Page 182 - 《水产学报》2025年第8期
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曹磊,等                                                                  水产学报, 2025, 49(8): 089416

              于  30°C  接合。在含有相应抗生素的              LB  平板上       1.4    蛋白免疫印迹     (Western blot) 实验
              划线筛选单交换接合子。随后,在含                    12%  蔗糖          收集感染后的细胞于含             1% PMSF (碧云天
              的  LB  培养基上,通过菌落           PCR  和测序确定双           生 物 技 术 ) 的 细 胞 裂 解 液  (Thermo Fisher Sci-
              交换后的杀鱼爱德华氏菌突变株。                                  entific,美国) 中裂解     30 min。然后将裂解液制


                                                  表 2    本实验中使用的引物
                                             Tab. 2    Primers used in the experiment
                  引物名称            引物序列 (5'- 3')     产物大小/bp     引物名称             引物序列 (5'- 3')     产物大小/bp
                 primer name     primer sequence (5'-3')  product size  primer name  primer sequence (5'-3')  product size
                 eseJ-F    CGCTGTTTTGACCTCCATAGAAGATA  4 277  qSTAT1-F     GTCATCCCGCAGAGAGAACG       124
                           TGGTGAATGCTTTTACGTTATCCCCC
                 eseJ-R    GGCCGCGGATCCGATTTAAATTCG           qSTAT1-R     ACCACTGTGACATCCTTGGG
                           ACTATATCGCCGCCGCCTCAT
                 Putt-F    CGGGCATGAGGCGGCGGCGATATAG   2 568  qSTAT6-F     GGAAGGCTTCAGCATCGAGT       151
                           TCGAATTTAAATCGGATCCGCGGC
                 Putt-R    GGGATAACGTAAAAGCATTCACCA           qSTAT6-R     CACCAGGCTTTCACACCTCT
                           TATCTTCTATGGAGGTCAAAACAG
                           CGT
                 pdm4-F    CAGCCAGGATACCATCGAGTAGCT    7 352  cmtDNA-16S-F  CGTCTATGTGGCAAAATAGTGAGAA  165
                           CTCCCGGGAATTCCAC
                 pdm4-R    CATCAGCTGAGCGCGATCCATCGAC          cmtDNA-16S-R  CCAGCTATCACCAAGCTCGTT
                           GGTATCGATAAGCTTGATATACACT
                 eseJ-HA-F  GTGGAATTCCCGGGAGAGCTATCC   4 294  cmtDNA-ND4-F  CACATGGCCTCACATCATCAC     122
                           TGGCTGATGCCTGAGC
                 eseJ-HA-R  TCCGATTTAAATTCGAATTCCTAAG         cmtDNA-ND4-R  GTGGATCCGTTCGTAGTTGGA
                           CGTAATCTGGAACATCGTATGGGT
                           AAGCGTAATCTGGAACATCGTATG
                           GGTATATCGCCGCCGCCTCAT
                 Glms-F    ACGATGTTCCAGATTACGCTTAGC   1 802   nucDNA-PMP22-F  TTCGTCAGTCCCACAGTTTTCTC  68
                           GCGCTGGGGATCGA
                 Glms-R    AAGCTTATCGATACCGTCGATGGA           nucDNA-PMP22-R ACTCGCTAGTCCCAAGGGTCTA
                           TCGCGCTCAGCTGATG
                 qPPAR-F   GTGAGACCAACAGCCTGACG         88    pUT18-y-F    TGTGGAATTGTGAGCGGATA      1 569
                 qPPAR-R   CTGTGTCAACCATGGTAATTTCAGT          pUT18-y-R    CGAGCGATTTTCCACAACAA
                 qβactin-F  CCTAGGCACCAGGGTGTGAT        164   eseJ-A-F     ATGGTGAATGCTTTTACGTTATC   1 304
                                                                           CCC
                 qβactin-R  CGGTTGGCCTTAGGGTTCAG              eseJ-A-R     CTAGGTTTCCTGCGCCTGCTGAT
                 qIL-1β-F  TGCAGTGGTTCGAGGCCTAA         75    pUT18-A-F    AGCAGGCGCAGGAAACCTAGGG    2 865
                                                                           GTACCGAGCTCGAATTCA
                 qIL-1β-R  ACAGGTCATTCTCATCACTGTCAA           pUT18-A-R    AACGTAAAAGCATTCACCATTCT
                                                                           AGAGTCGACCTGCAGG
                 qIL-6-F   CAACGATGATGCACTTGCAGA        122   eseJ-B-F     ATGCTACGACGCGATCTGGATGAGA  1 379
                 qIL-6-R   TGTGACTCCAGCTTATCTCTTGG            eseJ-B-R     CTAATGAAACATATCGCCGAGGAGC
                 qTNFα-F   CCCTCACACTCACAAACCAC         96    pUT18-B-F    GCTCCTCGGCGATATGTTTCATT   2 903
                                                                           AGGGGTACCGAGCTCGAATTCA
                 qTNFα-R   ATAGCAAATCGGCTGACGGT               pUT18-B-R    TCTCATCCAGATCGCGTCGTAGC
                                                                           ATTCTAGAGTCGACCTGCAGG
                 qIL-10-F  GGTTGCCAAGCCTTATCGGA         73    eseJ-C-F     ATGACGGCCTGGCAGCGGGGGA    1 359
                 qIL-10-R  GACACCTTGGTCTTGGAGCTTAT            eseJ-C-R     CTATATCGCCGCCGCCTCATGCC
                                                                           CG
                 qIL-12-F  TGGAATGGCGTCTCTGTCTG         122   pUT18-C-F    CGGGCATGAGGCGGCGGCGATAT   2 879
                                                                           AGGGGTACCGAGCTCGAATTCA
                 qIL-12-R  GCGGGTCTGGTTTGATGATGT              pUT18-C-R    TCCCCCGCTGCCAGGCCGTCATT
                                                                           CTAGAGTCGACCTGCAGG
                 qCCL2-F   GGCTCAGCCAGATGCAGTT          187   pKT25-y-F    TCGCCATTATGCCGCATC         509
                 qCCL2-R   TGCTGCTGGTGATCCTCTTG               pKT25-y-R    ATGTGCTGCAAGGCGATT
                 qCXCL10-F  CCACGTGTTGAGATCATTGCC       99
                 qCXCL10-R  GAGGCTCTCTGCTGTCCATC


              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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