Page 215 - 《水产学报》2026年第3期
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3 期                                     水    产    学    报                                 50 卷

              物中进化序列相对保守           (图  3)。系统进化树分析显              2.2    MrSGT1  组织分布
              示,罗氏沼虾与日本沼虾、脊尾白虾 (Palaemon
                                                                   通过   qRT-PCR  检测  MrSGT1  在健康罗氏沼虾
              carinicauda)、美洲螯龙虾 (Homarus americanus)、
                                                               各组织中的表达情况。如图              5  所示,MrSGT1    在
              三疣梭子蟹 (Portunus trituberculatus) 等甲壳类动
                                                               所有被检测的组织中均表达,且具有一定的组织
              物聚为一支,其中罗氏沼虾与日本沼虾亲缘关系
                                                               差异性。在血淋巴中           MrSGT1  相对表达量最低,
              最近而形成一小支,其他物种聚为一支,形成甲
                                                               在肝胰腺中表达量最高,达到血淋巴的                18.33  倍  (P<
              壳类、节肢类与哺乳类等对应分支(图                 4)。这表明
                                                               0.05),显著高于其他组织中的相对表达量,肌肉
              罗氏沼虾与日本沼虾亲缘关系最近,属于甲壳动
                                                               组织中    MrSGT1  相对表达量次之,为血淋巴的
              物中高度同源的近缘物种;而甲壳类动物整体聚
                                                               8.12  倍  (P<0.05)。在肠道、心脏、胃、眼柄、鳃
              为一支,与其他节肢动物及哺乳动物明显分化。
                                                               等组织中     MrSGT1  的相对表达量分别为血淋巴的
                                                               4.59、4.09、2.89、2.86  和  2.14  倍。
                    bp      M        SGT1

                                                                2.3    病原刺激下的    MrSGT1  动态表达
                    2 000
                                                                   通过   qRT-PCR  检测嗜水气单胞菌和           LPS  刺
                    1 000                                      激罗氏沼虾后       MrSGT1  在肝胰腺和鳃中的时序表
                    750                          687 bp
                    500                                        达 变 化  (图  6)。 结 果 显 示 , 肝 胰 腺 和 鳃 中 的
                    250                                        MrSGT1  均 呈 现 显 著 上 调 表 达 。 在 肝 胰 腺 中 ,
                    100                                        MrSGT1  在嗜水气单胞菌刺激后呈现先升高后降
                                                               低再升高的趋势,总体呈上升趋势,在刺激后的
                        图 1    PCR  扩增  MrSGT1  基因             第  6  和  72  小时分别达到峰值,分别为对照组的           3.26
              M. DL2000 DNA  分子标准。                             倍 (P<0.01) 和  5.51  倍 (P<0.01);MrSGT1  在  LPS  刺
                   Fig. 1 Amplification of MrSGT1 using PCR    激后呈现先降低后升高的表达趋势,在                   72 h  达到
              M. DL2000 DNA molecular standard.
                                                               表达量峰值,为对照组的           1.74  倍 (P<0.05) (图  6-a)。

                     1  1     ATGAATGAAAATGGCAGTGAAAAAGCAGAGAAGACTGAAGAGGTCAAGCCACCTGCTGTTAATGAGATGCCAGTTCCAAAAATAAAGCAC
                     1  1       M    N      E      N     G      S     E       K     A      E       K      T     E      E      V      K     P       P   A     V     N     E     M      P     V     P      K      I      K      H
                     91 91    GATTGGTATCAAACGGAATCCCATGTAATTATCACAGTTCTCATTAAAAACCAGAAAGCTGAGAATGTCAAGGTTAATTTTACTGAGAAA
                     31 31       D    W    Y     Q      T      E      S     H     V      I     I      T      V      L     I      K      N     Q      K   A     E      N     V      K     V     N     F     T      E      K
                     181
                     181   ACTGTTAGTGTTACAGCTCCTCTTCCAAGTGGATCAGAGTACAGCTTAGAATTAGACGTCTGCCACCCAATCAATCCTGAACTGTCTTCA
                     61 61       T     V     S      V     T      A      P     L      P      S      G     S      E      Y      S     L      E     L    D     V     C     H      P      I      N     P      E      L      S     S
                     271
                     271   TTCAAAGTTGTACCTTCAAAAATTGAAGTGAAGATGAAAAAGATGGATGGCATACATTGGAAAGCCTTGGAAGGTGATGGTGCAGAACCT
                     91 91      F      K      V    V      P     S      K      I      E      V      K     M     K      K     M     D     G      I     H  W     K       A     L      E      G      D    G     A       E      P
                     361
                     361   GCAGTCAAACCTGCTCCTGGAGACCCCACCAAAAAAGATTTCGCTCCAGCTTATCCATCGTCTGCTTCTAAGAAGCATGACTGGAATAAG
                     121
                     121      A      V     K      P      A     P      G      D     P       T     K      K      D    F      A     P       A     Y   P     S      S      A     S     K      K     H      D    W     N     K
                     451
                     451 ATTGAGGCAGACATCAAGGCTGAGGAGGAAAATGAAAAGCTTGAAGGGGATGCTGCACTCAATCAGCTCTTCCAGAAAATTTATGGACAG
                     151
                     151      I      E      A      D     I       K      A     E      E      E      N     E       K      L     E      G      D     A   A      L      N     Q     L      F     Q      K      I     Y     G     Q
                     541
                     541   GGATCGGATGAAACTAAGAGAGCAATGAATAAGTCATTTATGGAATCGGGAGGAACTGTACTCAGCACAAACTGGAAGGAAGTTGCAAGT
                     181                                                 V     L      S      T      N     W     K      E      V      A      S
                     181      G     S      D     E      T     K      R      A     M     N     K      S     F    M     E     S       G     G      T
                     631
                     631   GAGAAGGTAGACGTGAAACCTCCAGATGGCATGGAATACAAAAAGTGGAACCAGTGA
                     211      E      K      V     D      V     K      P      P      D     G    M      E     Y     K      K     W      N     Q      -
                     211
                                                 图 2    MrSGT1  基因序列分析
              黑色窗格表示起始密码子       (ATG) 和终止密码子  (TGA);红色窗格表示   N-糖基化位点;黄色箭头代表丝氨酸;蓝色箭头代表苏氨酸;绿色
              箭头代表酪氨酸;下划线所包含的氨基酸为           SMART  预测的  MrSGT1  蛋白结构域。
                                           Fig. 2 Sequence feature analysis of MrSGT1
              The black pane represents the initiator codon (ATG) and terminator codon (TGA); the red pane represents the site of N-glycosylation; the yellow arrow
              represents serine; the blue arrow represents threonine; the green arrow represents tyrosine; the amino acids contained in the underline are the predicted
              MrSGT1 protein domains by SMART.

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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