Page 216 - 《水产学报》2026年第01期

1 期 水 产 学 报 50 卷

发型变态反应，对婴幼儿和儿童致敏率较高，临 胶体金免疫层析技术 (CGIA) 是以纳米金作
床症状多表现为荨麻疹、呕吐、气喘等，严重可 为示踪标志物应用于抗原抗体的侧流免疫层析检
导致休克甚至死亡 [3-5] 。此外，OVA 的性质较稳定， 测技术 [15] 。由于 CGIA 制作成本低、方便携带、
即便经过高温等处理后依然具有致敏性。由于目 便于现场快速检测且分析结果可肉眼辨别等优点
前尚缺乏治疗 OVA 过敏的有效手段，防止 OVA 而被广泛应用于各个检测领域 [16-17] 。利用 CGIA 快
[6]
导致的食物过敏主要方法是避免摄入该蛋白 。 速检测食品中过敏原的研究已有相关报道 。高
[18]
因此，对非蛋类食品中 OVA 存在情况的检测对于 红艳等 [19] 基于双抗夹心胶体金免疫层析技术建立
有效防治因过敏蛋白引起的食品安全问题具有十 了检测甲壳类水产品中过敏原原肌球蛋白的方法，
分重要的意义。 该方法可在 5 min 内显示结果，视觉检测限为
鱼糜制品因营养价值高、食用方便等特点成 10.00 ng/mL。Anfossi 等 [20] 采用金和银纳米颗粒设
[7]
为我国鱼类加工的重要产品 。鱼糜生产基本工 置多色侧流免疫层析试纸，利用 3 种不同颜色的
艺是将鱼洗净去内脏后采肉去杂，鱼肉经漂洗、 特异性探针同时对 OVA、酪蛋白和榛子敏蛋白这
脱水后得到用于生产鱼糜制品的原料鱼浆，鱼浆 3 种过敏原进行检测，其中 OVA 的检测限为 0.10
经添加盐、淀粉等其他成分并擂溃，成型加热后 mg/L。鱼糜制品在我国的产销量逐年增加，对
[8]
成为鱼糜制品 。随着鱼糜制品需求量持续增长， OVA 过敏的人数也有较高比例，但对鱼糜制品中
更多的低值鱼类被用于制备鱼糜原料。目前的大 OVA 的检测工作尚少有相关报道。本研究拟通过
型鱼糜制品生产企业自身并不生产原料鱼浆，而 制备抗鸡 OVA 多克隆抗体，基于胶体金免疫层析
是从其他企业采购或从国外进口。在鱼浆生产过 检测技术，开发一种操作便捷、低成本、高特异
程中，部分企业通过添加经脱盐处理的蛋清蛋白、 性的卵白蛋白胶体金免疫层析检测试纸 (OVA-
大豆分离蛋白等外源蛋白来替代鱼肉成分以降低 CGIA-Strip)，用于现场快速检测鱼糜原料及制品
成本并提高鱼糜制品的凝胶特性和白度 [9-10] 。 鱼 中过敏蛋白 OVA 的存在情况，为鱼糜类食品的原
糜制品中蛋清等非鱼肉蛋白的过量添加不仅存在 料质量及产品的安全控制提供技术支撑。
以低值蛋白替代高值鱼肉蛋白的问题，对于 OVA
等蛋白过敏的患者更存在安全隐患。我国国标中 1 材料与方法
8 类食品过敏原信息只是作为预包装食品标签的
推荐标示内容，未对过敏蛋白的含量信息作具体 1.1 材料与试剂
要求。鉴于过敏蛋白可能带来的安全隐患以及非 新鲜鸡蛋、鸭蛋 (厦门市集美区某大型超市)；
鱼肉蛋白过量添加对消费者的不利影响，对于蛋
鱼糜原料 (福建安井食品股份有限公司)。
清 OVA 的快速准确检测可以方便鱼糜制品生产企
DEAE-Sepharose 树 脂 [ 中 科 森 辉 微 球 技 术
业对原料鱼浆中蛋清蛋白的存在情况作定性定量
(苏州) 有限公司 ]；四氯金酸 (上海麦克林生化科
分析，避免以次充好问题产生，对于保障产品质
技有限公司)；ECL 化学发光试剂盒 (苏州优逸兰
量具有重要意义和实际应用价值。
迪生物公司)；硝酸纤维素膜 (NC 膜)、PVC 底板、
目前，应用于过敏原 OVA 的检测方法主要
样品垫、结合垫、玻璃纤维棉、重悬工作液 Base
有免疫分析法 [11] 、质谱法 [12] 等。Baldo 等 [13] 将一
E (2×) 、T 线包被液 (厦门波生生物技术有限公司)；
次性电化学微流控制装置与免疫磁珠结合，开发
聚乙二醇 8000、聚乙二醇 20000(北京索莱宝科技
了用于检测葡萄酒中残留的微量 OVA 方法，该方
有限公司)；辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的羊抗鼠
法灵敏度高。Azarnia 等 [14] 采用 ESI-MS 方法成功
IgG(上海碧云天生物技术有限公司)；其他常规试
鉴定了 OVA 的特征肽以检测食物中的 OVA，该
剂均为分析纯 (国药集团化学试剂有限公司)。
方法适合热处理食品中 OVA 的检测。以上方法都
1.2 仪器与设备
可以不同程度地对食品中的 OVA 进行检出，但在
实际应用中存在检测步骤烦琐，需要高昂精密仪 G:BOX 凝 胶 成 像 仪 (英 国 Syngene 公 司 )；
器，对操作人员技术水平要求高，检测周期长， HGS510-2-3 划膜仪 (上海金标生物技术有限公司)；
无法实现现场快速检测等缺陷，难以被用于鱼糜 SC-100 自 动 切 条 机 (东 莞 鼎 鑫 机 械 有 限 公 司 )；
生产的实际检测中。 PILot10-15ES 真空冷冻干燥机 (北京博医康仪器有

https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
2