Page 168 - 《水产学报》2025年第10期
P. 168
姜晓东,等 水产学报, 2025, 49(10): 109612
表 2 实验饲料近似组成及类胡萝卜素含量
Tab. 2 Proximate composition and actual carotenoid concentration of experimental diets %
指标
Diet 1 Diet 2 Diet 3 Diet 4 Diet 5 Diet 6
index
近似组成 proximate composition
水分 moisture 8.78±0.05 8.89±0.07 9.03±0.07 8.77±0.02 8.54±0.07 8.75±0.08
粗蛋白 crude protein 40.51±0.05 40.39±0.82 40.47±0.37 40.50±0.17 40.10±0.92 41.00±0.35
粗脂肪 crude lipid 12.05±0.31 12.04±0.04 12.46±0.06 12.28±0.01 12.49±0.27 12.15±0.13
灰分 ash 9.44±0.04 9.46±0.05 9.27±0.04 10.38±0.10 10.46±0.15 10.43±0.02
类胡萝卜素组成 carotenoid composition
总类胡萝卜素 total carotenoid 10.11±1.27 117.43±15.42 121.59±8.99 119.64±11.55 116.17±8.96 115.45±10.24
虾青素 Axn 0.36±0.03 99.73±17.08 0.35±0.03 1.85±0.51 6.93±0.59 4.95±0.46
β-胡萝卜素 β-car 3.26±0.73 1.68±0.38 96.88±3.82 1.28±0.39 1.45±0.29 2.47±0.51
角黄素 Cxn - - - 94.65±4.25 - 3.57±0.68
叶黄素 Lut 2.29±0.15 2.28±0.32 2.38±0.25 2.58±0.26 85.69±5.42 13.08±1.85
玉米黄素 Zxn - - - - 8.16±1.34 73.93±17.31
注:“-”表示未检测到相应类胡萝卜素,下同。
Notes: “-” indicates the carotenoid was not detected, the same below.
血淋巴放至 2 mL 离心管中,随后−80 °C 冷冻 来自每只中华绒螯蟹的约 0.1 g 肝胰腺样品,并
保存。解剖每只实验蟹获得卵巢、肝胰腺和肌 按 1∶5 (质量体积比) 的比例添加到预冷的生理
肉并称重,将每只实验蟹的头胸甲、肌肉、肝 盐水中,然后在 2 mL 离心管中使用 IKA 匀浆
胰腺和卵巢分别于−40 °C 保存,以便后续进行 器进行匀浆。将匀浆液在 4 °C 和 10 000 r/min
常规生化分析。选用育肥 35 d 样品用于各组织 条件下离心 10 min,取上清液于−40 °C 保存。
中抗氧化及免疫指标的测定,并选用育肥 70 d 使用分光光度计和相应的实验试剂盒(南京建成
的样品用于组织中类胡萝卜素组成及常规生化 生物工程研究所) 测定中华绒螯蟹肝胰腺和血淋
组成的测定。用以下公式计算中华绒螯蟹增重 巴中的超氧化物歧化酶 (SOD)、总抗氧化剂能
率 (WGR)、性腺指数 (GSI)、肝胰腺指数 (HSI) 力 (T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)、γ-
及存活率 (SR)。 谷氨酰转肽酶 (γ-GT)、丙二醛 (MDA)、碱性磷
酸酶 (AKP)、酸性磷酸酶 (ACP)、谷氨酸草酰
WGR(%) = (W t −W 0 )/W 0 ×100%;
乙 酸 转 氨 酶 (GOT) 和 谷 氨 酸 丙 酮 酸 转 氨 酶
GSI(%) =W G /W×100%; (GPT) 水平。参考 Nickerson 等 [17] 的方法测定血
清中血蓝蛋白 (Hc) 含量,即用 Tris-Ca 缓冲液
HSI(%) =W H /W×100%;
(50 mmol/L Tris-HCl+10 mmol/L CaCl ,pH=8.0)
2
SR(%) =N t /N 0 ×100%; 将血清稀释 70 倍后,在 335 nm 波长下比色测
定 (OD) 值,并根据以下公式计算 Hc含量:
式中,W 和 t W 分别为实验蟹终末体重和初始
0
体重 (g);W W 和 W 分别为性腺重、肝胰腺 Hc含量(mg/mL) = 3.717×OD ×稀释倍数
H
G、
335 nm
重和对应的中华绒螯蟹重量 (g);N 和 t N 分别
0
1.5 常规生化、色泽及类胡萝卜素组成测定
为终末实验蟹数量和初始实验蟹数量。
根据 AOAC 的方法测定实验饲料的水分、
1.4 抗氧化及非特异性指标测定
粗蛋白和灰分含量 [18] 。根据 Folch 等 [19] 的方法
使用微型匀浆器 (德国 IKA 公司) 将解冻后 用氯仿-甲醇 (2∶1,体积比) 提取总脂。在提取
的血淋巴样品匀浆,随后将匀浆液在 10 000 组织中总类胡萝卜素之前,将每只蟹的卵巢、
r/min 和 4 °C 条件下离心 20 min,收集离心后上 肝胰腺和头胸甲分别冷冻干燥并研磨,随后将
清液并保存于−40 °C 冰箱以备后续使用。称重 每个平行中实验蟹组织均匀混合,作为一个重
https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
4