Page 86 - 《渔业研究》2025年第6期
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第 6 期 刘子竞等: 基于适配体的纳米金比色法快速检测河豚毒素 777
standard deviation,RSD)为 0.85%~1.77%。上述 范围内,与其对应的 AuNPs 溶液的 A 620 /A 52 1 值呈
结果表明,此方法具有良好的准确性。 现良好的线性关系,线性相关系数 R =0.995 7,检
2
1.2 测限为 12.97 ng/mL。在加标回收实验中,TTX 的加
a a 标回收率为 104.2%~108.4%,RSD 为 0.85%~1.77%。
1.0
本研究仅在人工加标鲜鱼肉中验证方法的适用性,
0.8 b b 在真实河鲀样品中的检测效果需进一步研究。若能
A 620 /A 521 0.6 b 取得真实河鲀样品较好的检测效果,此方法有望
为 TTX 检测提供一种简便快捷、具备可视化特点
0.4
且准确性较高的检测手段。未来若结合便携的紫外
0.2
扫描设备,可能实现对 TTX 的现场快速筛查。
0
空白 Blank 大田软海绵酸 OA 石房蛤毒素 STX 河豚毒素 TTX 混合 Mixed 参考文献(References) :
[ 1 ]
Saoudi M, Messarah M, Boumendjel A, et al. Extracted
tetrodotoxin from puffer fish Lagocephalus lagoceph-
图 14 传感器特异性检测
alus induced hepatotoxicity and nephrotoxicity to Wistar
Fig. 14 Sensor-specific testing
rats[J]. African Journal of Biotechnology, 2011, 10(41):
表 1 鱼肉样品中的加标回收结果 8140 − 8145.
Tab. 1 Spike recovery results in fish samples [ 2 ] 王琦,樊莉,卢光照,等. 河豚毒素的药用研究进
检测浓度/ 展 [J]. 药 学 实 践 与 服 务 , 2023, 41( 5) : 273 −
样品 添加量/ (ng/mL) 回收率/% 相对标准
Sample (ng/mL) Detection Recovery 偏差/% 276,328.
Recruitment rate RSD
concentration
Wang Q, Fan L, Lu G Z, et al. Advances in medicinal re-
50 52.1 104.2 0.85
鲈鱼肉 100 116.0 116.0 0.20
Sea bass fillet search on tetrodotoxin[J]. Journal of Pharmaceutical
200 216.9 108.4 1.77
Practice and Service, 2023, 41(5): 273 − 276, 328.
3 结论 [ 3 ] Hanifin C T. The chemical and evolutionary ecology of
tetrodotoxin (TTX) toxicity in terrestrial vertebrates[J].
本研究基于 Apt 能够抑制 AuNPs 溶液在高盐
Marine Drugs, 2010, 8(3): 577 − 593.
离子环境下聚沉,进而避免胶体金波长红移、特征
[ 4 ] Matsumura K. A monoclonal antibody against tetrodo-
峰右移这一原理,成功建立了基于 Apt 的 TTX 比
toxin that reacts to the active group for the toxicity[J].
色检测法。通过一系列条件优化,证实了运用
European Journal of Pharmacology: Environmental Tox-
AuNPs 分光光度法检测样品中 TTX 的可行性。相
icology and Pharmacology, 1995, 293(1): 41 − 45.
较于其他检测方法,该方法具有操作简便、耗时较
[ 5 ] Alcaraz A, Whipple R E, Gregg H R, et al. Analysis of
短的显著优势。本研究采用柠檬酸钠还原法制备
AuNPs 溶液,并借助多功能酶标仪与 TEM 对颗粒 tetrodotoxin[J]. Forensic Science International, 1999,
性能进行表征。结果显示,所制备的 AuNPs 颗粒 99(1): 35 − 45.
大小均匀,粒径约为 15 nm。在此基础上,构建了 [ 6 ] 刘燕婷,雷红涛,钟青萍. 河豚毒素的研究进展 [J].
基于 Apt-AuNPs 比色传感器的可视化 TTX 检测方 食品研究与开发,2008,29(2) :156 − 160.
法。经过对实验条件的优化,确定的最佳实验参数 Liu Y T, Lei H T, Zhong Q P. Trend on the study of tetr-
如下:AuNPs 最佳体积分数 45%、NaCl 最佳浓度 odotoxin[J]. Food Research and Development, 2008,
300 mmol/L、NaCl 最佳反应时间 10 min、Apt 最 29(2): 156 − 160.
佳浓度 80 nmol/L、Apt 最佳孵育时间 25 min、TTX [ 7 ] Hagen N A, Cantin L, Constant J, et al. Tetrodotoxin for
与 Apt 最佳孵育时间 20 min、TTX 与 Apt 最佳孵 moderate to severe cancer-related pain: a multicentre,
育温度 10 ℃、TTX 与 Apt 最佳孵育 pH 值 5。在 randomized, double-blind, placebo-controlled, parallel-
优化后的实验条件下,利用建立的方法对 TTX 进 design trial[J]. Pain Research and Management, 2017,
行检测,结果表明,TTX 浓度在 19.53~312.5 ng/mL 2017(1): 7212713.

