丙二醛 (MDA)
生物素8 mg，肌醇100 mg。6. 矿物质预混料(每千克饲料)， 含量以及肠道淀粉酶、脂肪酶和胃蛋白酶活性。
MnSO 4 ·H 2 O 50 mg，KI 100 mg，CoCl 2 (1%) 100 mg，CuSO 4 ·5H 2 O 上述指标均使用商业试剂盒 (南京建成生物工程研
20 mg，FeSO 4 ·H 2 O 260 mg，ZnSO 4 ·H 2 O 150 mg，Na 2 SeO 3 (1%) 究所有限公司)，严格按照说明书进行测定。
50 mg。7. 丙酸钠(纯度≥99%)，购自镇海百川生物科技有限公司。
Notes: 1, 4. among them, the Peruvian fish meal and fish oil are 1.6 肝脏油红 O 染色
produced by the Exalmar Fisheries S.A.A., Peru; 2, 3. soybean meal and
soy protein concentrate are produced by Fujian Changde Protein 肝脏样本经过梯度乙醇脱水，二甲苯透明后，
Technology Co., Ltd., China. 5. vitamin premix (per kg diets), VA 8 000 000 进行石蜡包埋，切片 (4 μm)，再经油红 O 染色，
IU, VD 2 000 000 IU, VE 5 000 IU, VK 1 000 mg, VB 1 1 500 mg, VB 2
中性树脂封片。在光学显微镜下 (Eclipse E100，
1 500 mg, VB 6 800 mg, VB 12 20 mg, nicotinamide 400 mg, calcium
日本) 进行观察并拍照。使用 Image-J 软件对油红
pantothenate 25 mg, folic acid 25 mg, biotin 8 mg, inositol 100 mg.
6. mineral premix (per kg diets), MnSO 4 ·H 2 O 50 mg, KI 100 mg, CoCl 2 O 溶液染色区域进行分析。
(1%) 100 mg, CuSO 4 ·5H 2 O 20 mg, FeSO 4 ·H 2 O 260 mg, ZnSO 4 ·H 2 O
1.7 基因表达分析
150 mg, Na 2 SeO 3 (1%) 50 mg. 7. sodium propionate (purity≥99%) was
purchased from Zhenhai Baichuan Biotechnology Co., Ltd..
采用 Trizol 法提取肝脏总 RNA。根据 260 nm
三卡因 (MS-222) 麻醉后进行计数及称重。每个重 和 280 nm 处吸光度 (OD 260 nm/OD 280 nm) 的比
复随机取 3 尾鱼，将其保存在−20 ℃ 下，用于全 值确定总 RNA 的浓度和纯度，用 2% 琼脂糖凝胶
鱼粗成分分析。每个重复随机取 3 尾鱼，测量记 电泳检测总 RNA 的完整性。使用 Prime Script™
录其体重、体长、肝脏重和内脏团重量。每个重 RT reagent Kit with gDNA Eraser [ 宝生物工程 (大
复选取 5 尾鱼，通过尾静脉取血，并在 4 ℃， 连) 有限公司 ] 逆转录试剂盒合成第一链 cDNA，

中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries https://www.china-fishery.cn
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