Page 191 - 《水产学报》2025年第10期
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张旭,等 水产学报, 2025, 49(10): 109614
料利用率下降、生长发育抑制、免疫力受损和 达层面评估 5 种铁源对其肌肉组织的影响,以
抗氧化能力下降等负面影响 [4-5] 。当前水生动物 期为黄颡鱼饲料中铁源的添加提供理论支持。
铁营养研究多集中在铁缺乏、铁过量以及最适
1 材料与方法
需求量等方向,而对饲料铁源的研究尚显不足。
现有的文献报道的铁源主要涉及:硫酸亚铁、
1.1 饲料配方与饲养管理
氯化亚铁、富马酸亚铁、柠檬酸铁、酵母铁、
氨基酸螯合铁、纳米氧化铁等铁源 [4, 6-11] 。Liu 黄颡鱼饲料制作方法根据实验室之前的研
[1]
等 研究发现,饲料中添加 77.3 mg/kg 硫酸亚 究制备 。简而言之,5 种实验饲料含有 5 种铁
[9]
铁可显著提升银大麻哈鱼 (Oncorhynchus kisutch) 源,包括七水合硫酸亚铁 (FeSO ·7H O)(纯度≥
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肌纤维直径,降低肌肉甘油三酯含量并改善肉 99%,上海国药股份有限公司)、甘氨酸亚铁
[4]
品质。Guo 等 对比试验显示,富马酸亚铁在 (Fe-Gly)、四水合氯化亚铁 (FeCl ·4H O) 和柠檬
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增强草鱼 (Ctenopharyngodon idella) 肠道免疫功 酸铁 (Fe-CA)(纯度≥98%,上海麦克林生化科
能方面显著优于硫酸亚铁。Song 等 [10] 研究指出, 技有限公司)、氧化铁纳米颗粒 (Fe O NPs)(≤
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甘氨酸亚铁较硫酸亚铁更有利于促进中华绒螯 50 nm,纯度≥98%,上海阿拉丁生化科技有限
蟹 (Eriocheir sinensis) 铁代谢相关基因表达,提 公 司 )。 将 这 5 种 铁 源 分 别 以 0.174、 0.123、
[11]
升生长性能与抗氧化能力。Elabd 等 发现纳米 0.129、0.151 和 0.101 g/kg 的水平添加到黄颡鱼
氧 化 铁 能 显 著 提 高 尼 罗 罗 非 鱼 (Oreochromis 饲料中。电感耦合等离子体发射质谱仪 (ICP-
OES)(Optima 8000 DV, PerkinElmer, 美 国 ) 的
niloticus) 生长速率、血液参数及免疫相关基因
表达水平。综合现有研究可见,不同铁源在生 分 析 表 明 , 5 种 饲 料 的 铁 含 量 分 别 为 56.26、
物利用度、稳定性以及经济可行性等关键指标 53.47、54.33、56.21 和 53.75 mg/kg。饲料配方
上表现各异,因此有必要对常见铁源进行系统 如附表 1。
黄颡鱼幼鱼购自武汉当地养殖场,其饲养
研究,以筛选出最适合水产动物饲料需求的铁
管理依照 Xu 等 研究进行。简单地说,实验开
[1]
源。鱼类作为人类优质动物蛋白的关键供给源,
始前先进行 2 周暂养驯化,后将 375 尾大小均
其肌肉组织是主要的营养储存器官 。从发育
[12]
匀的黄颡鱼幼鱼 [ 初始平均体重 (2.50±0.01) g]
生物学视角看,鱼类肌肉生长主要通过肌纤维
随机平均饲养在 15 个 300 L 圆形缸中放养,每
的增殖和肥大实现,此过程受多种因子的共同
缸 25 尾。每种实验饲料投喂 3 个重复缸,每缸
调控,包括配对盒蛋白 7(Pax7)、肌细胞增强子
每天投喂至饱食 2 次。实验鱼经 10 周饲养后,
结合因子 2(MEF2)、肌肉生长抑制素 (Mstn) 和
采用 MS-222 麻醉处理。按实验设计分别采集
生肌调节因子 (Mrfs) 等 [13-14] 。据报道,通过调
样本:①随机选取 6 尾/缸迅速采集背部轴上肌,
节饲料原料的比例或添加微量营养素,可以针
置于 RNA 冻存管经液氮速冻后转存–80 °C 超低
对性地调控鱼类肌纤维发育及常规营养组成 [9, 15] 。
作为核心微量元素,铁的缺乏或过量都已被证 温冰箱,用于基因表达分析;②另随机取 10 尾
/缸同法采集并保存肌肉样本用于氧化应激相关
实会影响肌肉的生长发育 [16-17] 。同时,氧化应
酶活力检测;③另随机取 6 尾/缸同法采集并保
激作为诱发肉质劣化的主要非微生物因子,与
存肌肉样本,供肌肉铁含量测定及常规营养成
铁代谢紊乱引发的 Fenton 反应密切相关 [1, 18] 。
分分析;④另随机 3 尾/缸取背部轴上肌经 4%
因此,评估不同铁源对肌肉组织发育及抗氧化
多聚甲醛固定后用于组织学观察。实验期间缸
能力的影响具有重要研究价值。
内水温为 28.0~30.4 °C,pH 7.80~7.94,溶解氧
黄颡鱼 (Pelteobagrus fulvidraco) 因肉质细
为 6.23~6.52 mg/L,总氨氮≤0.08 mg/L。
嫩、营养丰富且无肌间刺而备受市场青睐 [19] 。
目前已有研究表明,优化饲料配方可以提高黄 1.2 样品分析
颡鱼的肌肉发育、抗氧化能力和生长性能 [12, 19-20] 。 肌肉常规成分及铁含量分析 水分、粗
因此,本实验以黄颡鱼为研究对象,从肌肉常 脂肪、粗蛋白和灰分分析遵循 AOAC 标准方
规成分、形态学切片、抗氧化酶活性和基因表 法 [21] 。水分采用 105 °C 烘干法测定,灰分经
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