Page 64 - 《中国药科大学学报》2025年第5期
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596 学报 Journal of China Pharmaceutical University 2025, 56(5): 592 − 600 第 56 卷
β-gal 阳性细胞率约为 60%，DNA 损伤阳性细胞约 H O 诱导的两种衰老模型都有缓解作用，进一步聚
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为 80%，细胞中 p53 和 p21 蛋白水平上调 2~3 倍 焦到其作用的核心环节——ROS 调控。本研究分
（图 2）。豆蔻明处理后能显著缓解细胞衰老，尤其 别检测了博来霉素和 H O 诱导的衰老模型中细胞
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是高浓度豆蔻明（10 μmol/L），DNA 损伤阳性率甚 ROS 的水平，实验结果显示博来霉素和 H O 处理
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至只在高浓度豆蔻明的情况下有显著的缓解作用 后细胞中的 ROS 水平显著增加，均约为对照组的
（图 2-C，图 2-D）。实验结果表明，豆蔻明可显著缓 8 倍（图 3）。豆蔻明处理后 ROS 荧光强度显著下
解博来霉素诱导的 DNA 损伤型衰老和 H O 介导 调，在博来霉素和 H O 诱导条件下，分别下调至对
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的氧化应激型衰老，表现出广谱抗衰老活性。 照组相当的荧光强度和对照组 3 倍左右的荧光强
3.3 豆蔻明抑制肺成纤维细胞 ROS 产生 度（图 3）。尽管两种诱导剂通过不同通路触发衰
前面实验已经证明了豆蔻明对博来霉素和 老，但是都伴随着显著的 ROS 累积，且豆蔻明处理
A B B ****
****
SA-β-gal positive cell/% 100
H 2 O 2 (50 μmol/L) − + + + + ****
c(Cardamonin)/(μmol/L) − − 1 5 10 80 ****
60
SA-β-gal 40
50 μm 20
0
H 2 O 2 (50 μmol/L) − + + + +
c(Cardamonin)/(μmol/L) − − 1 5 10
C D
H 2 O 2 (50 μmol/L) − + + + +
c(Cardamonin)/(μmol/L) − − 1 5 10
****
100
γ-H2AX 80 ****
γ-H2AX + /all cells/% 60
DAPI 40
20
0
Merge H 2 O 2 (50 μmol/L) − + + + +
50 μm c(Cardamonin)/(μmol/L) − − 1 5 10
E F 2.5 *** G
H 2 O 2 (50 μmol/L) − + + **** 5 *
Cardamonin (10 μmol/L) − − + kD 2.0 4 **
p53 55 Relative p53 protein level 1.5 Relative p21 protein level 3
p21 1.0 2
15 0.5 1
β-actin 40 0 0
H 2 O 2 (50 μmol/L) − + + H 2 O 2 (50 μmol/L) − + +
Cardamonin (10 μmol/L) − − + Cardamonin (10 μmol/L) − − +
Figure 2 Cardamonin alleviates hydrogen peroxide (H 2 O 2 )-induced fibroblast senescence ( x ± s, n = 3)
A: Effects of cardamonin on the H 2 O 2 -induced senescence phenotype in primary lung fibroblasts (Representative images of SA-β-gal
staining); B: Quantitative analysis of SA-β-gal-positive cell rate; C: Effects of cardamonin on H 2 O 2 -induced γ-H2AX expression
(Representative immunofluorescence images); D: Statistical results of γ-H2AX-positive cells; E: Effects of cardamonin on H 2 O 2 -induced
senescence-associated proteins p53 and p21 expression; F: Statistical analysis of p53 protein expression; G: Statistical analysis of p21
protein expression
*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001, ****P<0.000 1
