Page 215 - 《水产学报》2026年第01期

文章编号: 1000-0615(2026)01-019817-11 , 2026, 50(1): 019817

JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA

DOI: 10.11964/jfc.20241214815

李中林, 黄建联, 张凌晶, 等. 基于胶体金免疫层析技术快速检测鱼糜中的卵白蛋白 [J]. 水产学报, 2026, 50(1): 019817.
Li Z L, Huang J L, Zhang L J, et al. Rapid detection of ovalbumin in surimi based on colloidal goldimmunochromatography
assay [J]. Journal of Fisheries of China, 2026, 50(1): 019817 (in Chinese).

基于胶体金免疫层析技术快速检测鱼糜中的卵白蛋白

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李中林 ， 黄建联 2, 3* ， 张凌晶 ， 张长弓 ， 陈玉磊 ，
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翁 凌 ， 曹敏杰 1*
(1. 集美大学海洋食品与生物工程学院，福建 厦门 361021；
2. 福建省冷冻调理水产品加工重点实验室，福建 厦门 361028；
3. 安井食品集团股份有限公司，福建 厦门 361028；
4. 厦门波生生物技术有限公司，福建 厦门 361021)

摘要： 【目的】建立基于胶体金免疫层析技术 (CGIA)，快速简便、现场检测鱼糜中食品过
敏原成分卵白蛋白 (OVA) 的方法。 【方法】鸡蛋清采用双水相萃取法进行前处理，通过离
子交换层析法分离纯化 OVA，利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 检
测纯度并进行质谱鉴定。制备了抗 OVA 多克隆抗体，验证其特异性。以柠檬酸三钠还原
法制备胶体金溶液标记抗体，基于竞争法原理制备 OVA 胶体金免疫层析试纸条并进行优
化。 【结果】SDS-PAGE 和质谱鉴定结果均表明获得了高纯度 OVA。蛋白免疫印迹 (West-
ern blot) 结果显示，抗鸡 OVA 多克隆抗体对鸡蛋 OVA 和鸭蛋 OVA 均有特异性反应，与
鱼糜中的其他蛋白无免疫交叉反应，特异性良好。开发的卵白蛋白胶体金免疫层析检测试
纸 (OVA-CGIA-Strip) 可快速检测鱼糜中的鸡蛋 OVA 和鸭蛋 OVA。采用四参数逻辑曲线拟
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合标准曲线 y=7.17~2.79 lgx(R =0.983 4)，线性范围为 0.01~20.00 µg/mL，检出限为 0.20 µg/mL，
IC =(3.13±0.18) µg/mL。 【结论】本研究制备的卵白蛋白胶体金免疫层析检测方法操作简
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便、特异性好、准确度高，配合胶体金试纸条分析仪可以现场快速定量检测鱼糜中的卵白
蛋白。本研究对于鱼糜制品生产企业把控原料质量，保障过敏人群的健康等具有重要意义。
关键词: 卵白蛋白；鱼糜；胶体金免疫层析技术；食品过敏原；快速检测

中图分类号: TS 254.7 文献标志码: A

卵白蛋白 (OVA) 是禽蛋清中的主要蛋白质， 热等处理后极易形成蛋白质间的交联，因而 OVA
占蛋清总蛋白的 54%。OVA 是一种球状磷酸糖蛋 具有良好的凝胶性、乳化性和起泡性，作为一种
白，相对分子质量约 45 ku，包含 385 个氨基酸残 功能性食品配料被广泛应用于食品工业中。但是，
基，等电点约为 pH 4.5，性质较为稳定 [1-2] 。OVA OVA 是蛋清中的主要过敏原之一，其致敏性仅次
分子中含有 1 个二硫键和 4 个自由巯基，高温加 于卵类黏蛋白，可引起人体由 IgE 介导的Ⅰ型速

收稿日期：2024-12-21 修回日期：2025-02-21
资助项目：国家重点研发计划 (2018YFD0901004)；福建省冷冻调理水产品加工重点实验室开放课题 (FJKLRCAPP2024-01)
第一作者：李中林，从事水产品加工与贮藏研究，E-mail：lizhonglin0319@163.com
通信作者：黄建联，从事鱼糜制品加工研究，E-mail：416688254@qq.com；
曹敏杰，从事水产品深加工、蛋白质化学研究，E-mail：mjcao@jmu.edu.cn
©《水产学报》编辑部（CC BY-NC-ND 4.0） Copyright © Editorial Office of Journal of Fisheries of China (CC BY-NC-ND 4.0)
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