Page 221 - 《水产学报》2026年第01期

1 期 李中林，等：基于胶体金免疫层析技术快速检测鱼糜中的卵白蛋白 50 卷

15 B 1 2 3 4 5 6 7
12
T
T 线灰度值 gray value of the T line 9 6 C 图 6 OVA-CGIA-Strip 的特异性测试

0 3 B.空白对照，1.草鱼糜，2.鲢鱼糜，3.蓝圆鲹鱼糜，4.尼罗罗非鱼
OVA，7.鸭蛋
OVA。
糜，5.大西洋鳕鱼糜，6.鸡蛋
0 0.01 0.1 1 10 20 40 100 Fig. 6 Specificity test of OVA-CGIA-Strip
卵白蛋白浓度/(μg/mL) B. blank， 1. C. idella surimi， 2. H. molitrix surimi， 3. D. maruadsi
concentration of ovalbumin surimi， 4. O. niloticus surimi， 5. G. morhua surimi， 6. egg OVA，
(a)
7. duck egg OVA.
15
y=7.17−2.79lgx
2
R =0.983 4 CV 值为 11.03%~12.41% (表 1)。由于鱼糜的基质
IC 50 =(3.13±0.18) μg/mL 干扰较大，导致两种 OVA 在鱼糜中的加标回收率
整体略偏高，但该方法在线性范围内的加标回收
10
T 线灰度值 gray value of the T line 5 结果符合预期要求，具有良好的准确度，表明研
的检测。
发的
可用于鱼糜中
OVA-CGIA-Strip
OVA
的实际应用效果
2.8 OVA-CGIA-Strip
随机选取市售的 7 种鱼糜制品 (序号 1~7，配
0
−2.0 −1.5 −1.0 −0.5 0 0.5 1.0 1.5 料表中均有标注含蛋清成分，但未明确具体含量)
lg 卵白蛋白浓度/(μg/mL) 和不含蛋清鱼糜 (序号 8，作为阴性对照)，用
lg concentration of ovalbumin
(b) OVA-CGIA-Strip 进行检测。结果如图 7-a 所示，
7 种冷冻鱼糜制品在检测卡的 T 线均出现不同程
A 1 2 3 4 5 6 7
度的弱化，表明不同鱼糜制品中均有不同程度添
加蛋清，这也提示了在鱼糜制品包装上对蛋清含
C
T 量进行明确标示及监管的必要性。进一步可利用
胶体金试纸条分析仪对 T 线条带进行量化，代入
标准曲线可计算得到鱼糜样品中 OVA 的含量。
(c)

为进一步确认这 7 种鱼糜制品中 OVA 的存
图 5 OVA-CGIA-Strip 的灵敏度分析
在情况，用 Western blot 作进一步验证。如图 7-b
(a) OVA-CGIA-Strip 四参数竞争抑制曲线；(b) OVA-CGIA-Strip 标
准曲线；(c) 不同标准浓度 OVA 的检测结果，A.提取缓冲液。 所 示 ， 7 种 鱼 糜 制 品 均 在 分 子 质 量 45 ku 处 有
Fig. 5 Sensitivity analysis of OVA-CGIA-Strip OVA 特异性条带显示，而阴性对照未检测到该条
(a) four-parameter competitive inhibition curve of OVA-CGIA-Strip; (b) 表 1 OVA-CGIA-Strip 的准确性测试
OVA-CGIA-Strip standard curve; (c) detection results of OVA at differ-
Tab. 1 Accuracy test of OVA-CGIA-Strip
ent standard concentrations, A. extracted buffer solution, 1. 0.01 μg/mL,
2. 0.10 μg/mL, 3. 1.00 μg/mL, 4. 10.00 μg/mL, 5. 20.00 μg/mL, 6. 40.00 加标量/ 实际检测值/ 加标回 变异
样品
μg/mL, 7. 100.00 μg/mL. samples (µg/mL) (µg/mL) 收率/% 系数/%
spiked level measured value recovery CV
OVA 和鸭蛋 OVA 标准品，加标终浓度分别为 鸡蛋 OVA 1.00 1.19±0.15 109.50 10.60
egg OVA
1.00、10.00 和 100.00 µg/mL，每个加标浓度重复 10.00 11.25±0.76 112.52 11.32
测定 3 次，并用胶体金试纸分析仪器进一步确证。 100.00 112.21±0.24 112.41 9.83
鸡蛋 OVA 在鱼糜样品中的加标回收率为 109.50%~ 鸭蛋OVA 1.00 1.14±0.92 114.92 11.03
duck egg OVA 10.00 8.79±0.69 87.94 12.35
112.52%，CV 值为 9.83%~11.32%；鸭蛋 OVA 在
100.00 93.46±0.78 93.43 12.41
鱼 糜 样 品 中 的 加 标 回 收 率 为 87.94%~114.92%，

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