Page 211 - 《水产学报》2026年第3期
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3 期                                     水    产    学    报                                 50 卷

                   罗氏沼虾 (Macrobrachium rosenbergii) 原产于        1 (NOD1) 的激活至关重要，敲低             SGT1  可抑制
              东南亚，因生长快、适应性强、肉质鲜美、养殖                            NOD1  介导的免疫信号        [17-19] ，并协同  HSP90  促进
              周期短等优点而被广泛养殖，在广东、江苏以及                            炎 症 小 体 的 组 装 以 及    1L-1β  的 成 熟 和 释 放  [20] 。
              浙江等地形成规模化产业            [1-2] 。近年来，随着高密           HSP90-Beclin1  复合体是   Toll 样受体 (TLRs) 介导
                                                                             [21]
              度养殖模式发展和养殖环境恶化，罗氏沼虾疾病                            自噬的关键节点 。SGT1          作为   NOD1  信号复合物
              暴发的频率显著增加          [3-4] ，严重威胁其健康养殖的             的关键调节元件，其通过调控              NOD1  稳定性和功
              发展。                                              能活性，参与宿主对胞内病原体的免疫应答与细
                   罗氏沼虾作为无脊椎动物主要依赖先天免疫                         胞凋亡过程 。然而，SGT1           在甲壳动物中的分子
                                                                         [21]
              系统抵御病原侵袭，通过信号转导和效应分子调                            功能及先天免疫调控机制尚不清晰。
              控发挥防御作用        [5- 6] 。在免疫应答过程中，自噬常                  本 研 究 以 罗 氏 沼 虾 为 对 象 ， 克 隆 和 鉴 定
              作为细胞保护机制被激活，清除受损细胞器和大                            SGT1  基因  (命名为   MrSGT1)，分析其组织表达分
              分子以维持机体免疫稳态。当自噬过度或调控异                            布和免疫响应特征，探究其在病原感染中的分子
                                        [7]
              常时，也会促进凋亡的发生 。自噬与凋亡在分                            机 制 ， 系 统 揭 示     MrSGT1  在 嗜 水 气 单 胞 菌
              子水平上高度交互共同决定细胞命运。例如在成                            (Aeromonas hydrophila) 感染过程中对自噬与凋亡
              肌细胞分化过程中，凋亡水平的上升会激活自噬，                           的调控功能。该研究旨在阐明               MrSGT1  在甲壳类
                                                 [8]
              而自噬水平的升高又会反馈抑制凋亡 。二者还                            动物先天免疫调控中的关键作用，为罗氏沼虾的
              协同调控抗氧化反应          (如  Nrf2  途径激活) 防止过度          分子免疫机制解析及疫病防控提供理论基础和潜
                                                               在的基因靶点。
              氧化损伤 。这种串扰是通过关键分子的相互作
                       [9]
              用实现的。例如自噬相关基因              5 (ATG5) 和  ATG12      1    材料与方法
              可与   Bcl-2  家族分子相互作用促进内源性凋亡，

              Beclin1  通过与磷酸化的      Bcl-2  相互作用调控自噬             1.1    实验材料
              进而影响凋亡，同时半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水                                 实验动物与菌株  本实验所用的罗氏沼
              解酶 (Caspase-3) 可裂解    Beclin1，阻断自噬小体的            虾  [ 平均体重   (10.00±0.50) g] 购买于广东省肇庆市
              形成和自噬溶酶体的融合从而抑制自噬                  [8-9] 。此外，    莲塘镇。将虾置于持续曝气的水池                (2 m ) 中饲养，
                                                                                                  3
              ATG5  还 可 通 过 与    Fas 相 关 死 亡 结 构 域 蛋 白         水温为   (28±2) ℃，pH  值为   7.5 ~ 8.0，每天使用商
                                            [10]
              (FADD) 相互作用抑制外源性凋亡 。或被钙依赖                        品化饲料饲喂       3  次。养殖   2  周适应环境后，选择
              蛋白酶 (Calpain) 裂解后诱导线粒体释放细胞色素                     健康、大小均等的罗氏沼虾个体进行后续实验。
              C (Cytc)，并激活    Caspase-3  介导的内在凋亡级联             嗜水气单胞菌由珠江水产研究所水产病害与免疫
                   [10]
              反应 。可见自噬和凋亡在免疫防御中存在复杂                            研究室鉴定并保存。本研究涉及的实验动物处理
                         [11]
              的相互作用 。                                          严 格 遵 循 《 实 验 动 物 管 理 条 例 》 (国 务 院 令 第
                   抑制  SKP1  的  G2  等位基因 (SGT1) 是一种进           676  号) 及相关动物福利规范，实验方案经所在单

              化上高度保守的核蛋白，最初在酿酒酵母 (Sac-                         位动物实验伦理委员会审查同意。
              charomyces cerevisiae) 中被发现，与     SCF  复合物            主要试剂  动物组织总            RNA  提取试剂盒
              (Skp1-Cul1-F-box) 相关，随后在动物和植物中相                  [ 天根生化科技     (北京) 有限公司      ]，T7 RiboMAX  TM
              继被鉴定出来       [12-13] 。相关研究表明   SGT1  是热休克        Express RNAi System (Promega Corporaion，美国)，
              蛋白   90 (HSP90) 的分子伴侣蛋白，参与蛋白折叠、                  SYBR Green Pro Taq HS 预混型 qPCR 试剂盒 Ⅲ(含
                                                                                                       TM
              细胞周期和免疫信号转导              [14] 。在秀丽隐杆线虫           低  Rox) (艾科瑞生物工程有限公司)，PrimeScript  Ⅱ
                                                                                                      TM
              (Caenorhabditis elegans) 中，SGT1  能够识别  HSP90     1st  Strand  cDNA  Synthesis  Kit、 PrimeScript   RT
                                             [15]
              的不同构象状态并调控蛋白稳定性 。在植物中，                           reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 、
                                                                   TM
              SGT1  与  HSP90、 RAR1 (required for Mla12 resist-  pMD 18-T  Vector  Cloning  Kit(TaKaRa， 日 本 )，
              ance) 形成复合体，调节植物抗性蛋白的稳定性 。                       Green Taq Mix(南京诺唯赞生物科技股份有限公
                                                        [16]
              在动物中，SGT1       对含核苷酸结合寡聚化结构域                    司)，BCA   蛋白浓度测定试剂盒           (增强型)[ 翌圣生

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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