Page 156 - 《水产学报》2025年第10期

谭海月，等 水产学报, 2025, 49(10): 109611

1.2 生长试验 (WGR)、饲料效率 (FER)、摄食率 (FIR)、存活
从广东佛山梁氏水产种业有限公司购入 率 (SR)、脏体系数 (VSI)、肝体系数 (HSI) 和肠
脂系数 (IPF) 进行分析:
“鼎鳜一号”全雌翘嘴鳜幼鱼，该鱼通过激素诱
[17]
导的性控技术实现全雌化选育 。将试验鱼进 特定生长率 (specific growth rate, SGR, %/d)=
行消毒处理后，转移至西南大学水产动物营养 100 × (ln 终末体重 − ln 初始体重)/试验天数
与饲料研究室鱼类暂养系统 (3 000 L) 中饲养 增重率 (weight gain ratio, WGR, %) = 100 ×
2 周，期间每天投喂 2 次商业饲料直至表观饱 (终末体重 − 初始体重)/初始体重
食。暂养结束后在循环水养殖系统中开展养殖 饲 料 效 率 (feed efficiency ratio, FER,%) =
试验，该系统含 20 个矩形水族缸 (200 L)。选 (终末体重 − 初始体重)/摄食量
取初始规格为 (37.8±1.2) g 的鳜幼鱼，随机分为 摄食率 (feeding ratio, FR, %) = 100 × 摄食量/
5 个处理组，每个组设置 4 个平行，每缸分配 (终末体重 − 初始体重)/试验天数
12 尾。养殖试验期间，采用饱食投喂方式，每 存活率 (survival rate, SR, %) = 实验鱼终末
天投喂 2 次 (9：00 和 17：00)，记录每日摄食 尾数 /初始尾数 × 100%；
量并检查试验鱼的存活与健康状况。 脏体系数 (visceromatic index, VSI, %) = 100 ×
试验在自然光照周期 (12 h∶12 h) 条件下 内脏重量/体重
进行，试验期间每周清洗养殖系统及过滤材料 肝 体 系 数 (hepatosomatic index, HSI, %) =
(海绵、砂砾) 一次。水质参数每周监测 2 次， 100×肝脏重量/体重
各项水质指标的波动范围为：水温 18~23 °C， 肠脂系数 (intraperitoneal fat ratio, IPF, %) =
溶解氧 10~11 mg/L，氨氮低于 0.1 mg/L，亚硝 100 × 肠系膜脂肪重量/体重
酸盐 0.05~0.15 mg/L，pH 值 8.0~8.3。 按照 AOAC [18] 所述方法分析饲料、全鱼和

组织样品的水分、蛋白质、脂质和灰分含量。
1.3 取样
采用 α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶水解法测定饲料
养殖试验结束后，将实验鱼禁食 24 h，以
中的淀粉含量 。
[19]
缸为单位对实验鱼进行称重和计数，以便评估
甘油三酯 (TG)、胆固醇 (TC)、蛋白质 (TP)、
生长性能和存活率。复投喂 3 d 后，每缸随机
谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)、总抗氧
选取 9 尾鳜，立即用 MS-222(上海 Sigma，剂量
化能力 (T-AOC)、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙
约 75 mg/L) 将其麻醉。其中，2 尾实验鱼用于
二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH) 和谷胱甘肽过氧
分析全鱼的常规营养组成；2 尾用于解剖获取
化酶 (GPX) 等指标均采用南京建成生物工程研
肝脏样品并立即放入液氮速冻，以测定糖代谢
究所提供的商业试剂盒进行测定。
相关基因的相对表达量；剩余 5 尾用无菌注射
将肝组织在 4% 多聚甲醛溶液中固定 48 h
器从尾静脉采血，立即用罗氏血糖仪测定血糖
后，送样至武汉赛维尔生物科技有限公司进行
浓度。其余血样在 4°C 下静置 12 h 后，在 4°C 条
脱水、包埋、苏木精-伊红 (H.E) 染色和封片，
件下以 4 500×g 离心 15 min，分装后放于−80°C
采用 WT-1000 显微系统对石蜡切片进行观察、
下储存，用于测定血清生化参数。采血后解剖
成像和拍照。
实验鱼分离内脏团 (含性腺)，称重并计算脏体
采用 TaKaRa 公司的 RNAiso Plus 试剂提取
系数。然后，从内脏团中分离肝脏和肠系膜脂
肝组织总 RNA，用 NanoDrop-2000 超微量分光
肪，称重并计算肝体系数和肠脂系数。将采集
光度计检测其质量和浓度。采用 TaKaRa公司
的肝脏样品一部分立即放入液氮速冻，以便测
的 PrimeScript RT Master Mix Perfect Real Time
定抗氧化性能相关指标；一部分置于 4% 多聚
Kit 进行 DNase I(RNase-free) 处理和 cDNA 制备。
甲醛溶液中固定，用于切片制备；剩余肝脏样
从 NCBI 数据库中分离目标基因序列，使用
品用于常规营养组成分析。

Primer Premier 6 (Premier Biosoft Int，美国) 进行
1.4 指标测定 引物设计 (表 2)。在 ABI-7500 快速实时 PCR 系
采 用 下 式 对 特 定 生 长 率 (SGR)、 增 重 率 统 (Applied Biosystems, USA) 中进行荧光定量
中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries https://www.china-fishery.cn
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