Page 37 - 《渔业研究》2025年第3期
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渔业研究 2025,47(3) :294 − 305 http://www.hyyysci.com
Journal of Fisheries Research DOI:10.14012/j.jfr.2024157
吴隐生,潘非斐,李 聪,等. 基于 RAA-LbCas12a 技术的有毒(害)赤潮快速检测产品应用效果评估[J]. 渔业研究,2025,47(3) :294 − 305.
Wu Y S,Pan F F,Li C,et al. Application evaluation of a rapid detection product for toxic and harmful red tide based on RAA-LbCas12a[J].
Journal of Fisheries Research,2025,47(3) :294 − 305.
基于 RAA-LbCas12a 技术的有毒(害)
赤潮快速检测产品应用效果评估
吴隐生 ,潘非斐 ,李 聪 ,陈逍遥 ,陈建明 ,王 路 3*
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(1. 福州大学环境与安全工程学院,福建 福州 350108;
2. 福建省渔业资源监测中心,福建 福州 350003;
3. 闽江学院,福建省海洋生物多样性保护与永续利用重点实验室,福建 福州 350108)
摘要:【目的】在全球气候变化和人类活动对水生态环境影响日益加剧的背景下,赤潮的发
生频率和规模逐年上升,已成为威胁海洋生态环境、社会经济可持续发展和公共卫生安全的
重大生态灾害。福建作为中国的海洋大省,其海水养殖业的发展受到赤潮的显著制约。为实
现赤潮灾害的早期监测和预警,亟需一种准确、快速且特异的有毒(害)藻类检测技术。
【方法】本研究以米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi) 、剧毒卡尔藻(Karlodinium veneficum)
和短凯伦藻(K. brevis)为代表,通过现场赤潮样品和试点应用测试基于重组酶介导等温核
酸扩增(RAA)和 LbCas12a 核酸酶的藻类快速检测方法。RAA-LbCas12a 方法的主要原理
是在目标藻种的内转录间隔区(ITS)的特异性区间设计扩增引物和 crRNA,实现靶标核酸
的快速扩增和特异性识别,并使用侧流层析试纸条实现检测结果的可视化。【结果】在现场
赤潮样品测试中,即使藻细胞浓度低至 10 个/mL(仅占赤潮样品细胞总量的 0.1%) ,该技
术也能准确检测目标藻种。在为期 65 d 的试点应用中,本研究多次检测到环境样品中的目
标藻种,其结果与基于胶体金免疫的赤潮快速检测试纸条及显微镜观察结果基本一致,且未
出现明显的假阳性结果。【结论】现场应用数据表明,RAA-LbCas12a 技术具有出色的灵敏
度、特异性、可靠性和操作简便性,在赤潮藻种的现场检测中展现了广泛的适用性。该技术
仅需一个便携式快速检测工具箱,即可供一线检测人员快速开展有毒(害)赤潮藻种的现场
检测工作,为提升赤潮监测预警能力和海洋生态灾害防控水平提供了重要支撑。
关键词:赤潮;重组酶介导等温核酸扩增(RAA) ;LbCas12a 核酸酶;快速检测
中图分类号:S94 文献标识码:A 文章编号:2096 − 9848 (2025) 03 − 0294 − 12
赤潮是一种由海洋中微型浮游生物迅速增殖和 赤潮的频率、规模、强度和分布在全球范围内显著
聚集而导致的生态系统结构和功能被破坏的生态异 增加,已成为一种普遍存在的海洋生态灾害 [3-5] 。福
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常现象 。这一现象常伴随海水颜色的变化,其中 建省作为中国海洋大省,海域面积达 13.6×10 km ,
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以红色最为常见,因此得名“赤潮”。人类活动引 拥有 125 个海湾和 2 200 多个海岛。据调查显示,
起的水体富营养化及全球气候变暖等因素,为赤潮 2023 年福建省人均占有水产品量超过 200 kg,居
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藻种的生长繁殖创造了更加有利的条件 。近年来, 全国首位 。然而,赤潮对福建省海水养殖行业的
收稿日期:2024-12-11 修回日期:2025-01-06
基金项目:福建省海洋服务与渔业高质量发展专项(FZJZ-2024-1)
第一作者:吴隐生,男,硕士研究生,研究方向为赤潮监测与预警。E-mail: 18827997607@163.com
通信作者:王 路,女,副教授,研究方向为藻类多样性与系统分类。E-mail: 607wanglu@mju.edu.cn
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