Page 222 - 《水产学报》2026年第01期
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1 期 水 产 学 报 50 卷
A 1 2 3 4 5 6 7 8 含量,同一生产线的制品中可能受 OVA 的残留或
交叉污染。因此,迫切需要建立一种能在现场快
速、灵敏地检测出鱼糜原料及其制品中 OVA 含量
C
T 的方法,便于鱼糜制品生产企业进行合理化生产,
从而在产品外包装上正确标识,对于 OVA 过敏者
维护自身健康权益具有重要的现实意义。
(a)
目前,检测鱼糜制品及其他食品中 OVA 存
M 1 2 3 4 5 6 7 8
ku
70 在情况的研究已有报道。鱼糜制品中 OVA 的检测
55
40 最早是以免疫测定法为主,Romero-Rodríguez 等 [24]
35
25
将免疫印迹技术 (Western blot) 应用于检测鱼糜制
15
品中的 OVA,检测限为 0.50 ng/mL。后来逐步发
10
展为以 ELISA 检测模式的检测方法居多,例如赵
勇娟等 [9] 基于竞争性 ELISA 建立了鱼糜制品中
(b)
图 7 利用 OVA-CGIA-Strip 检测鱼糜样品及 OVA 的检测方法,该方法对鱼糜制品中 OVA 的
Western blot 验证 检测限为 1.82 mg/kg,具有良好的检测效果。朱
[33]
(a) 8 种鱼糜样品的 OVA-CGIA-Strip 检测结果,A.提取缓冲液;(b) 文嘉等 通过开发了双抗体夹心酶联免疫吸附检
Western blot。M.标准蛋白;1~7. 市售鱼糜样品,8. 阴性对照样品。 测试剂盒,提升了 ELISA 检测法对鱼糜制品中的
Fig. 7 OVA-CGIA-Strip assay for surimi samples and OVA 的检测灵敏度,并进而实现对鱼糜制品中的
Western blot
鸡蛋清含量的定量检测。诸如 Western blot、ELISA
(a) OVA-CGIA-Strip detection results of eight surimi samples, A.
等检测方法操作步骤繁琐,检测时间长,需要精
extracted buffer solution; (b) Western blot. M, molecular weight marker;
密昂贵仪器且实际应用困难。随后研究人员将免
1-7. commercial surimi samples; 8. negative control sample.
疫测定与传感器进行结合,突破了单一免疫检测
带,此结果与检测试纸条一致。综合以上结果表
方法的模式,检测灵敏度得到较大提升。Kareem
明,本研究开发的试纸条对于鱼糜制品中 OVA 的
等 [34] 建立了一种基于纳米纤维素-Ti 的超灵敏化学
检测是可行的,这也为冷冻鱼糜原料及制品中
免疫传感器用于检测某些食品 (如饼干、葡萄酒
OVA 的快速检测提供了解决途径。
等) 中的鸡蛋过敏原 OVA,该方法表现出很高的
3 讨论 灵敏度,定量限为 1.10 fg/mL,检测线性范围
为 0.01~1 000.00 pg/mL。虽然这类检测方法较为灵
鱼糜制品适量添加蛋清可以提高凝胶强度, 敏,检测限较低,但难以应用于检测鱼糜等成分
丰富鱼糜制品种类等 [25,28-29] 。但随着鱼糜制品市场 复杂的食品中。本研究通过采用离子交换层析法
需求量的增加,产品良莠不齐的情况值得关注, 从鸡蛋清中高度纯化 OVA,并制备了特异性较好、
部分鱼糜制品的生产为了降低成本,过量添加蛋 亲和力较高的多克隆抗体,开发的胶体金检测试
清且没有正确标识,同时蛋清作为潜在的致敏性 纸条可以针对鱼糜中的 OVA 快速灵敏地检测,相
食物,对于过敏患者潜在风险巨大。早期,咸蛋 较于上述检测方法有较大的优势,主要体现在本
清作为咸蛋黄产品加工废弃物因其高含盐量等原 检测方法操作简便且耗时短,从样品处理到检测
因往往被直接丢弃,造成大量蛋白质资源的浪 完成整个过程可在 10 min内实现。同时,无需特
费 。随着电渗析技术的广泛使用,咸蛋清经过 定的专业操作人员来完成检测,检测结果灵敏度
[30]
脱盐处理后被添加到鱼糜制品中,以增强鱼糜制 较高。最后,区别于目前已有的方法大多依靠大
品的凝胶特性,丰富质感 [31-32] 。除此之外,蛋清 型昂贵精密的分析仪器完成定量检测,本研究建
蛋白的添加形式还有干蛋清粉、冷冻蛋清等。目 立的检测方法只需借助微型或手持的胶体金试纸
前,大多数鱼糜制品生产企业都是直接购入冷冻 分析仪实现 OVA 的定量检测。虽在检测限方面
鱼糜原料进行鱼糜制品的生产加工,购买原料时 (LOD=0.20 µg/mL) 高于以上几种方法,但在鱼糜
无法快速准确得知原料鱼糜中是否含有 OVA 及其 制品实际生产过程中蛋清的添加量较大,一般为
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