Page 25 - 《水产学报》2026年第3期
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3 期                                     水    产    学    报                                 50 卷
                             gapdh  COI   foxl2  sox3  nanog  dnd   ddH 2 O

                         M  O  OC  O  OC  O  OC  O  OC  O  OC  O  OC  O  OC
                      bp
                    2 000
                    1 000
                     750
                     500
                     250
                     100

                                               (a)                                      (b)

                               gapdh   COI    dmrt1   amh     dnd    ddH 2 O
                          M   T  TC   T  TC  T   TC  T  TC   T  TC  T   TC
                      bp
                    2 000

                    1 000
                     750
                     500
                     250
                     100
                                               (c)                                      (d)

                              图 2    日本鳗鲡性腺组织细胞系验证的          PCR  扩增产物电泳图及染色体核型图
              (a) (b) 分别为鉴定  AJOTCL  验证的  PCR  扩增产物电泳图、处于有丝分裂中期染色体图像;(c) (d) 分别为鉴定      AJTTCL  验证的  PCR  扩增产
              物电泳图、处于有丝分裂中期染色体图像。M.DL2000 DNA marker,O.日本鳗鲡卵巢组织           DNA,OC.日本鳗鲡卵巢组织细胞系       DNA,T.日
              本鳗鲡精巢组织    DNA,TC.日本鳗鲡精巢组织细胞系       DNA,ddH 2 O.阴性对照,模板为无菌水。
               Fig. 2 Electrophoresis patterns of PCR amplification products of gonadal tissue cell lines and karyotype of A. japonica
              (a) and (b) are electrophoretograms of PCR amplification products and images of chromosomes in metaphase of mitosis, respectively. (c) and (d) are
              electrophoretograms of PCR amplification products verified by AJTTCL and images of chromosomes in metaphase of mitosis, respectively. M. DL2000
              DNA marker, O. DNA of ovarian tissue in A. japonica, OC. DNA of ovarian tissue cell line in A. japonica, T. DNA of testicular tissue in A. japonica,
              TC. DNA of testicular tissue cell line in A. japonica, ddH 2 O. negative control, the template is sterile water.

                                    表 3    AJOTCL  与  AJTTCL  第  30  代中期分裂相染色体数目表
                    Tab. 3    List of chromosome number in metaphase division phase of AJOTCL and AJTTCL at passage 30
                                       日本鳗鲡卵巢组织细胞系(第30代)                     日本鳗鲡精巢组织细胞系(第30代)
                   染色体数目                      AJOTCL (P30)                          AJTTCL (P30)
                 chromosome number     分裂相数目              百分比/%             分裂相数目               百分比/%
                                  count of metaphase spreads  percentage  count of metaphase spreads  percentage
                      ≤34                 9                  9                  5                 5
                      35                  5                  5                  3                 3
                      36                  4                  4                  2                 2
                      37                  7                  7                  5                 5
                      38                  70                70                 79                 79
                      ≥39                 5                  5                  6                 6
                    总和 total             100                100                100                100

               2.4    转染效率                                     EGFP  表达,其中    AJOTCL  的转染效率达      70%~80%

                   AJOTCL  与  AJTTCL  通过电穿孔法成功转染               (阳性细胞百分比,n=3;图版Ⅴ-1~3),AJTTCL
              pEGFP-N1  质粒,转染      24 h  后即可检测到细胞内             的转染效率为       50%~60% (n=3;图版Ⅴ-4~6)。转

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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