Page 114 - 《中国医疗器械杂志》2025年第6期

Chinese Journal of Medical Instrumentation 2025年 第49卷 第6期

监 管 与 测 试

3.2 稀释法方法学研究 3.2.3 重复性
3.2.1 专属性 按照2.2.1节方法平行制备6份供试品溶液，按
按照2.2.1节方法制备对照品溶液、供试品溶液 照2.1.4节的色谱条件进样各10 μL检测，记录色谱
和空白溶液，分别取胶原蛋白浓度1.0 mg/mL的对 图。结果如表3所示，样品的相对标准偏差（RSD）
照品溶液、供试品溶液和空白溶液各10 μL注入液 值为1.69%。

相色谱仪，记录色谱图（见图7）。结果：对照品 表3 重复性结果
溶液和供试品溶液在RT=21.5 min处有相同的色谱 Tab.3 Repeatability results
样品 峰面积 浓度/（mg/mL） RSD（%）
峰，空白溶液在该保留时间无相同的色谱峰，且无
1 2 180.285 1.00
相邻峰。 2 2 167.180 0.99

DAD1A 3 2 249.140 1.03
蛋白1.0|2023-10-12 11-12-05 (GMT +08-00) 20231011-研究院03-8.amx1.0蛋白1.0.dx 1.69
空白稀释3-10|2023-10-12 12-14-47 (GMT +08-00) 20231011-研究院03-8.amx1.0空白酶解-r002.dx 4 2 190.755 1.00
0801稀释3-10|2023-10-12 13-17-28 (GMT +08-00) 20231011-研究院03-8.amx1.0稀释3-10-r002.dx
5 2 131.100 0.98
6 2 179.020 1.00

响应 3.2.4 精密度
取2.2.1节供试品溶液，按照2.1.4节的色谱条件
连续进样6针，各10 μL检测，记录色谱图。结果如
保留时间
表4所示，连续进样6次，RSD值为2.00%。
图7 专属性色谱图
Fig.7 Specific chromatogram 表4 精密度结果

Tab.4 Precision results
3.2.2 标准曲线
样品 峰面积 浓度/（mg/mL） RSD（%）
按照2.2.1节方法制备系列对照品溶液，浓度分
1-1 2 095.01 0.96
别为0.1、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mg/mL。按照
1-2 2 115.60 0.97
2.1.4节的色谱条件进样各10 μL进行检测，记录色
1-3 2 082.41 0.96
谱图。以对照品溶液浓度（mg/mL）为横坐标，以 1-4 2 160.44 0.99 2.00
峰面积（A）为纵坐标绘制标准曲线（见表2）。 1-5 2 196.89 1.01
2
线性方程为y= 9114.5x−98.666，R =0.999 4（见图8）， 1-6 2 163.68 0.99
在0.1~1.2 mg/mL浓度范围内线性关系良好。
3.2.5 回收率
表2 稀释法标准曲线结果
Tab.2 Standard curve results of dilution method 取9份供试品溶液 ，精密称定，分为3组，
浓度/（mg/mL） 峰面积 每 组 各 加 入 胶 原 蛋 白 （ 浓 度 为 4 mg/mL） 0.5、
0.1 838.440 0.625、0.75 mL，按照2.2.1节稀释方法制备样品，
0.4 3 426.600 按照2.1.4节的色谱条件进样各10 μL检测，记录色
0.6 5 422.630 谱图。结果如表5所示，平均回收率在90.91%~
0.8 7 322.520 94.14%之间。

1.0 8 939.870 表5 准确度结果
Tab.5 Accuracy results
1.2 10 827.375
供试品 原样品 回收率 平均回收率
加标后峰面积
样品 峰面积 （ %） （ %）

12 000 y=9 114.5x−98.666 3 777.12 87.45
2
10 000 R =0.999 4 浓度 3 864.48 92.25 91.55
1（80%）
8 000
3 913.59 94.94
6 000
4 297.60 92.81
4 000 浓度 2 182.91 4 232.66 89.96 90.91
2（100%）
2 000
4 233.09 89.97
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 4 665.77 90.80
浓度
图8 稀释法标准曲线图 3（120%） 4 743.38 93.64 94.14
Fig.8 Standard curve of dilution method 4 862.05 97.98
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