Page 86 - 《渔业研究》2025年第6期
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第 6 期                  刘子竞等: 基于适配体的纳米金比色法快速检测河豚毒素                                      777

              standard deviation,RSD)为  0.85%~1.77%。上述         范围内,与其对应的          AuNPs 溶液的    A 620 /A 52 1  值呈
              结果表明,此方法具有良好的准确性。                                现良好的线性关系,线性相关系数                R =0.995 7,检
                                                                                               2

                     1.2                                       测限为   12.97 ng/mL。在加标回收实验中,TTX          的加
                                            a      a           标回收率为    104.2%~108.4%,RSD   为  0.85%~1.77%。
                     1.0
                                                               本研究仅在人工加标鲜鱼肉中验证方法的适用性,
                     0.8        b     b                        在真实河鲀样品中的检测效果需进一步研究。若能
                   A 620 /A 521  0.6  b                        取得真实河鲀样品较好的检测效果,此方法有望

                                                               为  TTX  检测提供一种简便快捷、具备可视化特点
                     0.4
                                                               且准确性较高的检测手段。未来若结合便携的紫外
                     0.2
                                                               扫描设备,可能实现对          TTX  的现场快速筛查。
                      0
                        空白 Blank 大田软海绵酸  OA 石房蛤毒素 STX  河豚毒素 TTX  混合 Mixed  参考文献(References) :

                                                              [  1  ]
                                                                     Saoudi M, Messarah M, Boumendjel A, et al. Extracted
                                                                    tetrodotoxin  from  puffer  fish  Lagocephalus  lagoceph-
                           图 14    传感器特异性检测
                                                                    alus induced hepatotoxicity and nephrotoxicity to Wistar
                        Fig. 14    Sensor-specific testing
                                                                    rats[J]. African Journal of Biotechnology, 2011, 10(41):

                        表 1    鱼肉样品中的加标回收结果                         8140 − 8145.
                   Tab. 1    Spike recovery results in fish samples  [  2  ]   王琦,樊莉,卢光照,等. 河豚毒素的药用研究进
                                 检测浓度/                              展  [J].  药 学 实 践 与 服 务 , 2023, 41( 5) : 273  −
                 样品      添加量/    (ng/mL)  回收率/%    相对标准
                Sample  (ng/mL)  Detection  Recovery  偏差/%          276,328.
                        Recruitment         rate     RSD
                                concentration
                                                                    Wang Q, Fan L, Lu G Z, et al. Advances in medicinal re-
                           50      52.1    104.2     0.85
                鲈鱼肉       100      116.0   116.0     0.20
              Sea bass fillet                                       search  on  tetrodotoxin[J].  Journal  of  Pharmaceutical
                          200      216.9   108.4     1.77

                                                                    Practice and Service, 2023, 41(5): 273 − 276, 328.
               3 结论                                           [  3  ]   Hanifin C T. The chemical and evolutionary ecology of
                                                                    tetrodotoxin (TTX) toxicity in terrestrial vertebrates[J].
                  本研究基于      Apt 能够抑制     AuNPs 溶液在高盐
                                                                    Marine Drugs, 2010, 8(3): 577 − 593.
              离子环境下聚沉,进而避免胶体金波长红移、特征
                                                              [  4  ]   Matsumura  K.  A monoclonal  antibody  against   tetrodo-
              峰右移这一原理,成功建立了基于                 Apt 的  TTX  比
                                                                    toxin that reacts to the active group for the toxicity[J].
              色检测法。通过一系列条件优化,证实了运用
                                                                    European Journal of Pharmacology: Environmental Tox-
              AuNPs 分光光度法检测样品中            TTX  的可行性。相
                                                                    icology and Pharmacology, 1995, 293(1): 41 − 45.
              较于其他检测方法,该方法具有操作简便、耗时较
                                                              [  5  ]   Alcaraz A, Whipple R E, Gregg H R, et al. Analysis of
              短的显著优势。本研究采用柠檬酸钠还原法制备
              AuNPs 溶液,并借助多功能酶标仪与               TEM  对颗粒            tetrodotoxin[J].  Forensic  Science  International,  1999,
              性能进行表征。结果显示,所制备的                  AuNPs 颗粒            99(1): 35 − 45.
              大小均匀,粒径约为          15 nm。在此基础上,构建了              [  6  ]   刘燕婷,雷红涛,钟青萍. 河豚毒素的研究进展          [J].
              基于   Apt-AuNPs 比色传感器的可视化          TTX  检测方            食品研究与开发,2008,29(2) :156 − 160.
              法。经过对实验条件的优化,确定的最佳实验参数                                Liu Y T, Lei H T, Zhong Q P. Trend on the study of tetr-
              如下:AuNPs 最佳体积分数           45%、NaCl 最佳浓度               odotoxin[J].  Food  Research  and  Development,  2008,
              300 mmol/L、NaCl 最佳反应时间         10 min、Apt 最           29(2): 156 − 160.
              佳浓度    80 nmol/L、Apt 最佳孵育时间      25 min、TTX     [  7  ]   Hagen N A, Cantin L, Constant J, et al. Tetrodotoxin for
              与  Apt 最佳孵育时间       20 min、TTX  与  Apt 最佳孵            moderate  to  severe  cancer-related  pain:  a  multicentre,
              育温度    10 ℃、TTX   与  Apt 最佳孵育     pH  值  5。在          randomized,  double-blind,  placebo-controlled,  parallel-
              优化后的实验条件下,利用建立的方法对                    TTX  进          design  trial[J].  Pain  Research  and  Management,  2017,

              行检测,结果表明,TTX          浓度在    19.53~312.5 ng/mL        2017(1): 7212713.
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