Page 207 - 《水产学报》2026年第3期

3 期 水 产 学 报 50 卷

缺失株 ΔcrRNA 均能提供优于 ΔcpsE 的保护效果。 作为接种疫苗具有更强的免疫保护效力，同时对
尽管 ΔcpsE 组毒力下降更为显著，但免疫保 比注射和浸泡两种免疫方式，发现注射效果更好。
护效果却不及 ΔcrRNA，这一点不难理解，虽然 然而，考虑到水生动物的特殊性，注射免疫存在
菌株失去毒力后安全性很高，但可能导致关键的 费时费力且可造成应激反应方面的缺陷，因此浸
[6]
免疫原，特别是能激发保护性免疫反应的抗原丢 泡免疫更具应用前景 。本研究发现，ΔcrRNA 浸
失或改变，使得疫苗无法诱导有效的保护性免疫 泡免疫可达到接近 80% 的相对保护力，说明该菌
[28]
应答 。cpsE 是 CPS 合成的关键基因，其缺失导 株是较为理想的浸泡免疫用疫苗的候选，未来研
致 CPS 无法合成，而无乳链球菌的 CPS 又是重要 究将重点开展 ΔcrRNA 浸泡免疫程序的优化。
的疫苗抗原，这可能是 ΔcpsE 免疫保护效果低下
（作者声明本文无利益冲突）
的主要原因。Hao 等 [17] 以无乳链球菌WC1535 株
为研究对象，通过敲除 CPS 合成基因簇的唾液酸
参考文献
合成相关基因构建的弱毒株 ΔSia，为罗非鱼的强 (References)：
[ 1 ] 石杰, 黎洁, 张永安. 鱼类无乳链球菌病流行病学及防控技术
毒株感染提供了 50% 的免疫保护力 ，这一免疫
[29]
研究进展 [J]. 水生生物学报, 2025, 49(1): 012513.
保护效果与本研究结果类似。然而，Zhang 等 [15]
Shi J, Li J, Zhang Y A. Research progress on the epidemiology
通过敲除鱼源无乳链球菌 WC1535 株 CPS 合成基
and prevention and control technology of Streptococcus agalac-
因簇，构建的弱毒株 Δcps 提供了 90.47% 的免疫
tiae disease in fish[J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 2025, 49(1):
保护力，与本研究的免疫效果差异较大。具体原
012513 (in Chinese).
因尚不清楚，推测可能与免疫剂量和攻毒剂量不
[ 2 ] Amundson N R, Flores A E, Hillier S L, et al. DNA
同有关，也可能与实验动物有关，目前罗非鱼暂 macrorestriction analysis of nontypeable group B streptococcal
无标准化的实验动物模型，不同批次、不同大小、 isolates: clonal evolution of nontypeable and type V isolates[J].
不同产地的罗非鱼，都可能导致不同的结果。 Journal of Clinical Microbiology, 2005, 43(2): 572-576.
脾脏是鱼类释放免疫因子和防御病原微生物 [ 3 ] Slotved H C, Kong F R, Lambertsen L, et al. Serotype IX, a
的主要器官，也是鱼类主要的二级免疫器官，可 proposed new Streptococcus agalactiae serotype[J]. Journal of
同时启动体液免疫和细胞免疫 。鱼类脾脏除产 Clinical Microbiology, 2007, 45(9): 2929-2936.
[30]
生分泌抗体的细胞及免疫球蛋白外，还参与 B 细 [ 4 ] Zhou M, Li Q, Yu S, et al. Co-proliferation of antimicrobial
胞的发育以及抗原处理与递呈，这些都是产生有 resistance genes in tilapia farming ponds associated with use of
效适应性免疫反应的重要过程，因此本研究检测 antimicrobials[J]. Science of the Total Environment, 2023, 887:
了 脾 脏 中 免 疫 相 关 基 因 的 表 达 。 结 果 发 现 ， 164046.

ΔcrRNA 诱导的免疫相关基因如 MHC Ⅱβ、CD4-1、 [ 5 ] Haenen O L M, Dong H T, Hoai T D, et al. Bacterial diseases
IFN-γ 和 IgM 等的表达水平较 ΔcpsE 呈现出更为 of tilapia, their zoonotic potential and risk of antimicrobial res-
istance[J]. Reviews in Aquaculture, 2023, 15(S1): 154-185.
显著的上调。MHC Ⅱ在细胞外部抗原递呈上发挥
[ 6 ] Adams A. Progress, challenges and opportunities in fish vac-
重要作用，有助于罗非鱼抵抗无乳链球菌感染 ；
[31]
cine development[J]. Fish & Shellfish Immunology, 2019, 90:
CD4 T + 淋巴细胞同样是宿主抵抗病原调节免疫反
210-214.
[32]
应的重要驱动因子 ，在硬骨鱼的免疫反应中具
[ 7 ] Jiang F G, Doudna J A. CRISPR-Cas9 structures and mechan-
有重要地位 [33] ；Th1 细胞主要参与抵抗细胞内细
isms[J]. Annual Review of Biophysics, 2017, 46: 505-529.
菌的免疫反应，其分泌的 IFN-γ 对罗非鱼激活巨
[ 8 ] Li R P, Fang L Z, Tan S R, et al. Type I CRISPR-Cas targets
[18]
噬细胞和抵抗病原菌感染至关重要 ；IgM 则是
endogenous genes and regulates virulence to evade mammalian
罗非鱼参与免疫反应的主要免疫球蛋白，存在于
host immunity[J]. Cell Research, 2016, 26(12): 1273-1287.
所有免疫组织中，常用来衡量早期体液免疫反 [ 9 ] Sampson T R, Saroj S D, Llewellyn A C, et al. A CRISPR/Cas
应 [34-35] 。因此，这些免疫相关基因的显著上调，提 system mediates bacterial innate immune evasion and vir-
示 ΔcrRNA 比 ΔcpsE 诱导出了更强烈的免疫应答。 ulence[J]. Nature, 2013, 497(7448): 254-257.
综上，本研究系统比较了 ΔcrRNA 和 ΔcpsE [10] Dong Y H, Ma K, Cao Q, et al. CRISPR-dependent endogen-
作为弱毒活疫苗的免疫保护潜力，证实 ΔcrRNA ous gene regulation is required for virulence in piscine Strepto-

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