Page 87 - 《中国药科大学学报》2025年第4期

第 56 卷第 4 期 於珈墨，等：胸腺五肽促进 T 细胞浸润抑制小鼠肝细胞癌皮下瘤生长的作用研究 483

直接抑制肝癌细胞的生长，其对肝癌的抑制作用可 CD11b Gr1 Ly6G 、CD11b Gr1 Ly6C 分别标记
+
+
+
+
+
+
能与免疫系统有关。 MDSCs、 PMN-MDSCs、 M-MDSCs（ 图 4-A） 。 如

3.3 TP5 促进肝癌小鼠肿瘤微环境中 T 淋巴细胞 图 4-B−4-D 所示，与对照组相比，TP5 组的 MDSCs
浸润 的比例显著下降，其中 PMN-MDSC 的水平显著下
肝癌微环境是由基质细胞、多种免疫细胞及其 降，M-MDSC 水平未发生显著变化。以上结果表明，
分泌的细胞因子、细胞外基质等构成的复杂网络。 TP5 能够抑制肿瘤微环境中多形核细胞 MDSCs
其中，T 细胞则是肿瘤微环境中最重要的一种细胞 的浸润，但是对单核细胞没有显著影响。

类型，是机体抗肿瘤的主要免疫细胞。本研究通过 3.5 TP5 不影响 MDSCs 效应分子表达
流式细胞术检测 TP5 对肿瘤微环境中 T 细胞、 为考察 TP5 对 MDSCs 的调控作用，分别检测
MDSCs 的影响。流式圈门策略如图 3-A 所示，在 ROS、IL-6 及 NO 的水平。实验结果显示，与对照
所有细胞中去除粘连体细胞，圈出单个细胞后 组比较，给药组 MDSCs 的 ROS 水平无显著差异。
（Single cells），通过 LIVE/DEAD Violet 染料圈出活 为进一步验证结论，对各组细胞采用 ELISA 法测定
细胞（Live cells），分析 CD45 阳性细胞比例（CD45 ）， 炎症因子 IL-6 的分泌，如图 5-B 所示，给药组中 IL-6
+
进一步在 CD45 阳性细胞中圈出 CD3 阳性比例 的分泌与对照组相比无显著变化（P > 0.05）。此外，
（CD3 ），最后从 CD3 中圈出 CD8 阳性（CD8 ）细胞 给药组中 NO 的分泌与对照组亦没有显著差异（P >
+
+
+
比例。统计结果显示，不同剂量的 TP5 均可以增加 0.05），表明 TP5 处理不影响 MDSCs 炎症因子的表
+
+
+
肿瘤微环境中 CD45 、CD3 、CD8 细胞的比例，其 达，即 TP5 不影响 MDSCs 的功能。

+
中，CD45 细胞及 CD8 T + 细胞具有剂量依赖效应 3.6 TP5 可能通过精氨酸抑制肝癌皮下瘤生长
（图 3-B−3-D），表明 TP5 促进肝癌小鼠肿瘤微环境 药代动力学研究表明，TP5 半衰期短，在体内
中 T 淋巴细胞浸润。 很快被蛋白酶和氨肽酶降解为 4 肽和 3 肽 。为进
[7]

3.4 TP5 抑制髓系来源的免疫抑制细胞 一步研究 TP5 抑制 Hepa1-6 皮下瘤生长的机制，分
MDSCs 是肿瘤微环境中的重要免疫抑制细 别使用 TP5 和缺乏精氨酸的 TP5 进行给药，如
胞，其占肿瘤微环境 10%~30%，其对 T 细胞活化至 图 6-A 和 6-B 所示，TP5 处理的肿瘤显著小于对照
[6]
关重要 。为考察 TP5 对 MDSCs 影响，本研究采 组的肿瘤，而缺乏精氨酸的 TP5 则没有抗肿瘤作
用流式细胞术测定肿瘤微环境中 MDSCs 的比例， 用。为验证结果，本研究进一步检测 TP5 和缺乏精
并进一步测定其中多形核细胞 PMN-MDSCs 和单 氨酸的 TP5 对 CD8 和 CD4 存活的影响。如图 6-C
+
核细胞 M-MDSCs 的表达水平，用 CD11b Gr1 、 和 6-D 所示，相比对照组，TP5 显著促进活化后
+

A Hepa1-6 B LM3 C Tumor weight
1.5 2 000 Control; 2.5
Blank; Sorafinib;
Control; TP5 (20 mg/kg) 2.0
TP5 (10 ng/ml); 1 500 *
1.0
OD 570 nm 0.5 TP5 (1000 ng/ml) Tumor volum/mm 3 1 000 *** Tumor weight/g 1.5
TP5 (100 ng/ml);
1.0
500

0
0 0 0.5
0 h 6 h 12 h 24 h 48 h 72 h 8 10 12 14 16 18 20 22
Sorafinib (30 mg/kg)
TP5 (20 mg/kg)
Days after tumor injection Control

Figure 2 Effects of TP5 on the proliferation of hepatocarcinoma cells
A: Proliferation of Hepa1-6 cells after different concentrations of TP5 treatment in indicated times; B: Tumor volume changes of LM3
tumors in each group of mice; C: Tumor weights in each group of mice at the experimental endpoint
*P < 0.05, ***P < 0.001 vs the control group