Page 154 - 《水产学报》2025年第12期

姜扬，等 水产学报, 2025, 49(12): 129612

典) 测定粗脂肪含量，抽提所用有机试剂为石油
醚 (分析纯，中国国药集团化学试剂有限公司)。
粗灰分采用灼烧称量法 (GB 5009.4—2016) 测定，
取 2 g 样品在马弗炉中于 550 ℃ 高温下灼烧 8 h
测定灰分含量。每组各设置 3 个平行实验。
氨基酸测定 根据样品的粗蛋白含量，
分别称取 50 mg 肝胰腺和 40 mg 肌肉样品，在
样品中加入 5 mL 6 mol/L 盐酸沙浴 24 h 后，定
容至 50 mL，吸取 1 mL 溶液旋转蒸发，将旋转
蒸发后的样品加入 1 mL 0.02 mol/L 的盐酸，最
图 1 “蟹公寓”系统 后使用高速氨基酸自动分析仪 (LA-8080，日
Fig. 1 Crab apartment system 本) 测定氨基酸组成。
脂肪酸测定 脂肪酸的测定采用 Wang
验组，分别在第 0、2、14 和 60 天时每组取 6
等 [25] 的方法。以 C23:0 为内标。每组各设置 3
只拟穴青蟹进行测量、收集数据和样本。用冰
个平行。取约 1 g 样品于三角烧瓶中，加入 10 mL
麻醉后，测量拟穴青蟹的生长数据 (体重、甲壳
氯仿-甲醇溶剂，连接上冷凝器于 60 ℃ 水浴加
长、宽、高)。解剖并收集的新鲜肌肉样品和肝
热 0.5 h，期间每隔 5 min 取出振荡 1 次。将提
胰腺样品，快速保存在−80 ℃ 超低温冰箱中，
取后的溶液通过滤纸将溶液过滤至离心管中，
用于后续营养组分测定。
加入等体积的 0.9% 氯化钠溶液，充分混匀后，
本研究获得了宁波大学海洋学院实验动物
置于离心机 (5 000 r/min) 离心 10 min。用移液
管理和使用伦理委员会批准，实验过程中操作
枪吸取 3~4 mL 的氯仿层于新的三角烧瓶中。利
人员严格遵守宁波大学海洋学院伦理规范，并
用含有抗氧化剂 0.01% 丁基羟基甲苯 (BHT) 的
按照宁波大学海洋学院伦理委员会制定的规章
甲醇硫酸与总脂反应生成脂肪酸甲酯 (FAME)，
制度执行。
再使用正己烷和去离子水萃取 FAME。利用气
1.2 实验方法 相色谱-质谱仪 (1260，Agilent) 分离测量脂肪酸
甲酯。通过计算目标峰下面积占所有峰总面积
生长指标测定 用游标卡尺 (0.02 mm)
的比例，获得各种脂肪酸的相对百分比。
测量每只拟穴青蟹的头胸甲长 (mm)、头胸甲
高 (mm) 和全甲宽 (mm) [24] ，用电子天平 (0.01 g) 1.3 数据统计分析
称量体重。 通过 Excel 2010 软件对数据进行初步处理，
拟穴青蟹各项生长指标计算公式： 利用 SPSS 22.0 软件进行统计分析，GraphPad

CF=W/L 3 Prism 9.0.0 软 件 作 图 。 利 用 单 因 素 方 差 分 析
(One-Way ANOVA) 进行差异性分析，差异显著
HSI(%) =W h /W×100%
时，采用 Duncan 氏多重比较法分析组间差异显
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式中，CF 为肥满度 (g/cm )，HSI 为肝体指数 著水平，P<0.05 为差异显著。结果用平均值±
(%)，W 为体重 (g)，W 为肝胰腺湿重 (g)，L 为 标准差表示，样本量 n=3， 用 GraphPad Prism
h
头胸甲长 (cm)。 9.0.0 软件绘制柱状图，对肌肉和肝胰腺的脂肪
常规营养成分测定 水分采用直接干燥 酸数据进行主成分分析，并绘制 PCA 图。
法 (GB 5009.3—2016) 测定，取 5 g 样品在 105 ℃
烘干至恒重，称重后减少的重量为水分；采用 2 结果
杜马斯燃烧法 (N×6.25) ，取 1 g 样品通过蛋白
2.1 禁食时间对拟穴青蟹生长特性的影响
质自动分析仪 (FP-528，Leco，美国) 测定粗蛋
白质含量；采用索氏提取法，取 1 g 样品使用 在禁食过程中，各实验组均未出现拟穴青
全自动脂肪仪 (Soxtec System HT6, Tecator，瑞 蟹死亡现象，表观生长特性 (体重、头胸甲长、

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