Page 183 - 《水产学报》2026年第3期

3 期 水 产 学 报 50 卷

结合探针
结合探针
binding probe binding probe

自由探针 自由探针
free probe free probe
泳道 lane 1 2 3 4 5 泳道 lane 1 2 3 4 5
核蛋白 NP (10 μg) − + + + + 核蛋白 NP (10 μg) − + + + +
生物素标记探针 + + + + + 生物素标记探针 + + + + +
biotin-lbeled probe (1X) biotin-lbeled probe (1X)
竞争探针 competitor (400X) − − + − − 竞争探针 competitor (400X) − − + − −
突变竞争探针 − − − + − 突变竞争探针 − − − + −
mutative competitor (400X) mutative competitor (400X)
Fe 2 O 3 NPs (160 mg/L) − − − − + Fe 2 O 3 NPs (160 mg/L) − − − − +
(a) (b)
图 6 黄颡鱼 myog 和 slc7a11 启动子上预测的 NF-κB1 结合序列的 EMSA 分析
(a) 位于 myog 启动子上–6 ~ –16 bp NF-κB1 结合序列；(b) 位于 slc7a11 启动子上–430~–439 bp NF-κB1 结合序列。
Fig. 6 Assay of NF-κB1 binding sequences predicted on myog and slc7a11 promoters in P. fulvidraco by EMSA
(a) NF-κB1 binding sequence from –6 bp to –16 bp on the myog promoter; (b) NF-κB1 binding sequence from –430 bp to –439 bp on the slc7a11 promoter.
的机制之一 。因此，本实验结果表明添加过量 位点突变后，这种抑制同样得到缓解，而将位点
[27]
的纳米氧化铁，激活了转录因子 NF-κB1 的活性。 突变后，与对照组相比，纳米氧化铁的处理同样
3.6 Fe O NPs 孵育对 myog、slc7a11 启动子 抑制了转录活性，说明该结合位点对 slc7a11 启动
3
2
转录活性分析 子存在负调控作用，纳米氧化铁加剧了这种作用。
EMSA 结果分析表明，NF-κB1 可以与 slc7a11 启
根据本研究结果，myog 启动子上−6 bp/−16
动子上的 DNA 结合序列 (−430 bp/−439 bp) 特异性
bp 的 NF-κB1 结合位点的存在显著抑制了 myog 启
结合，说明 NF-κB1 能够直接结合到 slc7a11 启动
动子的转录活性，并且在将位于序列中的 NF-κB1
子上的特定序列 (−430 bp/−439 bp)，同时，纳米
位点突变后，这种抑制得到了缓解，说明该结合
氧化铁的处理会增强这种作用。近年来的研究也
位点对 myog 启动子存在负调控作用，而 EMSA
证实，铁离子的蓄积可以通过减少 slc7a11 的表达
结果分析表明，NF-κB1 可以与 myog 启动子上的
进而抑制细胞内谷胱甘肽生成的 Xc 系统，促进
DNA 结合序列 (−6 bp/−16 bp) 特异性结合，说明
[29]
铁死亡的发生 。此外，Li 等 [10] 的研究中也提到，
NF-κB1 能够直接结合到 myog 启动子上的特定序
slc7a11 的表达可能受到 NF-κB 的调控。而铁死亡
列 (−6 bp/−16 bp) 上，同时，纳米氧化铁的处理会
能够通过抑制成肌细胞分化对肌肉发育产生负面
增强这种作用，因此认为 NF-κB1 可以直接介导
[30]
影响 。因此认为纳米氧化铁不仅能够直接抑制
myog 的转录调控从而对肌肉发育产生影响。有研
slc7a11 的表达对肌肉发育产生影响，也能通过
究表明，在缺乏经典通路成分 Rel A / p65、κB 激
NF-κB1 介导 slc7a11 的转录调控从而介导铁死亡
酶 β 抑制剂 (IKKβ) 或 IKKγ 的 MyoD 表达的成纤
的发生，进而对肌肉发育产生影响。
维细胞中，肌生成增强。在缺乏 Rel A/p65 或
IKKβ 的成肌细胞中也有类似的增加 [28] 。 对于 4 结论
slc7a11 启动子，其上−430 bp/−439 bp 的 NF-κB1
结合位点的存在抑制了其转录活性，并且在将该 综上，以纳米氧化铁为铁源，使用适量添加

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