Page 82 - 《渔业研究》2025年第6期

第 6 期 刘子竞等： 基于适配体的纳米金比色法快速检测河豚毒素 773

原理如图 1 所示，制备好的 AuNPs 溶液为稳定的 而在高盐溶液中维持分散状态并保持红色；当体系
胶体状态，在高盐离子浓度环境中会发生聚沉，其 中存在 TTX 时，Apt 与 TTX 特异性结合，导致
颜色和吸收光谱图也随之变化，若体系中存在 AuNPs 保护层脱落，在高盐条件下发生聚集，溶
Apt，由于静电吸附作用，其会固定在 AuNPs 表面 液颜色由红色变蓝色。

氯化钠

NaCl

河豚毒素
氯化钠
TTX
NaCl

纳米金 AuNPs 适配体 Apt 河豚毒素 TTX
图 1 Apt-AuNPs 比色法检测 TTX 原理示意图
Fig. 1 Schematic illustration of the Apt-AuNPs based colorimetric assay for TTX detection

1.2.5 特异性分析 AuNPs 溶液体积进行优化。如图 4 所示，当 AuNPs
在最佳检测条件下，利用建立的方法分别检 体积占比为 38.9% 和 45.0% 时，溶液由酒红色变为
测 300 ng/mL 的 TTX、 大 田 软 海 绵 酸 （ Okadaic 蓝灰色，综合肉眼观察的最佳效果，确定 45.0%
acid， OA） 、 石 房 蛤 毒 素 （ Saxitoxin， STX） 和 为 AuNPs 最佳体积分数，即加入 90 μL 的 AuNPs
3 种毒素混合溶液，扫描并记录 A 620 /A 52 1 值。 溶液。
1.2.6 加标回收实验
0.7
在无毒鲈鱼肉中加入去离子水，充分研磨。随
0.6
后，加入 TTX 标准液与 1％乙酸溶液，分别配制出
浓度为 50、100、200 ng/mL 的研磨液。将加标样品 0.5
置于超声清洗器中，超声处理 10 min，接着放入热 吸光度 Absorbance 0.4
水中煮沸 10 min。取出后冷却至室温，放入离心机， 0.3
以 8 000 r/min 的转速离心 5 min。取上清液，调节 0.2
其 pH 值至 5，在最佳检测条件下，采用建立的 0.1
Apt-AuNPs 比色法测定 TTX 含量。
0
400 500 600 700 800
2 结果与讨论 波长/nm Wavelength

2.1 AuNPs 的表征 图 2 AuNPs 溶液的紫外吸收光谱图
制备好的 AuNPs 溶液呈鲜艳的酒红色胶体 Fig. 2 UV-Vis absorption spectrum of AuNPs solution

状，分散均匀，无沉淀。通过酶标仪对其进行
400~800 nm 的紫外表征，结果如图 2 所示，AuNPs
的最大吸收峰位于 521 nm 处，峰形单一且尖锐，
表明 AuNPs 的颗粒大小均匀，质量与性能良好。
AuNPs 在透射电子显微镜下的表征结果如图 3 所 200 nm 100 nm
示，其颗粒大小均一，呈圆球形，粒径约为 15 nm。
2.2 检测条件优化 图 3 AuNPs 的 TEM 图像
2.2.1 AuNPs 体积的优化 Fig. 3 TEM image of AuNPs
AuNPs 作为整个反应体系的颜色指示剂，为 2.2.2 NaCl 浓度的优化
实现更理想的颜色变化及肉眼观察效果，需对 AuNPs 在高盐环境下会发生聚沉现象。由图 5