Page 206 - 《水产学报》2026年第3期
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3 期            聂    蒙,等:罗非鱼源无乳链球菌缺失株             ΔcrRNA  与  ΔcpsE  的毒力与免疫效力              50 卷

                            50       ###                         20       ###
                                      ***
                        MHC Ⅱβ mRNA 的相对表达量 relative mRNA expression of MHC Ⅱβ  30 5  ###  **  * ##  * #  CD4-1 mRNA 的相对表达量 relative mRNA expression of CD4-1  15 5  ###  ***  ***  **
                            40

                            20
                            10
                                            ##
                                                                 10
                                                                                 ###
                                                                                      ###
                                                                                           ###
                             0
                                 1
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                                                                                 7
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                                      3
                                           7
                                                14
                                       免疫后时间/d
                                                                            免疫后时间/d
                                   time post immunization  28     0   1  time post immunization  28
                                           (a)                   10             (b)   ***    PBS
                                     ###
                            30
                        IFN-γ mRNA 的相对表达量 relative mRNA expression of IFN-γ  20  ***  ***  * ##  IgM mRNA 的相对表达量 relative mRNA expression of IgM  8  ### ### ### ###  ### ###  *** ΔcrRNA
                                                                                             ΔcpsE
                                       ###
                                                                                ***
                                                 ###
                                                                  6
                                                                           ***
                                            ###
                                                                                           ###
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                            10
                                                                  2
                             0
                                           7
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                                 1
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                                       免疫后时间/d  14   28           0   1    3 免疫后时间/d 14   28
                                   time post immunization               time post immunization
                                           (c)                                  (d)

                            图 3    尼罗罗非鱼免疫     ΔcpsE  和  ΔcrRNA  后脾脏组织中相关免疫基因的表达水平
              (a)  MHC  Ⅱβ, (b)  CD4-1, (c)  IFN-γ, (d)  IgM; 与  PBS  组 相 比 , #.  P<0.05, ##.  P<0.01, ###.  P<0.001; ΔcpsE  和  ΔcrRNA  两 组 比 较 ,
              *. P<0.05,**. P<0.01,***. P<0.001。
                           Fig. 3 Expression level of immune-related genes in the spleen tissue of O. niloticus after
                                             immunization with ΔcpsE and ΔcrRNA
              (a) MHC Ⅱβ, (b) CD4-1, (c) IFN-γ, (d) IgM; #. P<0.05, ##. P<0.01, ###. P<0.001, indicates significantly different changes between this group and the
              PBS group. *. P<0.05, **. P<0.01, ***. P<0.001, indicates significantly different changes between ΔcpsE and ΔcrRNA.

              系很近。这一发现不仅为无乳链球菌疫苗研发明                            免疫保护效力,以期为罗非鱼无乳链球菌病的防
              确了方向,也为基于          Ia-ST7  型菌株  GD201008-001     控提供新的疫苗候选。通过荚膜染色,证实缺失
              为亲本株衍生的弱毒菌株作为活疫苗候选提供了                            株  ΔcrRNA  荚膜完好保留,而        ΔcpsE  丧失形成荚
              理论基础。                                            膜的能力,与实验室前期研究结果相一致 。与
                                                                                                     [11]
                   本课题组前期研究发现,相比野生株,ΔcrRNA                     野生株   GD201008-001  相比,ΔcrRNA    和  ΔcpsE  的
              在小鼠感染模型中毒力显著下降,可诱导更强的                            LD 值均大于      10  CFU/尾,后者    LD 值更低,达
                                                                              8
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              宿主免疫反应,且          CPS  生成水平显著提高         [10-11] 。  到  10  CFU/尾以上,且    2  个缺失株感染组       1×10 6
              无乳链球菌的       CPS  通常被认为是最具潜力的疫苗                  CFU/尾的攻毒剂量未引起脑组织或脾脏明显的病
                                                        [2]
              候选抗原之一      [14, 27] ,且是血清型的主要决定因素 ,             理损伤,表明       ΔcrRNA  和  ΔcpsE  的毒力均显著下
              而中国地区罗非鱼源无乳链球菌以血清型                   Ia 为主,      降。从安全性角度考虑,ΔcrRNA              和  ΔcpsE  满足
              因 此 推 测 , 具 有    CPS  高 生 成 能 力 的 弱 毒 菌 株        弱毒疫苗的要求。考虑到水产养殖的特殊性,本
              ΔcrRNA  可能是罗非鱼无乳链球菌病疫苗的理想                        研究采用单次免疫策略评估疫苗效力,免疫保护
              候选。本研究比较了缺失株               ΔcrRNA  和  ΔcpsE  的   实验结果显示,无论是注射还是浸泡的免疫方式,

              中国水产学会主办  sponsored by China Society of Fisheries                          https://www.china-fishery.cn
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