Page 106 - 《中国医疗器械杂志》2025年第6期

Chinese Journal of Medical Instrumentation 2025年 第49卷 第6期

监 管 与 测 试

才是有效交联，参与有效交联的BDDE的数量与透 行为，将产品植入实验动物体内，在不同时间点
明质酸钠二糖单元数量的比值即为交联度。通过磁 处死动物，观察植入部位的变化以及产品降解情
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共振波谱可以较好地区分凝胶网络中的BDDE的三 况。张素文等 的研究表明，透明质酸钠凝胶植入
种形式，进而得到凝胶的交联度数据。笔者采用该 家兔体内之后，随着时间的延长，凝胶颗粒逐渐变
方法测试了市面上常见的透明质酸钠凝胶样品，样 小，最初植入时粒径约为400 μm，26周时粒径约为
品的交联度为0.31%~2.37%。不同产品的预期用 200 μm，植入52周后，粒径仅为10~30 μm，说明
途、目标人群不同，因此厂家在设计产品时，会相 随着时间推移凝胶逐渐降解。冉维志等 研究了不
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应调整交联剂的使用量，使得最终产品的交联度产 同分子量的交联透明质酸钠凝胶的体内降解性能，
生了不同。 结果表明，分子量越低的产品，其降解速率越快，
与YY/T 0962—2021中通过溶胀度来表征交联 反之则降解速率慢。以上研究表明，不同种类的产
度的方法相比，磁共振波谱法直接测试交联度的 品，其体内降解性能也不尽相同，在设计降解性能
方法排除了人为操作的误差，使得结果更加稳定、 试验方案时，需结合产品确定降解时间点。
可靠。 3.2.3 胶原蛋白含量
3.2.2 降解性能 胶原蛋白含量的测试方法主要可分为两类：一
现阶段，整形用注射填充物所采用的原材料几 是直接测试胶原蛋白的含量，二是通过测定胶原蛋
乎为可降解材料，降解周期可能短则数月，长则 白降解后的特定氨基酸（如羟脯氨酸）的含量并换
1~2年，因此其降解性能的评价具有必要性。降解 算后得到胶原蛋白的含量。
性能的评价可分为两种，分别为体内降解性能评价 胶原蛋白可与天狼星红特异性结合，经氢氧化
及体外降解性能评价。其中体内降解性能评价更能 钠洗脱后生成红色复合物，该复合物在540 nm波长
反映产品的真实降解过程，但体内降解一般持续时 处有特异性吸收，吸光度与胶原蛋白的含量呈正相
间较长，这就导致评价周期较长。因此，《透明质 关，因此可以利用该特异性结合直接测定样品中胶
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酸钠类面部注射填充材料注册技术审查指导原则》 原蛋白的含量。该方法由JUNQUEIRA等 于1979年
[44]
规定在研究资料中提供体内降解的相关资料，即 首次报道，并由刘秉慈等 于1993年进行改进，将
产品在提交注册时需开展体内降解性能评价。体外 天狼星红的浓度由50 μmol/L提高至100 μmol/L。改
降解实验一般采用加速降解的形式，因此评价周期 进后的方法灵敏度高、重复性好、线性范围宽，更
较短，适宜作为产品质量控制手段，上述指导原则 加适用于胶原蛋白含量的准确定量 [44-45] 。此后，经
中也规定产品技术要求中应有体外降解性能的相关 过数十年的不断改进，该方法现已被YY/T 0954—
指标。 2015《无源外科植入物 I型胶原蛋白植入剂》收录
体外降解性能评价采用加速降解的形式开展， 为胶原蛋白含量测试的标准方法。此外，凯氏定氮
根据产品原材料的不同，采用相应的酶针对性地降 法作为一种通用测定蛋白质含量的方法也可以直接
解产品，得到产品随时间降解的趋势。对于透明质 测试胶原蛋白的含量，但测试过程中需注意非蛋白
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酸钠凝胶，可选用透明质酸酶 [39-40] ，在37 ℃、适宜 氮的去除。吴倩倩等 采用凯氏定氮法测试了样品
的pH值等条件下逐渐降解产品，通过检测不同时 中重组胶原蛋白的含量，结果表明该方法精密度良
间点生成的降解产物（葡萄糖醛酸）的含量，得到 好，准确度高，适用于重组胶原蛋白含量的测试。
产品的降解趋势。对于胶原蛋白类产品，则可选用 但需特别注意的是，由于凯氏定氮法自身的局限
胶原酶实现对产品的降解，因其最终降解产物为氨 性，采用该方法测定胶原蛋白含量时，样品用量一
基酸，所以通过检测氨基酸的含量得到降解趋势。 般较大。
需要注意的是，体外降解性能评价的最终目的是得 羟脯氨酸是胶原蛋白中含有的特异性氨基酸，
到产品的降解趋势，因此降解时间要控制在合理范 且含量较为稳定。胶原蛋白在110 ℃条件下，会被
围内，不宜太长或太短，降解时间太长则不能体现 6 mol/L盐酸水解成氨基酸，这时可通过测试水
加速降解的意义，降解时间太短则不能得到降解趋 解液中羟脯氨酸的含量，计算得到胶原蛋白的含
势。这就要求评价过程中要合理控制关键实验条 量 。查阅文献可知，羟脯氨酸含量的测试方法
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件，例如酶的活性浓度，这样才能得到降解趋势。 主要有比色法、高效液相色谱法、高效液相色谱串
体内降解性能评价更能模拟真实的产品降解 联质谱法、氨基酸分析仪法等。高效液相色谱法不

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