Page 44 - 《中国药科大学学报》2025年第4期

440 学报 Journal of China Pharmaceutical University 2025, 56(4): 432 − 443 第 56 卷

标，转录因子在成药性方面存在显著差异。它们通 另一丙二胺类化合物 D8-D 与 GANT61D 的活性
常缺乏直接的催化功能，且缺乏典型的、可配体化 相当。通过对该类化合物的构效关系研究，研究者
的活性位点或结合口袋，因此难以通过传统的小分 们发现 1,3-丙二胺基团是调控 GLI1 活性的关键
子占据驱动（occupancy-driven）策略（即结合并占据 基团 。基于此，本课题组设计了 GANT61D 衍生
[53]
特定功能位点）来直接调控其活性。基于此，利用 物 LLG-33（图 7）。对接结果显示，LLG-33 一侧的
蛋白水解靶向嵌合体（PROTACs）技术直接调控其 苯环伸向溶剂区，对其进行修饰可作为连接链的衍
细胞内蛋白质稳态水平，成为干预此类靶标的一种 生化位点。在此基础上，本课题组设计了多样性的
有效策略 。 连接链作为连接子，将疏水标签金刚烷与目的蛋白
[52]
目前，已被确证并广泛使用的 GLI1/GLI2 小分 配体相缀合，合成了一系列基于疏水标签的 GLI1
子抑制剂 GANT61 在水溶液中极不稳定，可快速水 小分子降解剂。研究表明，当连接链为聚乙二醇且
[41]
解为 1,3-丙二胺类化合物 GANT61D 。文献报道 n = 2 时，所得降解剂分子 V-5（图 7）效果最好，在单

N
N N N N
N N H H
H 2 O NH HN N N
N N GANT61D
O O
GANT61 GANT61D H H
IC 50 =5 μmol/L (Hh pathway) IC 50 =5 μmol/L (Hh pathway) N N
D8-D
衍生化位点

N O O
H H N O N
N N H H n H
N
N
LLG-33
V-5: n=2

DNA
K302
V-5 浓度梯度 HT-29, 24 h
DMSO 0.5 1 2.5 5 7.5 10 (μmol/L)
Q249
E298 160 kD Gli1
LLG-33 ZF3
E250 ZF2 1 0.9 0.9 0.9 0.8 0.4 0.2 Ratio
V253 GANT61D (Gli1/GAPDH)
36 kD
N257 GAPDH
H254 Gli1ZF-DNA
complex
GANT61, 72 h GANT61, 72 h
HT29 HepG2 HT29 HepG2
HT29 cell viability inhibition
100 100 Cpd IC 50 /(μmol/L)
Cell viability/% 50 Cell viability/% 50 GANT61 3.80±0.41

0.46±0.05
V-5
0 0
0 1 2.5 5 10 0 0.25 0.5 1 2.5 5
Concentration/(μmol/L) Concentration/(μmol/L)
图 7 疏水标签 (HyT) 降解剂 V-5 的设计思路