Page 192 - 《水产学报》2025年第10期

张旭，等 水产学报, 2025, 49(10): 109614

550 °C 马弗炉灼烧分析，脂肪通过索氏乙醚提 基因作为双内参 (β-actin 和 elfa)，并应用 2 −∆∆C t
取，粗蛋白运用凯氏定氮法检测，肌肉组织的 方法计算基因的相对 mRNA 表达。

铁含量同前饲料分析一致。
1.3 数据分析

肌肉 H.E 染色与分析 新鲜肌肉组织置
于 4% 多聚甲醛固定后，由武汉四维加生物科 使用 SPSS 27.0 软件 (IBM，美国) 对数据
技有限公司进行苏木精-伊红染色，使用 Olym- 进行统计分析，结果以均值 ± 标准误 (mean±
pus 显微镜 (Olympus，日本) 观察拍照，使用 SE) 表示。首先使用 Shapiro-Wilk 检验评估数据
Image J 分析计算肌纤维直径 (μm) 和肌纤维密 正态性后，再使用单因素方差分析和 Duncan 氏
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度 (N/mm )。 多重比较检验进行组间多重比较，显著性阈
酶活性及 MDA 含量分析 过氧化氢酶 值设为 P<0.05，差异显著组别以不同小写字母
(CAT) 和总超氧化物歧化酶 (T-SOD) 活性、总 标记。

抗氧化能力 (T-AOC) 和还原型谷胱甘肽 (GSH)/
2 结果
氧化型谷胱甘肽 (GSSG) 含量及比值采用南京

建成生物工程研究所的商业试剂盒测定。丙二
2.1 肌肉组织常规组成
醛 (MDA) 含量采用碧云天商业试剂盒测定。
基因表达分析 首先采用 TRIzol 法提取 不同铁源对黄颡鱼肌肉水分和灰分无显著
肌肉总 RNA(Invitrogen，美国)，再使用碧云天 影 响 (P>0.05) (表 1)。 Fe O NPs 组 肌 肉 粗 蛋
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TM
BeyoRT III cDNA 第一链合成试剂盒合成第一 白含量显著低于其他组 (P<0.05)，其他组之间
链 cDNA。 采 用 MyiQ 双 色 实 时 荧 光 定 量 无显著性差异。Fe-Gly、Fe-CA 和 Fe O NPs 组
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PCR(BIORAD，美国) 进行基因 mRNA 表达水 的肌肉粗脂肪含量显著低于 FeSO 和 4 FeCl 组
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平分析。经 geNorm 分析选用最稳定两个管家 (P<0.05)。

表 1 饲料铁源对黄颡鱼肌肉常规成分 (鲜重) 的影响
Tab. 1 Proximate composition (fresh weight) in muscle tissue of P. fulvidraco fed off different iron sources %
类别 实验饲料 diets
item Fe 2 O 3 NPs
FeSO 4 Fe-Gly FeCl 2 Fe-CA
水分 moisture 79.2 ± 0.26 79.17 ± 0.35 78.54 ± 0.07 78.68 ± 0.05 79.14 ± 0.14
粗蛋白 crude protein 17.83 ± 0.15 a 18.13 ± 0.15 a 17.86 ± 0.29 a 18.37 ± 0.10 a 17.08 ± 0.18 b
粗脂肪 crude lipid 2.09 ± 0.11 a 1.72 ± 0.02 b 2.10 ± 0.00 a 1.74 ± 0.01 b 1.84 ± 0.00 b
灰分 ash 0.96 ± 0.01 0.91 ± 0.02 0.93 ± 0.02 1.00 ± 0.04 0.95 ± 0.02
注：数据代表3次重复(n=3)的平均值±标准误。同一行不同字母的数值有显著差异，P<0.05。
Notes: Data represent mean ± SE of three replicates (n=3). Values having different letters in the same row are significantly different, P<0.05.

2.2 肌肉抗氧化能力 sod2、gpx1、cat 和 nrf2 的 mRNA 表达水平，并
显著提高了 keap1 的 mRNA 表达水平 (P<0.05)。
氧化应激相关酶活性测定结果表明，与
Fe-Gly 组 呈 相 反 趋 势 ， Fe-CA 组 显 著 提 高 了
FeSO 组相比，Fe O NPs 组显著降低了 CAT、
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T-SOD、T-AOC 活性及 GSH/GSSG 比值，同时 sod1 的 mRNA 表达，但与 Fe-Gly 组仍存在显
著性差异 (P<0.05)(图 2)。FeCl 和 2 Fe-CA 组显
显著增加了 MDA 含量 (P<0.05)。Fe-Gly 组则显
著降低了 cat 的 mRNA 表达，但与 Fe O NPs
著提高了抗氧化酶 CAT 和 T-AOC 活性，显著 2 3
组仍存在显著性差异 (P<0.05)(图 2)。
降 低 了 MDA 含 量 (P<0.05)。 其 他 铁 源 (FeCl 2
和 Fe-CA 组) 对肌肉抗氧化状态也有不同程度 2.3 肌肉 H.E 染色及分析
的影响 (图 1)。 肌肉 H.E 染色结果表明，Fe-Gly 和 Fe-CA
氧化应激相关 mRNA 表达水平结果表明， 组的肌纤维紧密，形态良好，优于 FeSO 和
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与 FeSO 组相比，Fe O NPs 组显著降低了 sod1、 FeCl 组，Fe O NPs 组肌纤维松散，形态最差
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