Page 54 - 《中国药科大学学报》2026年第1期

48 学报 Journal of China Pharmaceutical University 2026, 57(1): 46 − 53 第 57 卷

Table 1 Information on the collection place of 18 batches of Marsdenia tenacissimae
No. Habitat Acquisition time No. Habitat Acquisition time
S1 Dechang, Sichuan Nov., 2024 S10 Jinghong, Yunnan Oct., 2024
S2 Xichang, Sichuan Oct., 2024 S11 Mengla, Yunnan Nov., 2024
S3 Ningnan, Sichuan Oct., 2024 S12 Anlong, Guizhou Nov., 2024
S4 Napo, Guangxi Nov., 2024 S13 Xingren, Guizhou Nov., 2024
S5 Longlin, Guangxi Nov., 2024 S14 Laifeng, Hubei Nov., 2024
S6 Jingxi, Guangxi Nov., 2024 S15 Xuansi, Hubei Nov., 2024
S7 Tiandong, Guangxi Nov., 2024 S16 Jianshi, Hubei Oct., 2024
S8 Ning’er, Yunnan Oct., 2024 S17 Shizhu, Chongqing Oct., 2024
S9 Jingdong, Yunnan Oct., 2024 S18 Pengshui, Chongqing Oct., 2024

2 方法与结果 用 70% 甲醇溶解制成质量浓度分别为 0.754、1.714
和 1.238 mg/mL 的对照品贮备液Ⅱ；精密称取通关
2.1 色谱条件
藤苷 A 和通关藤苷 I 对照品，用 70% 甲醇溶解制成
色谱柱：Century SIL 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，
质量浓度分别为 2.342 和 1.980 mg/mL 的对照品贮
大连江申公司）；乙腈（A）-0.2% 磷酸水溶液（B）为流
备液Ⅲ，精密吸取对照品贮备液Ⅰ 0.5 mL、对照品
动相梯度洗脱（0～10 min，15%A；10～22 min，15%
贮备液Ⅱ 1.0 mL、对照品贮备液Ⅲ 2.0 mL，置 20
→42%A；22～43 min，42%→54%A；43～56 min，54%
mL 量瓶中，用 70% 甲醇定容，即得（绿原酸、隐绿原
→72%A；56～65 min，72%→15%A）；波长切换法： 酸、芥子酸、通关藤苷 A、通关藤苷 G、通关藤苷 I、
0～22 min 在 327 nm 波长处检测原绿原酸、隐绿原 通关藤苷 H、苦绳苷元 A、白桦脂酸和羽扇豆醇对
酸和芥子酸，22～43 min 在 235 nm 波长处检测通 照品质量浓度分别为 37.70、16.80、7.95、234.20、
关藤苷 A、通关藤苷 G、通关藤苷 I、通关藤苷 H 和 85.70、198.00、61.90、14.75、3.40 和 11.30 μg/mL）。
苦绳苷元 A；43～65 min 在 210 nm 波长处检测白 2.2.2 供试品溶液 取粉碎的通关藤粉末约 0.5 g，
桦脂酸和羽扇豆醇；进样量 10 µL，柱温 30 ℃，流 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加 70% 甲醇
速 1.0 mL/min。 25 mL，称重，加热回流 45 min，放冷，称重，摇匀，
2.2 溶液制备 0.45 µm 滤膜过滤，即得。
2.2.1 对照品溶液 精密称取隐绿原酸、芥子酸、 2.3 方法学考察
苦 绳 苷 元 A、 白 桦 脂 酸 和 羽 扇 豆 醇 对 照 品 ， 用 2.3.1 系统适用性实验 取混合对照品溶液和供
70% 甲醇溶解制成质量浓度分别为 0.672、0.318、 试品溶液，按照建立的色谱条件进样分析。结果色
0.590、0.136 和 0.452 mg/mL 的对照品贮备液Ⅰ；精 谱图中指标成分与相邻成分间分离度均大于 1.5，
密称取绿原酸、通关藤苷 G 和通关藤苷 H 对照品， 理论板数按各成分计均大于 5 000（图 1）。

A 350 B 350

300 6 300 4
250 4 250 6
mAU 200 mAU 200
150
150
100 2 3 5 7 8 10 100 1 5 7
50 1 9 50 2 3 8 9 10
0 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
t/min t/min

Figure 1 HPLC chromatograms of mixed reference substance(A) and M. tenacissimae test sample(B)
1:Chlorogenic acid; 2:Cryptochlorogenic acid; 3: Sinapic acid; 4:Tenacigenoside A; 5:Tenacissoside G; 6:Tenacissoside I; 7:Tenacissoside H; 8:
Drevogenin A; 9:Betulinic acid; 10:Lupusol

2.3.2 线性及范围 精密量取对照品贮备液Ⅰ、 稀释至刻度，摇匀。按“2.1”项色谱条件进样分析，

Ⅱ、Ⅲ各适量，分别置 20 mL 量瓶中，加 70% 甲醇 以质量浓度（X）与峰面积（Y）绘制标准曲线，结果见