Page 27 - 《水产学报》2026年第3期

3 期 水 产 学 报 50 卷

100 μm 1 100 μm 2 100 μm 3 100 μm 4

100 μm 5 100 μm 6 100 μm 7 100 μm 8

图版 Ⅵ 日本鳗鲡性腺组织细胞系过表达后细胞增殖情况
1. AJOTCL 转染 EGFP(对照组-1) 48 h 的细胞形态；2. AJOTCL 过表达 nanog 48 h 的细胞形态；3. AJOTCL 转染 EGFP(对照组-2) 48 h 的细胞
形态；4. AJOTCL 过表达 oct4 48 h 的细胞形态；5. AJTTCL 转染 EGFP(对照组-3) 48 h 的细胞形态；6. AJTTCL 过表达 lin28a 48 h 的细胞形
态；7. AJTTCL 转染 EGFP(对照组-4) 48 h 的细胞形态；8. AJTTCL 过表达 lin28b 48 h 的细胞形态。
Plate Ⅵ Cell proliferation in A. japonica gonad tissue cell lines after overexpression
1. the cell morphology of AJOTCL after transfection with EGFP (control-group-1) at 48 h; 2. the cell morphology of AJOTCL after overexpression with
nanog at 48 h; 3. the cell morphology of AJOTCL after transfection with EGFP (control-group-2) at 48 h; 4. the cell morphology of AJOTCL after over-
expression with oct4 at 48 h; 5. the cell morphology of AJTTCL after transfection with EGFP (control-group-3) at 48 h; 6. the cell morphology of
AJTTCL after overexpression with lin28a at 48 h; 7. the cell morphology of AJTTCL after transfection with EGFP (control-group-4) at 48 h; 8. the cell
morphology of AJTTCL after overexpression with lin28b at 48 h.
3 讨论 (Acipenser dabryanus) YSCF 细 胞 系 鉴 定 方 案 [21] ，
通过 COI 基因测序，确认 AJOTCL 与 AJTTCL 的
3.1 性腺细胞系的建立、形态特征与鉴定 COI 序列与日本鳗鲡参考基因组相似度>99%，证

水生动物细胞系是病毒分离、毒理学、细胞 明细胞来源于日本鳗鲡。此外，AJOTCL 高表达
生物学及遗传调控研究等的重要体外研究工具 。 卵巢体细胞标记基因 foxl2 [22] 与 sox3 [23-24] ，低表达
[15]
本研究采用组织块贴壁法 ，首次成功建立日本 生殖细胞标记基因 nanog [25] 和 dnd [26-27] ；同样的，
[14]
鳗鲡两株细胞系 (AJOTCL 和 AJTTCL)，均以成纤 AJTTCL 高 表 达 支 持 细 胞 标 记 基 因 dmrt1 [14, 28] 、
[29]
维样细胞为主。比较研究表明，鱼类性腺细胞 amh ，极低表达生殖细胞标记基因 dnd，表明所
系普遍存在上皮样与成纤维样两种形态。如大 获得的两株细胞系均为体细胞主导的混合群体 (含
黄 鱼 、 颌 须 鮈 (Gnathopogon caerulescens) [16] 精 极少量生殖细胞，占比可能＜5%)，故本研究培
[9]
巢细胞系为成纤维样细胞；条斑星鲽 (Verasper 养的日本鳗鲡性腺细胞系均以体细胞为主体，该
[9]
[9]
moseri) [17] 卵巢细胞系呈成纤维形态，而大黄鱼 、 结果与大黄鱼性腺细胞系 (LYCO/LYCT) 相似。
红鳍东方鲀 (Takifugu rubripes) [18] 卵巢细胞系为梭 推测其原因，首先是体细胞在体内具有更强的增
形上皮样细胞。日本鳗鲡 AJOTCL 和 AJTTCL 的 殖与适应能力，在体外培养中更容易占据优势；
形态特征与其他鱼类性腺细胞系存在共性 (以上皮 其次，生殖细胞 (特别是原始生殖细胞) 的存活、
样或成纤维样为主)，但物种特异性导致具体形态 增殖通常依赖于特定的细胞因子和微环境信号 (如
差异 (如细胞长短、伴生细胞类型等)。 BMP、SCF、LIF 等) [30-31] ，而在本研究所采用的基
本研究建立的 AJOTCL 与 AJTTCL 染色体数 础培养基及血清培养体系中，这些关键信号可能
目与日本鳗鲡染色体数目一致 [19-20] ，证实细胞系 供应不足或完全缺失，从而导致生殖细胞在传代
遗传结构完整，且两株细胞系具有可持续生长能 过程中逐渐丢失；此外，日本鳗鲡生殖细胞可能
力 ， 可 以 用 于 后 续 的 实 验 研 究 。 参 照 长 江 鲟 对体外培养条件尤为敏感，需进一步优化培养体

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